DAT och hemolys Flashcards
Vad är definitionen av antiglobulinteknik?
Agglutination mellan erytrocyter (ag) och erytrocytantikroppar (ak) sker efter tillsats av en sekundärantikropp dvs. antihumanglobulin (AHG)
Vad är principen för antiglobulinteknik?
Antikroppar av IgG-typ sensibiliserar erytrocyter. Agglutination uteblir initialt men kan åstadkommas efter tillsats av AHG
AHG reagerar med antikropparna/komplementfaktorer som bundit till erytrocytytan och kopplar därigenom ihop erytrocyterna
I vilka två varianter förekommer antiglobulintest?
- Direkt antiglobulintest (DAT)
- Indirekt antiglobulintest (IAT)
Vad är DAT kortfattat?
Erytrocyter som är mantlade in vivo av antikroppar och/eller komplementfaktorer
Påvisas genom att tillsätta antihumanglobulin (AHG) som ger agglutination
Hur går IAT till?
När används det inom transfusionsmedicin?
- Patientplasma inkuberas med testerytrocyter (sensibilisering)
- AHG tillsätts, och om agglutination uppstår indikterar det att det finns erytrocytantikroppar i patientens plasma
Används för förenlighetsprövning (MG-test) innan transfusion
Vad är skillnaden mellan polyspecifik DAT, monospecifik DAT och utvidgad monospecifik DAT?
Polyspecifik DAT - AHG (antihumanglobulin) som innehåller antikroppar riktade mot humana gammaglobuliner (IgG) och komplementfaktorer (C3d)
Monospecifik DAT - AHG innehåller antikroppar riktade mot endast en komponent, vanligen IgG eller C3d
Utvidgat monospecifik DAT – specifika antikroppar mot IgG, IgM, IgA, C3d eller C3c
När är DAT positivit?
- Autoimmun hemolytisk anemi (autoantikroppar)
- Transfusionskomplikation (alloantikroppar som sitter på transfunderade erytrocyter)
- Immunisering hos foster/nyfödda (antikroppar är passivt överförda från mamman och fäster på barnets erytrocyter)
- Kan vara normaltillstånd hos friska
Vad innebär hemolys?
Sönderfall av erytrocyter
Minskad livslängd av erytrocyter på grund av destruktion
Vad är skillnaden mellan medfödd och förvärvad hemolys?
- Medfödd - defekt i erytrocyten
- Förvärvad - yttre påverkan av erytrocyten
Vad innebär medfödd hemolys, och vilka defekter kan ses?
Defekt i erytrocyten
- Membrandefekt - ex. hereditär sfärocytos
- Enzymdefekt - ex. glukos-6-fosfat dehydrogenasbrist (G6PD)
- Hemoglobinopatier - ex. sickle-cell anemi, thalassemi
Vad innebär förvärvad hemolys?
Vilka två typer finns?
Yttre påverkan av erytrocyten
- Immunbetingad - ex. autoimmun hemolytisk anemi
- Ej immunbetingad - ex. mekanisk hemolys
Hur diagnosticeras hemolys?
Hemolysprover
- Haptoglobin nedsänkt
- Bilirubin upphöjt
- LD upphöjt
- Hemoglobin i plasma syns tydligt
DAT
Vad är autoimmun hemolytisk anemi (AIHA)?
En förvärvad immunbetingad hemolys
Autoantikroppar som är riktade mot antigen på egna erytrocyter ger en ökad destruktion av dessa
Antikroppar mot något som bundit till individens egna erytrocyter
Vilka typer av autoimmun hemolytisk anemi finns?
- AIHA av varm typ - 70%
- AIHA av kall typ - 30%
- Läkemedelsinducerad immunhemolytisk anemi
Vilka typer av AIHA av varm typ finns?
- Primär - 30%
- Sekunder (till en hemolytisk sjukdom eller autoimmunasjukdomar) - 70%
- Lymfom, KLL
- Autoimmuna sjukdomar, ex. SLE
Berätta om AIHA av varm typ?
Utredning görs för att ta reda på om patienten har enbart autoantikroppar eller även alloantikroppar som kan döljas av autoantikroppar. Viktigt vid transfusion!
Positiv DAT: IgG eller IgG + C3d
Autoantikropparna oftast riktade mot epitoper i Rh systemet
Vilken “sorts” hemolys ger AIHA av varm typ primärt?
Extravasal hemolys - mjälte och lever
Vilka är symtomen av AIHA av varm typ?
- Ofta kronisk, kommer i skov
- Anemisymptom: trötthet, andfåddhet, blekhet, yrsel
- Ikterus
- Mörkt urin
- Splenomegali
- Subfebrilitet – feber
Hur behandlas AIHA av varm typ?
- Utred möjlig bakomliggande orsak!
