Transplantation och HLA

Question 1

Vad är HLA?

Answer 1

Det är en proteinstruktur på ytan av celler vars syfte är att presentera peptider för immunsystemet.

Även kallat MHC

Question 2

Beskriv uppbyggnaden av HLA klass 1 samt vilka celler det finns på

Answer 2

Det består av två delar, en alfakedja (α1, α2, α3) och en betamikroglobulin (β2m). Alfakedjan binder fast i membranet och innehåller den peptidpresenterande delen

Finns på alla kärnförande celler

Question 3

Beskriv uppbyggnaden av HLA klass 2 samt vilka celler det finns på

Answer 3

HLA klass 2 består av två symmetriska kedjor, alfa och beta som båda består av två subenheter. Den peptidpresenterande delen är mitt emellan dem. Båda kedjorna förankrar i membranet

Finns på Antigenpresenterande celler

Question 4

Beskriv vad som krävs för att få igenkänning av T-cellen när en APC presenterar HLA med peptid på sin yta? (allorecognition)

Answer 4

Både rätt HLA-typ och rätt peptid.

Question 5

Vilka tre genlokus kodar för HLA klass 1 respektive klass 2?

Answer 5

Klass 1: HLA-A, HLA-B, HLA-C

Klass 2: HLA-DR, HLA-DQ, HLA-DP

Question 6

Varför finns det fler kombinationer för HLA klass 2?

Answer 6

Eftersom en alfakedja och en betakedja kombineras, och de har båda 3 genlokus vardera (DR, DQ, DP) , vilket ger fler kombinationer än för klass 1 som endast har en alfakedja

Question 7

Är det bara HLA-proteinerna som kan orsaka avstötningsreaktioner?

Answer 7

Nej, i genregionen som kodar för HLA finns även andra proteiner som hjälper till i antigenpresentationen. Dessa kan man också bilda antikroppar mot och därmed orsaka avstötningsreaktioner. Ett exempel är “MIC”.

Question 8

Förklara vad det innebär att ett barn ärver två haplotyper från sina föräldrar och vad det innebär för transplantation.

Answer 8

En haplotyp = en specifik kombination av alleler per kromosom

I fallet HLA betyder detta att barnet ärver specifika alleler för HLA-A, -B, -C, -DQ, -DR, -DP, en från respektive förälder.

Eftersom varje förälder har två alleler per kromosom kommer det innebära att sannolikheten att man får samma haplotyper som sitt syskon, och därmed om de kan donera organ till en, 25%.

Question 9

Vad innebär haploidentitet?

Answer 9

Att man har en haplotyp som är samma. Tex ett barn har en haploidentitet med sin mamma

Question 10

Vad är en eplet?

Answer 10

Det är små restprodukter av polymorfa aminosyror på HLA-molekylerna och påverkar vilka antikroppar som känner igen HLA-epitopen

Question 11

Varför är det viktigt att undersöka HLA före transplantation?

Answer 11

Det påverkar överlevnaden för mottagaren och minskar risken för avstötningsreaktioner

Question 12

Vad ger bäst överlevnad - HLA-lika eller haploidentiska? varför?

Answer 12

HLA-lika, de är ju i stort sett identiska och har därmed störst sannolikhet att inte utveckla antikroppar mot det nya organet

Question 13

Vad vill man veta på remissen för transplantation?

Answer 13

Tidigare graviditeter
Tidigare blodtransfusioner
Tidigare transplantationer
Virusinfektioner
Vaccinationer?

Question 14

Varför vill man veta om patienten tidigare varit gravid före transplantation? Varför påverkar det transplantationer mellan make-maka?

Answer 14

Eftersom man ofta utvecklar HLA-antikroppar under graviditeten då barnets HLA-typ oftast skiljer från mammans (är ju kombination mammans+pappans haplotyper). En liten mängd utbyte av HLA sker mellan mamma och barn och gör då mamman immuniserad mot barnets HLA-typ.

Det påverkar eftersom mamman kan ha utvecklat antikroppar mot pappans HLA.

Question 15

Hur hänger HLA-antikroppar ihop med inflammation?

Answer 15

Nivåerna av HLA-antikroppar fluktuerar med inflammationsstatus

Question 16

Hur bildas HLA-antikropparna?

