TP µBIOLOGIE Flashcards

Question

Représentant des sulfamides et triméthoprime ?

Answer 1

triméthoprime + sulfaméthoxazole : *Bactrim, Nopil*

Answer 2

Bactériostatiques => inhibent la croissance bactérienne

Answer 3

=> Inhibent voie de synthèse de l’acide folique dans la bactérie → ils sont synergiques * Sulfamides : structure semblable à un substrat de la voie métabolique de l’acide folique, compétitifs de la *dihydroptéroate synthétase* => Arrêt synthèse acide folique * Triméthoprime : analogue de précurseur de la synthèse de l’acide folique => inhibiteur compétitif de la *dihydrofolate réductase* => Arrêt synthèse acide folique

Answer 4

=> Droitière * bec bunzen devant soi * portoirs à gauche * anse et pipette non utilisées à droite * poubelle à droite => pour ne rien avoir à croiser au dessus de la flamme

Answer 5

* W assis * Organiser la paillasse * Ne pas parler pendant les manip * W dans un diamètre de 20 cm de la flamme * Ne jamais laisser ouvert les milieu de culture * Ne pas poser un objet contaminer dans la paillasse

Answer 6

* OBJECTIF X40 à sec * Condenseur baissé * Diaphragme 1/2 ouvert

Answer 7

* milieu sélectif * Met en évidence uniquement les bactéries qui cultivent en milieu hypersalé => bactéries halophiles (*Staphylococcus*, *Micrococcus*, *Enterococcus*, *Bacillus*, et qq Gram-) * permet d'étudier fermentation du mannitol par virage de l’indicateur coloré : **rouge de phénol** => colonies utilisant le mannitol passe du rouge au jaune

Answer 8

* milieu sélectif * milieu lactosé contient du cristal violet + desoxycholate → inhibent la plupart des bactéries G+ * Sélectionne les bactéries G- * Permet différenciation des espèces qui fermentent le lactose de celles qui ne le fermentent pas : - Colonies jaunes : acidification par fermentation du lactose : bactéries lactose + - Colonies bleu-vert : pas d'acidification du milieu donc pas de fermentation du lactose : bactéries lactose-

Answer 9

* Diluer dans de l’eau physiologique une fraction du mélange de bactéries jusqu'à l’obtention d’une suspension opalescente - Prélever une fraction de cet échantillon dilué puis étaler sur la plus grande surface possible de milieu nutritif à l’aide d’un instrument d’isolement

Answer 10

* Technique des 4 séries de stries (Quadran) * technique de Buttiaux

Answer 11

- Séparer la boite de culture en 4 secteurs - Prélever à l'anse (stérile) le bouillon - main gauche : maintenir entrouverte la boite dans le cône stérile et étaler le prélèvement par stries très serrées dans une moitié de quadrant (quadrants 1 et 2) - Etaler à nouveau le prélèvement par stries serrées dans la moitié correspondante aux quadrants 2 et 3 - Répéter une dernière fois l'étalement en stries serrées dans la moitié correspondante aux quadrants 3 et 4

Answer 12

- Prélever à l'anse (stérile) le bouillon - on balaye en stries très serrées la surface de la gélose dans sa première partie - dans la deuxième partie des tries + espacées

Answer 13

a. La taille b. La forme c. L'opacité d. La couleur et / ou pigment

Answer 14

- Diamètre < 1 mm : petite colonie - 1 mm < diamètre < 3 mm : colonie moyenne - Diamètre > 3 mm : grosse colonie

Answer 15

- Allure de contours : lisse, irréguliers - Relief : surface bombée, plate - Centre : parfois surélève, parfois ombiliquée

Answer 16

- Opaques (ne laissent pas passer la lumière), colorées ou non - Translucides (laissent passer la lumière mais on ne voit pas les formes au travers) - Transparentes (laissent passer la lumière et voir les formes au travers)

Answer 17

* gélose VF ou viande-foie * aération du tube, par dévissage partiel du bouchon => pénétration progressive de l’oxygène => assure la formation d’un gradient de pression d’oxygène * ensemencement après régénération, lorsque le milieu est encore liquide, en surfusion à 55°C * Plonger une pipette boutonnée à longue effilure dans la culture à étudier et l’introduire au fond du tube de gélose => Remonter vers la surface en spirale * placés à 37°C, le bouchon légèrement dévissé

