DAT och hemolys Flashcards
Vad är definitionen av antiglobulinteknik?
Agglutination mellan erytrocyter (ag) och
erytrocytantikroppar (ak) sker efter tillsats av en sekundärantikropp
dvs. antihumanglobulin (AHG).
Vilken är principen för Antiglobulinteknik?
Antikroppar av IgG-typ sensibiliserar erytrocyter.
Agglutination uteblir initialt men kan åstadkommas efter tillsats av AHG. AHG reagerar med antikropparna/komplementfaktorer som
bundit till erytrocytytan och kopplar därigenom ihop erytrocyterna
Vilka två varianter förkommer antiglobulintest i?
- Direkt antiglobulin test (DAT)
- Indirekt antiglobulin test (IAT)
Vad görs DAT på och hur påvisas det?
Görs på erytrocyter som är mantlade in vivo av antikroppar och/eller komplementfaktorer
Påvisas genom att tillsätta antihumanglobulin (AHG) som ge agglutination
Hur fungerar IAT? Vad används det för?
- Patientplasma inkuberas med testerytrocyter (sensibilisering)
- AHG tillsätts, och om agglutination uppstår indikerar det att det finns erytrocytantikroppar i patientens plasma
- Används för förenlighetsprövning innan transfusion
Vad är polyspecifik DAT-AHG?
Reagens innehållande antikroppar riktade mot humana gammaglobuliner (IgG) och komplementfaktorer (C3d)
Vad är monospecifik DAT?
AHG innehåller antikroppar riktade mor endast en komponent, vanligtvis IgG eller C3d
Vad används vid utvidgat monospecifikt DAT?
Specifika antikroppar mot IgG, IgM, IgA, C3d eller C3c
Hur ser resultaten gällande positiv DAT normalt ut?
50 % har både IgG och C3d 30 % har enbart IgG 10 % har enbart C3d Ett fåtal har kombinationer av IgG, IgA, C3d och IgM
När är DAT positivt?
Autoimmun hemolytisk anemi (autoantikroppar)
Transfusionskomplikation (alloantikroppar som sitter på
transfunderade erytrocyter)
HDFN (Hemolytic Disease of the Fetus and Newborn)
antikroppar är passivt överförda från mamman och fäster på
barnets erytrocyter
Kan vara normaltillstånd hos friska
Vad är hemolys?
Sönderfall av erytrocyter
Vad beror medfödd hemolys på?
Defekt i erytrocyten
- membrandefekt, ex hereditär sfärocytos
- Enzymdefekt ex glukos-6-fosfat dehydrogenasbrist
- Hemoglobinopatier medelhavsländer, tex sickle-cell anemi, thalassemi
Vad beror förvärvad hemolys på?
Yttre påverkan av erytrocyten
- Immunbetingad ec autoimmun hemolytisk anemi
- ej immunbetingad ex mekanisk hemolys
Vad kan vara en indikation för att göra en DAT?
Synlig hemoglobin i plasma
Vad är autoimmun hemolytisk anemi (AIHA)?
- Autoantikroppar som är riktade mot antigen på egna erytrocyter ger en ökad destruktion av dessa
- Antikroppar riktade mot något som bundit till individens egna erytrocyter
AIHA förekommer i två typer, vilka?
Varm och kall
finns öven läkemedelsinducerad immunhemolytisk anemi
Vad kan AIHA av varm typ bero på?
- Lymfom, KLL
- autoimmuna sjukdomar, ex SLE
Vad gör man för form av utredning hos patient med AIHA varm typ?
Utredning för att ta reda på om patienten har enbart autoantikroppar eller även alloantikroppar som kan döljas av autoantikroppar.
(är viktigt vid transfusion)
Var är autoantikropparna ofta riktade vid AIHA varm typ?
Epitoper i Rh-systemet
Vilken positiv DAT fås vid AIHA varm typ?
IgG eller IgG + C3d
Var sker hemolysen vid AIHA varm typ?
Primärt extravasal hemolys (mjälte, lever)
Lista symtom för AIHA varm typ
Ofta kronisk, kommer i skov Anemisymptom: trötthet, andfåddhet, blekhet, yrsel Ikterus Mörk urin Splenomegali Subfebrilitet – feber
Hur behandlas AIHA varm typ?
Utred möjlig bakomliggande orsak! Kortison (Folat) Splenektomi B-cellshämmare (Rituximab) Blodtransfusion
Vad ses för positiv DAT vid CAD?
