Reprofysiologi handyr Flashcards
Hvad er den overordnede funktion af testis(hvilken proces udfører testis)?
“Fabrik” - spermatogenese
Hvad er den overordnede funktion af epididymis?
Modning og opbevaring
Hvad er den overordnede funktion af de accessoriske sex kirtler?
Overfladebelægning
Metaboliske substrater
Hvad er den overordnede funktion af penis?
Leverings system
Erektion og ejakulation
Hvordan er tyrens testis lejrede?
Longitudinelt
Hvordan er hingstens testis lejrede?
Mere horisontalt
Hvad er specielt ved ornens ductus deferens?
Den munder direkte ud i urethra
Hvilken type penis har hingste og hvordan “fungerer” den? Og hvilke andre dyr har denne type penis?
Musculocavernøs penis - fyldes med blod for at blive eregeret
Hunde
Hvilken type penis har orner og hvilke andre dyr har denne type penis? Og hvordan “fungerer” denne penis?
Fibroelastisk penis - er stiv af sig selv
Tyr, vædder, buk
Hvad styrer erektion og hvad sker der?
Parasympatiske nerveimpulser
Blod akkumuleres i erektile væv
Hvor mange dele består fasen ejakulation af og hvad sker i hver fase? Og hvad styrer ejakulation?
2 dele:
1) Emission: sæd og seminal plasma bevæger sig ind i urethra
2) Ejakulation: sæden bevæger sig ud af urethra og ind i hundyret
Styres hovedsaglig af sympatiske nerve impulser
Beskriv processen fra seksuel stimulation til erektion (fysiologisk tak :) )
1) Seksuel stimulation
2) Parasympatiske neuroner frigiver nitrogenoxid –> dilatation af små arterier i penis
3a) Vener komprimeres –> reduceret blod flow væk fra penis
3b) Blod akkumuleres i den vaskulære del af det erektile væv i penis
4) Penis hæver –> erektion
Beskriv processen fra stimulation af sensoriske nerver på glans penis til ejakulation
1) Stimulation af sensoriske nerver på glans penis
2) Kulmination af intens sekusuel stimulation
3) Sympatiske impulser kontraherer glatte muskulatur
4a) Peristaltiske kontraktioner i testikulære dukter, epididymis, ductus deferens og ejakulatoriske dukter
4b) Rytmiske kontraktioner i erektile dele af penis
4c) Rytmiske kontraktioner i gl. bulbourethrale, prostata og seminale vesikler
5) emission - sæd ind i urethra
6) Ejakulation - sæd skydes med kræft ud af urethra
Hvilke parametre stimulerer til ejakulation ?
Tryk, berørring og temperatur
Emission styres af?
Ejakulation styres af?
Emission: sympatisk respons
Ejakulation: sympatiske og somatiske impulser
Hvorfra medieres ejakulation fra?
Spinale ejakulations center
Hvilke faser består spermatogenesen af og hvad sker der under hver fase?
2 faser:
1) Spermacytogenese: spermatogonier –> spermatocytter –> spermatider
2) Spermiogenesen: spermatider –> spermatozoer
Hvad er den daglige normale hormonelle proces/rytme i handyr?
GnRH pulser ses igennem døgnet (4-8 gange pr. dag).
Pulsatile GnRH udskillelser –> pulsative frigivelser af FSH og LH
Hvad fortæller en LH-top?
At der ca. 20 min. senere vil ses en stigning i testosteron niveauet i blodet
Hvilke vigtige celler findes i testis?
Sertoli celler (sustentacular cells) Leydiske celler (interstitielle celler)
Lokalisation, funktion og receptorer for sertoliceller
Ligger indenfor basalmembran i seminiferøse tubuli
Udgør en del af blod-testis barrieren (tight junctions mellem tilstødende celler)
Har FSH og testosteron receptorer
Hormoner:
- Inhibin
- Androgen bindende protein
Lokalisation, funktion og receptorer for leydiske celler
Ligger mellem seminiferøse tubuli LH receptorer Steroid biosyntese: - Respons på LH - LH pulsation 4-8 gange dagligt Producerer androgener
Hvorfor er der en blod-testis barriere?
