Chimie ana : ANALYSE QUALITATIVE ET QUANTITATIVE EN CHROMATOGRAPHIE

Question 1

Quelles sont les méthodes que l’on peut utilisées pour caractériser un produit lors d’une chromatographie ?

Answer 1

• Comparaison des tR
• Méthode des surcharges
• Méthode des indices de rétention de Kovats
• Couplage avec une technique d’analyse complémentaire

Question 2

Principe de la comparaison des tR pour l’analyse qualitative d’une chromatographie ?

Answer 2

Comparaison du tR de l’échantillon avec celui d’un témoin (ou étalon) injecté dans les mêmes conditions opératoires

Question 3

Principe de la méthode des surcharge pour l’analyse qualitative d’une chromatographie ?

Answer 3

=> Mélanges complexes
* Ajouter directement au mélange un témoin
* Après comparaison des chromatogrammes avec et sans le témoin, il en résulte soit une augmentation de la surface du pic soit l’apparition d’un pic supplémentaire

Question 4

Principe de la méthode des indices de rétention de Kovats pour l’analyse qualitative d’une chromatographie ?

Answer 4

• Caractériser un soluté à partir de son indice de rétention I en comparant son comportement chromatographique en CPG à celui d’une série homologue de n-alcanes
  de formule CnH2n+2 (avec n ≥ 5)
• Indices de rétention dépendent uniquement de la nature de la PS, + reproductibles que les tR
• Bases de données en ligne répertoriant I de nombreux composés chimiques en fonction de la PS utilisée

Question 5

Principe du couplage avec une technique d’analyse complémentaire pour l’analyse qualitative d’une chromatographie ?

Answer 5

• spectrométrie UV, masse, RMN
• puissants outils pour l’identification complète des constituants d’un mélange complexe

Question 6

Objectif de l’analyse quantitative d’une chromatographie ?

Answer 6

détermination de la concentration des solutés

Question 7

Sur quoi se base l’analyse quantitative d’une chromatographie ?

Answer 7

Sur le fait que l’aire des pics (ou la hauteur) est proportionnelle à la C° massique ou à la quantité de produit injecté

Question 8

Quelles sont les problématiques qu’engendre le fait de relier le signal à la concentration en chromatographie ?

Answer 8

2 problèmes :
- connaissance de Ki qui dépend du réglage du chromatographe
- connaissance du volume exact injecté pour en déduire la concentration

Question 9

Comment sont évitée les problématiques qu’engendre le fait de relier le signal à la concentration en chromatographie ?

Answer 9

=> Recours à des méthodes d’étalonnage : 3 méthodes
* Normalisation interne
* Étalonnage externe
* Étalonnage interne

Question 10

Principe de l’étalonnage externe avec un seul point d’étalonnage ?

Answer 10

méthode basée sur la comparaison de 2 chromatogrammes effectués dans des
conditions identiques :
* Chromatogramme solution à doser
* Chromatogramme solution référence

Question 10

De quoi dépend la précision des résultat de l’étalonnage externe avec un seul point d’étalonnage ?

Answer 10

• Des pesées de la substance de référence et de l’échantillon
• Des dilutions
• De la reproductibilité du volume d’injection
• Du maintien des conditions chromatographiques strictement constantes pendant l’étalonnage et le dosage

Question 11

Quelles sont les différentes méthodes d’étalonnage externe ?

Answer 11

• étalonnage externe avec un seul point d’étalonnage
• étalonnage externe avec une gamme d’étalonnage

Question 11

Principe de l’étalonnage externe avec une gamme d’étalonage ?

Answer 11

• Chaque point de gamme correspond à une solution référence de C° variable
• Etablissement de la droite de calibration Aref = f(Cref)

Question 11

Méthode de l’étalonnage interne ?

Answer 11

Consiste à introduire dans la solution à doser et dans la solution référence une quantité identique d’une substance pure appelée étalon interne

Question 12

Principe de la normalisation interne ?

Answer 12

• Très utilisée pour contrôle des HE
• Mesure de la somme des aires sous les pics → détermination du % relatif de chaque pic en faisant le rapport

Question 12

Quand est ajouté l’étalon interne dans l’étalonnage interne ?

Answer 12

Dès la première étape de la préparation, subit les mêmes causes d’erreurs que l’éch. à doser: variabilité du volume injecté, interférences liées à la matrice, …

Question 13

Comment se fait le choix de l’étalon interne ?

Answer 13

• ne pas être présent dans le mélange initial
• avoir un pic d’élution bien résolu par rapport aux autres pics
• avoir des propriétés et comportement chromatographique proches du composé à doser
• pureté >99 %

Question 13

Quels sont les différents étalonnages internes existants ?

Answer 13

• étalonnage interne avec un seul point d’étalonnage
• étalonnage interne avec une gamme d’étalonnage

Question 14

Quelles sont les limites de la normalisation interne ?

Answer 14

• Préalablement déterminer Kx, Ky et Kz ou considérer que les coef de réponses des composés sont identiques ?
• Tous les constituants doivent être identifiés par autant de pics séparés

Question 15

Principe de l’étalonnage interne avec un seul point d’étalonnage ?

Answer 15

On compare 2 chromatogrammes :
- Chromatogramme d’étalonnage d’une solution de référence
- Chromatogramme de la solution échantillon
=> On note que AEI≠A’EI car il s’agit de 2 injections différentes : traduit la variabilité du volume

Question 16

Principe de l’étalonnage interne avec une gamme d’étalonnage ?

Answer 16

1- préparation d’une gamme d’étalonnage : chaque point de gamme contient
une solution ref de conc. variable et un EI toujours à la même conc.
2- injection de la gamme
3- mesure de Aref et AEI de chaque point de gamme
4 - établissement droite Aref/AEI = f(Cref/CEI)
5- mesure de Aech et A’EI de la solution à doser