Answer 18

* AAF : bactéries tout au long du tube * Aérobie stricte : tout en haut du tube * Micro aérophile : en haut du tube (mais pas en surface) * Anaérobie stricte : bactéries dans le fond du tube

Answer 19

Etape 1 : réalisation d'un frottis qui est séché et fixé Etape 2 : coloration au violet de Gentiane suivie d'un mordançage par une solution iodo-iodurée de Lugol Etape 3 : décoloration à l'alcool Etape 4 : recoloration à la fuchsine => Observer à l'immersion en pleine lumière : Mettre une goutte d'huile à immersion sur la lame totalement sèche. Objectif x 100

Answer 20

* mettre qq gouttes d’eau oxygénée sur une lame * Prélever des colonies à l’aide d’une pipette pasteur (non cassée) et la poser dans l’eau oxygénée * Si catalase l’H2O2 est dégradé et produit de l’O2 ce qui se traduit par un dégagement gazeux (catalase (+))

Answer 21

* Poser un disque sur une lame * Poser 1 goutte du réactif oxydase sur le disque * Prélever une colonie avec une pipette Pasteur boutonnée et la déposer sur le disque => Coloration bleue = oxydase (+)

Answer 22

* Peptidoglycane épais qui laisse rentrer le colorant mais pas l’alcool * La paroi G+ = imperméable à l’alcool => coloration violette

Answer 23

* Peptidoglycane fin * Possède une membrane externe * Colorants et l’alcool peuvent rentrer dans la bactérie * La paroi des G- = perméable à l’alcool => coloration rose

Answer 24

* Réactif nit1 et nit2 dans le milieu * Si le milieu devient rouge : présence de nitrites => Bactérie nitrate réductase (+) * milieu reste inchangé : on ajoute alors de la poudre de zinc : - coloration rouge : transformation des nitrates en nitrites par le zinc => Abs activité nitrate réductase - pas de coloration : nitrates transformés par la bactérie au delà des nitrites => bactérie nitrite réductase + (azote)

Answer 25

* Etude voie de fermentation du glucose par la recherche d’un métabolite intermédiaire produit à partir du glucose : acetoine * oxydation à l'air de l'acetoine en milieu alcalin (hydroxyde de potassium) produit de la butandione * En présence d'α-naphtol (napht-1-ol), la butandione donne une réaction colorée spécifique rouge-rose => Si rouge rose : voie de fermentation du glucose +

Answer 26

=> Recherche de la production d’indole et de l’activité TDA ▪ Uréase : observation directe : bactérie uréase (+) décompose l’urée en composé alcalin qui produit le virage du phénol (jaune → rouge) : UREASE (+) si le milieu est rouge ▪ Recherche de l’indole : Réaction de James : 3 gouttes de réactif de James dans le milieu => contient du para-diméthylaminobenzaldéhyde → réagit avec l’indole et donne un composé rouge qui se concentre dans la phase alcoolique du réactif : bactérie indole (+) si présence d’un anneau rouge-rose ▪ Recherche de la tryptophane désaminase (TDA) : 2 gouttes de réactif TDA (FeCl3) dans le milieu. Tryptophane → via tryptophane désaminase → acide indole pyruvique + FeCl3 => brun qui précipite = bactérie TDA (+)

Answer 27

- d'étudier l'aspect des colonies - d'apprécier la pureté des cultures - de rechercher la catalase : déposer quelques colonies sur une lame puis les recouvrir de quelques gouttes d'eau oxygénée. La catalase est un caractère de famille

Answer 28

Permet de voir le type d'hémolyse que manifeste le germe (importance d’un bon isolement et d’une culture pure). * Germes β hémolytiques produisent une hémolyse complète autour de la colonie qui se traduit par l’apparition d’un halo transparent * Hémolyse incomplète (hémolyse α ou viridans) un halo de couleur verdâtre apparaît autour de la colonie * Germes non hémolytiques laissent la gélose opaque

Answer 29

* Permet d’apprécier la croissance du germe en milieu bilié et sa capacité d’utiliser l’esculine * Réaction esculinase+: le milieu devient noir * réaction esculinase - : le milieu reste marron clair

Answer 30

seulement sur les streptocoques béta-hémolytiques

Answer 31

Mettre en évidence un polyoside de paroi du germe, qui agglutine avec les particules de latex sensibilisées par les AC spécifiques des différents groupes de Lancefield

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