Fordi kroppens immunforsvar ellers ville gå til angreb på (lave antistoffer mod) sædcellerne pga. deres deling.
Hvad er funktionen af LH hos handyr?
- Hypertrofi af leydiske celler
- Stimulerer produktion af androgener i leydiske celler
Hvad er funktionen af FSH hos handyr?
- Testosteron –> DHT og E2 (i sertolicellerne)
- Stimulerer produktion af androgen bindende protein(ABP) og inhibin fra sertolicellerne
- Stimulerer spermatogenesen
- Frigivelse af spermatozoer
Hvorfor laves testosteron om til dihydro-testosteron (DHT)?
Fordi DHT er mere stabilt - sikrer længerevarende og mere stabilt niveau af androgener i testis end testosteron kan
Hvad er funktionen af androgener (DHT, testosteron)?
Sendes ud i blodet –> indflydelse på muskler, accessoriske kønskirtler mm, spermatogenesen og negativ feed-back på hypothalamus og hypofysen –> nedsat LH frigivelse
Koncentration lokal 45 : systemisk 1
Hvad sker der ved tildeling af exogene testosteroner?
Øget systemisk koncentration af testosteron –> negativ feed-back –> nedsat LH(og FSH) og endogen testosteron produktion –> inhibering af spermatogenesen –> atrofi af testis og dårlig sædkvalitet
Hvad sker der ved tildeling af exogen GnRH
Stimulerer endogen testosteron produktion - påvirker ikke balancen af androgen lokal/systemisk
I hvilke tilfælde benytter man bla. GnRH
Til dyr med nedsat lipido
3 faser af spermatogenesen
Mitose
Meiose
Spermiogenese
Hvad sker der under spermiogenesen?
Modning/morfologiske forandringer
- Spermatider -> spermatozoer
- Luminale del af tubuli semineferi contortii
Acrosomdannelse af Golgi
Kondensering af nucleare kromatin
Dannelse af hale(axoneme)
Migration af mitochondrier til midterstykke
Hvad er funktionen af mitochondrierne?
Skaber energi så sædcellen kan bevæge sig - giver sædcellen hypermotilitet
Hvor lang tid tager det for at en spermatogonie bliver til en spermatozo hos en tyr? Og hvad fortæller det?
60 dage!
Det vil altså sige at det sæd vi får ud er “min. 60 dage gammelt”. Hvis dårlig sædkvalitet kan det betyde at dyret var sygt dengang sæden blev dannet
Hvad sker der i de forskellige dele af epididymis(bitestikel)?
Caput og corpus: Modning af cellemembran Proximal til distal droplet Opnår evne til motilitet Opnår fertil potentiale Passiv transport - udafhængig af ejakulationsfrekvens
Cauda epididymis:
- Opbevaring af modne sæceller
Hvad afhænger funktionen af epididymis af?
Androgen koncentrationen (DHT)
Karakteristika for fertile spermatozoer
- Progressiv motilitet
- Normal morfologi
- Intakte membraner
- Sæd reservoir (i hundyret)
- Capacitation
- Acrosom reaktion
- etc.
Forklar trinene af sæd-transporten op til uterus
Tab af spermatozoer pga retrograd transport og fagocytose
Eleveret tonus og motilitet af muscularis i hundyret
- kontraktion af myometriet (estradiol)
- Øget tonus og motilitet i uterus og oviduct (PGF2a og PGE i ejakulatet!)
Transport gennem krypter og folder i cervix
- spermatozoernes motilitet
Hvad sker under capacitationen?
Proteiner fra seminale plasma som dækker hovedet af spermatozoerne skal fjernes før sædcellen kan befrugte et æg
Forklar acrosom reaktionen
Sædcellen møder det geleagtige lag udenpå oocytten –> acrosom frigiver acrosin ved exocytose –> sædcellen kan nu ved brug af halen presse sig gennem (penetrere) zona pellucida af oocytten
Forklar resten af befrugtningen efter acrosom reaktionen
Efter sædcellen har presset sig igennem zona pellucida –> fusion mellem oocyttens plasmamembran og sædcellens ækvitoriske segment –> sædcellens nucleare membran forsvinder og nucleus dekondenserer –> anden meiotiske deling er færdiggjort
Hvor mange fraktioner(af ejakulatet) afgiver en hest og hvilke andre dyr afgiver dette antal fraktioner?
