VO's week 3

Question 1

in welke fase brengen cellen de meeste tijd door?

Answer 1

G1 > S > G2 > M

Question 2

m.b.t. DNA, G1 =

Answer 2

1/2 * G2

Question 3

paclitaxel

Answer 3

bindt aan tubuline waardoor microtubuli niet meer kunnen depolymeriseren en cellen dus geen vrij tubuline hebben en mitose niet verder kan gaan door het gebrek aan microtubuli

Question 4

ioniserende straling =>

Answer 4

dubbelstrengsbreuken

Question 5

tijdens welke fasen vd celcyclus vindt homologge recombinatie plaats?

Answer 5

G2 en S
je hebt 2 zusterchromatiden nodig

Question 6

bestuderen van cellen in celcyclus adhv 2 methoden:

Answer 6

• FACS: door kwantificeren van het DNA-gehalte
• immunokleuring

Question 7

waarom bij FACS 3 pieken?

Answer 7

cellen bevatten verschillende hoeveelheden DNA

Question 8

als het gaat om hoeveelheid DNA, kijk naar

Answer 8

x-as

Question 9

als het gaat om hoeveelheid cellen, kijk naar

Answer 9

y-as

Question 10

FACS

Answer 10

• DNA wordt gekleurd door een fluorescent DNA-bindend molecuul: PI
• een laser straalt op het stroompje cellen per cel en dat creert een voltage
• x-as = intensiteit van fluoriscentie
• y-as = hoeveelheid cellen
• de cellen moeten hiervoor wel allemaal los van elkaar zijn, dus geen solide tumoren

Question 11

immunokleuringen

Answer 11

• HE
• phospho-histon H3 (voor mitose)
• geminine/cycline A kleuring (S/G2)

Question 12

kijk in schrift naar die pieken

Question 13

waarom zijn er cellen met minder DNA dan cellen in G1?

Answer 13

cellen in apoptose

Question 14

aphidicolin

Answer 14

DNA-polymerase remmer

Question 15

welke kleuring zou je moeten gebruiken om te onderzoeken of mitose wordt geremd?

Answer 15

geminine en phospho-histon H3

Question 16

ethymyl doxy uridine (EdU)

Answer 16

wordt ipv T ingebouwd in DNA => chemische reactie => kleuring zodat je kan zien of iets in de S-fase is geweest

Question 17

als je dagenlang EdU toevoegt kan je geen verschil meer zien in verschillende celfases