C3d (orsakas av IgM)
Vad står CAD för?
Cold agglutination disease
Vad står PCH för?
Paroxysmal köld hemoglobinuri
Var är autoantikropparna vid CAD riktade mot?
I/i-antigenet
Var sker den främsta hemolysen vid CAD?
Främst extravasal hemolys men även intravasal hemolys kan ske
Hur ser akut CAD ut?
ofta sekundärt till infektioner (mykoplasma, mononukleos/EBV) kan vara intravasal hemolys
Hur ser kronisk CAD ut?
Drabbar ofta äldre, associerat till lymfom, KLL eller Waldenströms makroglobulinemi, extravasal hemolys
Beskriv mekanismen för CAD
- IgM aktiverar komplement, men vid temp över 30 grader lossnar IgM och komplementaktiveringen avstannar vid C3d.
- Komplementmantlade (C3b) erytrocyter sorteras bort i levern med exravasal hemolys som följd.
- Även intravasal hemolys kan ske
Vad kan det finnas för symtom vid CAD?
- Anemisymtom
- Acrocyanos vid köldexponering
- Hemoglobinuri
Vad finns det för behandling vid CAD?
- Undvik nedkylning
- B-cellshämmare (Rituximab)
- Cytostatika
- Plasmaaferes
- Den akuta formen som är sekundär till infektionen är själv övergående inom några veckor
Vilka antikroppar och vad är de riktade mot vid PCH?
IgG som är riktade mot P-antigenet på erytrocyterna
Vilka är PCH vanligast hos och när får man det oftast?
Vanligast hos barn, efter luftvägsinfektioner
Vad finns det för symtom vid PCH?
(symtomen kommer minuter-timmar efter köldexponering)
- Värk i rygg eller ben, magkramp, huvudvärk, frossa, freber
Hemoglobinuri ses kort efter symtomstart och pågår i några timmar
Varför syns inte antikropparna när plasman sätts mot vanliga testerytrocyter vid läkemedelsinducerad hemolys?
- Absorption - läkemedlet absorberas till cellytan och antikroppar riktade mot läkemedlet fäster (Penicillin)
- Membranmodifiering pgaläkemedlet vilket för att antikroppar ospecifikt binds in till cellytan
(Inte fråga)
Läkemedel kan ge upphov till autoantikroppar
När är DAT positivt?
- Autoimmun hemolytisk anemi (autoantikroppar)
- Transfusionsreaktion (alloantikroppar som sitter på
transfunderade erytrocyter) - HDFN (hemolytic disease of the fetus and newborn) -
antikroppar är passivt överförda från mamman och fäster
på barnets erytrocyter - Kan vara normaltillstånd hos friska
Vad kan alloantiskroppar ge för transfusionskomplikationer
- Patienter har tidigare bildat antikroppar som reagerar med transfunderade erytrocyter
- Fördröjd hemolys: feber, anemi, ikterus 24h eller mer efter transfusion, +DAT (transfunderade erytrocyter) - Oftast anti -Jk, -Fy
vad står HDFN för?
Hemolytic Disease of the Fetus/Newborn
Vad händer vid HDFN?
- Mammans antikroppar (IgG) passerar placenta och bryter ner fostret erytrocyter
Vad är den vanligaste orsaken till HDFN?
Antikroppar mot RhD
Ge exempel på vad som kan orsaka +DAT hos nyfödda
Högtitriga ABO_isoagglutinationer av IgG typ
vad kan +DAT utan kliniska tecken på hemolys bero på?
- För ”lite” mantlat på cellytan för destruktion.
500-1000 IgG molekyler/cell krävs i normalfallet (test sensitivitet:
≈100 IgG-molekyler/cell) - Antikropparna som mantlats kan ej initiera fagocytos
trots många (IgG4) - Sjukdomar som ger en polyklonal
hypergammaglobulinemi med passiv absorbtion av
gammaglobuliner på erytrocytytan
Vad kan kliniska tecken på hemolys utan +DAT bero på?
- Erytrocyterna har redan hemolyserats
- Erytrocytbundet IgG i mindre mängd (under cut off)
- Annan orsak till hemolys
Hur går celldestruktionen till vid HDFN?
- Extravasal hemolys
Makrofager i mjälten och levern fagocyterar erytrocyter mantlade med antikroppar (ffa IgG1 och IgG3) - Intravasal hemolys
Hemolys av erytrocyter via komplementaktivering (MAC-komplexet)