3 fraktioner
Orne og Hund
Hvad er funktionen af sidste fraktion?
Danne en form for prop i cervix
Nævn de 4 accessoriske kønskirtler
Ampulla
Prostata
Gl. Vesicularis
Gl. bulbourethralis
Hvorfra kommer spermatozoerne?
Testis
Hvorfra kommer den seminale plasma?
Epididymis og de accessoriske kønskirtler
Hvilken af de 4 accessoriske kønskirtler har ornen ikke?
Ampullae
Forklar de enkeltvise funktioner af de forskellige kønskirtler
Ampullae (-orne)
- Sæd reservoir
- Ergothionine(aminosyre) (hingst)
Gl. Vesicularis:
- Citrat
- Fruktose (tyr)
- Inositol (orne)
- Mucoprotein - Gel fraktion (hingst)
Prostata:
- Zink - sæd kromatin stabilisering
Gl. Bulbourethralis
- Rengør urethra med vandig sekret før samleje
- Siaolmucin (orne) - gel fraktion
Hvor deponerer de forskellige dyrearter sæden i hundyret?
Tyr: Craniale del af vagina
Vædder: Craniale del af vagina
Orne: Cervix - uterus
Hingst: Os cervix / uterus
Hvad kigger man på makroskopisk ved sæd evaluering?
Volumen
Konsistens
Farve
Uvedkommende materiale
Mikroskopisk sæd evaluering - hvilke punkter?
Individuel motilitet/progressiv motilitet (%) Morfologi - Normal/abnormal - Hoved, midterstykke, hale Membran integritet - Eosin-nigrosin farvning for undersøgelse om intakt membran Koncentration - Makler/neubauer tællekammer
Hvad er vigtigt angående ens udstyr når man har med sæd at gøre?
At forvarme alt udstyr til 36 grader før det kommer i kontakt med sæden
Fremgangsmåde ved undersøgelse af individuel motilitet
En dråbe sæd på forvarmet objektglas
Placer opvarmet dækglas ovenpå - undgå bobler
Benyt x20-40 forstørrelse
Udregn % af spermatozoer der bevæger sig aktivt fremad
OBS man kan evt. fortynde prøven inden undersøgelse –> gør det nemmere - dog husk at beregne dette med ved endelige udregning
Fremgangsmåde ved koncentrations-udregning
- Neubauer tællekammer
- Dræbt sæd
- 10 myL opsuges i pipette og placeres i tællekammer
- Benyt x20 forstørrelse(IKKE mere)
Tæl antal spermatozoer i 5 felter
Fremgangsmåde ved membran-vurdering
- En dråbe sæd blandes med 1 dråbe Eosin Nigrosin farvning
- Udstryg de to dråbe sammen
- Intakt membran: hvid
- Hullet membran: rødfarvet sædcellehoved
Morfologisk vurdering af sæd og hvor evt. defekter kan stamme fra
- Hoved, midterstykke og hale
Defekternes oprindelse:
Primær (defekter i spermatogenesen, testis)
- Defekt hoved eller midterstykke
Sekundær (epididymis)
- Protoplasmatiske dråber
Tertiær (post-ejakulation)
- krøllede haler
Fordele ved kunstig befrugtning (AI)
Forøget grad af genetisk forbedring
Nedsat risiko for sygdoms tranmission
Udviddet anvendelse af særlige individer
- in space (nationalt og internationalt)
- i tid (sæd tilgængelig efter handyr er død eller i perioder hvor han ikke er i stand til at befrugte)
- øget antal dyr befrugtes hver dag eller med et enkelt ejakulat
Forberedelse af sæd til AI
Normalt mere sæd i et ejakulat end hvad der er nødvendigt for en enkelt befrugtning
Fortynding af sæd –> adskillige sæd doser
Sædbeskyttende komponenter:
- for at beskytte evnen til befrugtning
- for at beskytte cellemembranen for skader uden køling og frysning
Der er individuel og species variation i hvor godt sæden kan tåle at fryses ned!
