VL 7 Postina PKC

Question 1

Welche drei Familien von PKC existieren?

Answer 1

Classic
Novel
Atypical

Question 2

Über welche zwei Wege kann die Phospholipase C aktiviert werden?

Answer 2

Gq oder RTK

Question 3

Aus welchen Domänen sind die verschiedenen Familien der PKC (Classic, Novel, Atypical) aufgebaut?

Answer 3

Beachte den Unterschied: Regulatorische Domäne und Kinase Domäne

Question 4

Die verschiedenen Domänen werden über unterschiedliche Moleküle reguliert.
Woran bindet:
C1
C2

Answer 4

C1: Diacylglycerol
C2: Ca2+ und Phospholipide

Question 5

Phorbolester sind das Gift von verschiedenen Pflanzen, unter anderem Wolfsmilchgewächsen.
-> Worauf beruht diese Toxizität?

Answer 5

Phorbolester können wie DAG an die C1 Domäne der PKC binden und diese damit aktivieren
-> Starke und lange Überaktivierung der PKC
-> Schädigung der Zelle

Question 6

Welche Aminosäuren bilden das wichtige C1 Bindungsmotiv?
-> Was ist die Aufgabe dieser AS?

Answer 6

Histidin und Cystein
-> Komplexieren Zn2+ Ionen

Question 7

Bei der Gq Signalkaskade wird DAG gebildet, welches über das C1 Bindungsmotiv die PKC aktiviert.
-> Wie wird die Konzentration an DAG wieder gesenkt?

Answer 7

DAG wird mit der DAG-Kinase (DGK) phosphoryliert und damit inaktiviert

Question 8

Welche zwei Regulationsmechanismen besitzt die PKC?

Answer 8

1. Activation Loop
2. Pseudosubstratsequenz

Question 9

Wie wird die PKC aktiviert
-> Wie wird der Activation Loop entfernt?
-> Wie wird die Pseudosubstratsequenz entfernt?

Answer 9

1. Activation Loop wird mittels PDK1 phosphoryliert -> Konformationsänderung -> Aktives Zentrum frei
2. Pseudosubstratsequenz besetzt aktives Zentrum
3. Bindungsmotiv C1 und C2 wechselwirken mit Calcium und DAG -> Pseudosubstratsequenz aus aktivem Zentrum entfernt

Question 10

Welche Untereinheit vermittelt beim Gq Signaling die Aktivierung der Phospholipase C?

Answer 10

Beta + Gamma

Question 11

Welche drei Inaktivierungsmöglichkeiten für das Gq Signaling existieren?

Answer 11

1. Second Messenger Konzentration erniedrigen (Ca2+ in ER pumpen/DAG phosphorylieren)
2. PKC Dephosphorylieren und damit inaktivieren
3. PKC mittels Proteasom abbauen

Question 12

Was sind RACK Proteine?
-> Def.
-> Was ist die Aufgabe und wem ähnelt dies?

Answer 12

Receptor for activated C Kinase
Sind also Proteine, die Bindungsplattformen für PKCs und andere Enzyme und Proteine darstellen
-> So wie AKAP für die PKA

Question 13

Über welche Domäne bindet die PKC an RACK?

Answer 13

C2 Domäne (Selbe Domäne, an die auch Ca2+ bindet)

Question 14

Wie viele Bindungsstellen für Ca2+ besitzt Calmodulin?

Answer 14

4

Question 15

Wie erfolgt die Aktivierung der Calmodulin-abhängigen Proteinkinase?

Answer 15

1. Calmodulin bindet 4 Ca2+
2. Konformationsänderung von Calmodulin
3. Calmodulin bindet an CaM Kinase (Calmodulin-abhängige Kinase)
4. CaM Kinase ist nun aktiviert

Question 16

Wie ist eine CaM Kinase systematisch aufgebaut?

Answer 16

Question 17

Wie und aus wie vielen Untereinheiten sind Oligomere der CaM Kinase aufgebaut?

Answer 17

Question 18

Wie kann die Enzymaktivität der CaM Kinase reguliert werden?

Answer 18

Reguliert über Ca2+
-> Je schneller die Ca2+ Signale eingehen, desto größer wird die Aktivität der CaM Kinase
-> Heißt mehr CaM Kinasen im Oligomer sind aktiv

Question 19

Wie schnell erfolgt die Aktivierung der CaM Kinase und wie schnell die Desaktivierung?

Answer 19

Aktivierung: Schnell
Desaktivierung: Langsam

Question 20

Durch was wird die Aktivität der CaM Kinase blockiert?
-> Wie wird dies aufgehoben?

Answer 20

Aktivität durch Pseudosubstratsequenz im aktiven Zentrum gehemmt
-> Ca2+/Calmodulin bindet und aktives Zentrum wird freigesetzt

Question 21

Welcher Schritt muss nach der Entfernung des Pseudosubstrats aus dem aktiven Zentrum für eine aktive CaM Kinase folgen?

Answer 21

Phosphorylierung

Question 22

Wie wird eine aktive CaM-Kinase wieder inaktiviert?

Answer 22

1. Ca2+/Calmodulin abspalten
2. Dephosphorylieren