Answer 16

HLA-antigenet binder till en B-cell som klyver upp det och presenterar för T-celler på sin MHC2. T-cellen aktiverar B-cellen som blir en plasmacell och börjar producera antikroppar

Question 17

Definera direkt allorecognition

Answer 17

T-cellen aktiveras av donatorns antigenpresenterande cell (som redan fanns i organet)

Question 18

Definiera indirekt allorecognition

Answer 18

T-cellen aktiveras av mottagarens APC som migrerat in i organet och hittat något främmande

Question 19

Vilka två sätt kan T-cellerna känna igen en HLA som främmande?

Answer 19

1. T-cellsreceptorn binder till en HLA som på grund av sin form verkar som en kroppsegen HLA som bundit ett främmande protein
2. T-cellsreceptorn binder till en HLA med ett peptid som tillsammans bildar formen av en kroppsegen HLA som bundit ett främmande protein

Oavsett beror det på att formen på den främmande HLA-molekylen är annorlunda

Question 20

Vilka IgG-subklasser är man mest “rädd” för inom transplantation och varför?

Answer 20

IgG1 och 3, på grund av att de kan aktivera både komplement och förmedla ADCC

Question 21

Hur lång tid kan det ta för en avstötningsreaktion att ske?

Answer 21

Allt från minuter till år

Question 22

Vad innebär “hyperacute rejection” av en transplantation?

Answer 22

En avstötningsreaktion som sker extremt fort, redan innan kirurgen hunnit klart ibland. Det beror på att det fanns anti-HLA antikroppar i mottagaren redan innan transplantationen skett.

Idag är detta mkt ovanligt eftersom man kontrollerar HLA-typer osv mycket noggrannt

Question 23

Förklara på vilka två sätt antikroppsmedierad reaktion leder till avstötning

Answer 23

Anti-HLA-antikroppar binder till endotelcellerna på det transplanterade organet, därefter sker:

1. Komplementaktivering
2. Neutrofiler mm binder till antikropparna och släpper ut cytokiner -> aktiverar endotelet

Båda ger ansamling av trombocyter och koagulation och kan leda till tromboser

Question 24

Vilken markör kan man leta efter om man tror att en antikroppsmedierad avstötningsreaktion sker/skett?

Answer 24

C4d, en komplementfaktor

Question 25

Vad händer vid en “acute cellular rejection”. Kan det behandlas?

Answer 25

Immunceller tex T-lymfocyter tar sig ut i organet och stör/förstör vävnaden

Behandlas med extra immunsupprimerande och steroider

Question 26

Beskriv “chronic allograft nephropathy”

Answer 26

Det är ett tillstånd där HLA-antikroppar bildas de-novo flera månader/år efter transplantationen. Långsamt förstörs organfunktionen, i detta fall njuren

Question 27

Hur går HLA-screeningtesten till?

Answer 27

Exempelvis används luminex:
100 plastkulor med unika fluorescenser blandas med patientens serum. På varje kula sitter en blandning av HLA-antigen. Det innebär att man kan testa för massvis av HLA-antikroppar samtidigt

Question 28

Hur går man vidare om HLA-screeningtestet är positivt?

Answer 28

Man fortsätter med luminex-metoden men tar istället kulor som är specifika med en antikropp/kula, och väljer endast såna som är möjliga baserat på vilka kulor som blev positiva i screeningen. Det gör att man kan veta exakt vilket antigen man har antikropp mot, dvs vilken specificitet antikropparna har

Question 29

Hur går korstesterna för HLA testerna till för cytotoxicitet?

Answer 29

Blandar mottagarens serum med givarens B- och T-celler och kollar sedan om cellerna dött med specialfärgningar

Question 30

Hur går korstesterna för HLA testerna till för flödescytometri?

Answer 30

Donatorns T- och B-celler blandas med patientserum, varefter fluorescerande sekundärantikroppar tillsätts. Ibland sätts även antikroppar till för att skilja B- och T-celler

Question 31

Varför används både B- och T-celler för korstesterna?

Answer 31

För då kan man identifiera antikroppar mot både HLA klass 1 och 2

Question 32

Varför används både luminex-kulorna och korstesterna?

Answer 32

Eftersom luminexkulorna endast testar för HLA-antigen, medan korstesterna även inkluderar de proteiner som inte utgör själva HLA men ändå är involverade i antigenpresentation (tex MIC)