Typer af sæd til AI
Råsæd
Frisk sæd
Køle/transport sæd
Frost sæd
Fakta om råsæd inkl. arter
- IKKE fortyndet
- skal benyttes indenfor 10-15 min.
- alle arter
- Langt de færreste steder at dette er muligt at benytte
Fakta om frisk sæd
- fortyndet sæd (øger holdbarheden)
- rum-temperatur
- benyt indenfor 4 timer efter opsamling
Fakta om køle-/transportsæd
- fortyndet?
- Hingst: 5 grader
- Orne: 16-18 grader
- Levetid: 48 timer
Fakta om frost sæd
- Nitrogen væske (-196 grader)
- Tyr, vædder - godt
- Hingst - middel godt
- orne - skidt, kun på forsøgsbasis
- Levetid: uendeligt, hvis kvælstofbeholder holdes på -196 grader
Funktionen af plamamembran
Isolere cytoplasma fra externe miljø
Regulere udvekslingen af substanser
Kommunikation mellem celler
Fortynding af sæd - hvilke komponenter
Sæd fortynder:
- Buffer (pH 6,8-7,4) - citrat, TRIS, PBS….
Membran stabilisering
- For at undgå kulde-shock under køling (mælkeproteiner, æggeblomme)
Bibeholde osmotiske tryk (ca 285 mosm)
- kulhydrater, proteiner
Energi:
- Kulhydrater
Reduktion/inhibering af bakterie vækst
- 4-5 forskellige slags antibiotika
Frysesæd:
Cryoprotectiva for at sikre at vi ikke får iskrystaller i sædcellerne, når sæden fryses - glycerol, DMSO, ethylenglycol
Hvad er effekten i at nedkøle sæden?
Reduktion i metaboliske aktivitet –> forlænget levetid for spermatozoerne
I hvilket interval er der størst risiko for kulde-shock for sædcellerne? Og hvad skyldes dette og hvad kan der ske?
Kulde-shock (15-5 grader) –> skade på cellemembran
- Phospholipider fra væske fase til gel-fase
- Lækage af enzymer, lipider, cholesterol, lipoproteiner, ATP, kaium….
Hvordan administreres kontrolleret nedkøling?
Kontrolleret nedkøling: 0,03-0,5 graders nedkøling pr. min (hingst)
- Derfor både varme og køleelementer i beholdere
Hvad er funktionen af cryo-konservering og hvilke typer findes?
Beskytter mod kulde-shock
Cryo-beskyttelse:
- Celle penetration (glycerol, DMSO)
- Non penetrerende (casein, lipoprotein)
Kontrolleret nedkølings rate før frysning
Undgå intracellulære iskrystaller og hurtig dehydrering af cellerne
Hvad skal man være særlig opmærksom på ved cryo-konserering?
Mange spermatozoer tåler IKKE cryo-konservering!!!
Species-species variation
Individ-individ variation
Hvad tåler hingste sædceller ikke så godt af cryp-protectiva?
Glycerol
Hvad er vigtigt at fjerne fra sæden før nedkøling?
Sædplasmaet!
Centrifugerer sæden –> sædceller falder til bunds i glasset
Insiminations doser for tyr
Råsæd: 5 mio.
Kølesæd: -
Frostsæd: 10 mio.
Insimintations doser for vædder
Råsæd: 300 mio
Kølesæd: 400 mio
Frostsæd: 200-450 mio
Insimintations doser for orne
Råsæd: 2000 mio
Kølesæd: -
Frostsæd: -
Insimintations doser for hingst
Råsæd: 500 mio
Kølesæd: 1000 mio
Frostsæd: 250 mio
Hvad skal man være opmærksom på ved insiminations dosis for frostsæd
At det skal være mængden af levende sædceller i prøver EFTER prøven er optøet