- Kortison - som första behandling
- (Folat)
- Splenektomi
- B-cellshämmare (Rituximab)
- Blodtransfusion
Vilka två sjukdomar delas AIHA av kall typ in i?
- Cold agglutinin disease (CAD)
- Paroxysmal köld hemoglobinuri (PCH)
Berätta om cold agglutinin disease?
Positiv DAT - C3d (orsakas av IgM)
Autoantikropparna (IgM) är riktade mot I / i-antigenet
Vilken “sorts” hemolys förekommer vid CAD?
Främst extravasal hemolys
Även intravasal hemolys kan ske
Vad är urskiljer akut CAD från kronisk CAD?
Akut - ofta sekundärt till infektioner (mykoplasma, mononukleos / EBV), kan vara intravasal hemolys
Kronisk – drabbar ofta äldre, associerat till lymfom, KLL eller Waldenströms makroglobulinemi, extravasal hemolys
Vad är mekanismen bakom CAD (cold agglutinin disease)?
IgM aktiverar komplement, men vid temp över 30 grader lossnar IgM och komplementaktiveringen avstannar vid C3d
(IgM i periferi binder till erytrocyter där då kroppstemperaturen här är lägre. När erytrocyter cirkulerar tillbaka till centrala kroppen lossnar IgM. Erytrocyter som delvis komplements aktiverats sorteras bort i levern - extravasal hemolys)
Komplementmantlade (C3b) erytrocyter sorteras bort i levern med extravasal hemolys som följd
Även intravasal hemolys kan ske
Vilka är symtomen vid CAD?
- Stillsamt - måttligt förlopp
- Anemisymtom
- Acrocyanos vid köldexponering - blåfärgad hud
- Hemoglobinuri
Hur behandlas CAD?
- Undvik nedkylning
- B-cellshämmare (Rituximab)
- Cytostatika
- Plasmaferes
Den akuta formen som är sekundär till infektioner är själv övergående inom några veckor
Berätta om paroxysmal köld hemoglobinuri. Hos vem och när är det vanligt? Vilka antikroppar?
Ovanligt, 2-5% av alla AIHA
IgG riktat mot P-antigen på erytrocyterna
Vanligast hos barn och sker ofta efter övre luftvägsinfektioner
Symtom kommer minuter-timmar efter köldexponering
Vilka är symtomen för paroxysmal köld hemoglobinuri?
- Värk i rygg eller ben
- Magkramp
- Huvudvärk
- Frossa
- Feber
Hemoglobinuri ses kort efter symtomstart och pågår några timmar
Berätta om läkemedelsinducerad hemolys?
Antikropparna syns inte när plasma sätts mot vanliga testerytrocyter
- Absorption - läkemedlet absorberas till cellytan och antikroppar riktade mot läkemedlet fäster (Penicillin)
- Membranmodifiering - pga. läkemedlet vilket gör att antikroppar ospecifikt binds in till cellytan (Cefalosporiner
Bildandet av autoantikroppar - läkemedlet ger upphov till autoantikroppar (Methyldopa, NSAID), vilket kan synas i test
Vad händer när DAT är positivt till följd av en transfusionskomplikation med alloantikroppar?
Fördröjd hemolys sker - feber, anemi och ikterus över 24h efter transfusion
+DAT (transfunderade erytrocyter) - oftast anti -Jk och -Fy
Vad innebär immunisering hos foster/nyfödda och Hemolytic Disease of the Fetus/Newborn (HDFN)?
Hur kontrolleras detta?
Att mammans IgG-antikroppar passerar genom placenta och bryter ned fostrets erytrocyter
Vanligaste orsaken är antikroppar mot RhD
Under graviditeten kontrolleras förekomst av erytrocytantikroppar hos mamman
Ge exempel på när DAT är positivt utan att det finns kliniska tecken på hemolys?
- För ”lite” mantlat på cellytan för destruktion. 500-1000 IgG molekyler/cell krävs i normalfallet (test sensitivitet: ≈ 100 IgG-molekyler/cell) - alltså inte tillräckligt många IgG på erytrocyters yta
- Antikropparna som mantlats kan ej initiera fagocytos trots många (IgG4)
- Sjukdomar som ger en polyklonal hypergammaglobulinemi med passiv absorbtion av gammaglobuliner på erytrocytytan
Ge exempel på när det finns kliniska tecken på hemolys men utan positivt DAT?
- Erytrocyterna har redan hemolyserats
- Erytrocytbundet IgG i mindre mängd (ligger under cut-off)
- Annan orsak till hemolys
Hur går celldestruktionen till i extravasal, respektive intravasal hemolys?
Extravasal hemolys - Makrofager i mjälten och levern fagocyterar erytrocyter mantlade med antikroppar (ffa IgG1 och IgG3)
Intravasal hemolys - Hemolys av erytrocyter via komplementaktivering (MAC-komplexet)
