5.2 Pathologische Technieken bij de Diagnose Kanker Flashcards

1
Q

Hoe kan er achter worden gekomen of een gepigmenteerde laesie een melanoom is of iets anders?

A

Microscopisch onderzoek kan uitstel geven of het maligne is of niet (Biopt nemen of meteen een excisie doen)

Er wordt een excisie gedaan en naar het laboratorium gestuurd voor pathologie

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Wat gebeurd er op een pathologie laboratorium?

A

In een cotainertje met formaline komt het op het lap.
Ze ontvangen een stukje huid (Excisie) van ongeveer 2cm. Er wordt geprobeerd een weefseldiagnose te verkrijgen in 6 stappen

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Waarom fixeren en snijden met Formaline?

A

Weefsel degradeert dtv enzymen (autolyse) en door inwerking microben. Formaline stopt dit

Weefsel zonder fixatie is te zacht om heel dun in te snijden. Formaline crosslinkt eiwitten zodat weefsel hard wordt (gefixeert)

Maar Formaline is reactief met de neus en omgeving, hierdoor moet er voorzichtig mee worden omgegaan

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Hoe wordt weefseldiagnose verkregen in 6 stappen bij een excisie?

A

1) Uitpakken op het pathologie laboratorium. Excisie of biopt moet verwerkt worden (Fixeren, solvent verandering, selecteren, inbedden)
2) Kleine preparaten zijn bij aankomst al grotendeels gefixeerd. Grote preparaten na de operatie eerst fixeren (Zoals lobectomie). Solvent wisselen: Hydrofiel naar hydrofoob. Meestal enige uren -> Inbedden
3) Paraffine stolt op in een foedraaltje en plakt vast aan de onderkant van een zogenaamd cassette -> Cassette bevat nu met formaline gefixeerd paraffine ingebed weefsel -> FFPE (Er kan nu in gesneden worden)
4) Cassette met paraffine blok erop -> Snijden op microtoom -> Dunne plakjes paraffine met stukjes van biopt -> Lintjes van plakjes worden zo gemaakt
5) Paraffine plakjes-met-stukje biopt op een glaasje plakken. Vastbakken op warmte plaat. Kleurmachine -> HE. Dan pas zijn er transparante coupes
6) Kleuren (Hematoxyline of Eosine)

Alle geprocesste blokjes worden bewaard in een archief. Restmateriaal biobank

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Hoe wordt een biopt afgenomen?

A
  • Op geleide palpatie
  • Op geleide ultrasound
  • Op geleide MRI
  • Soms ‘blind’ (bijv. verhoogd serum PSA, maar geen evidente palpabele of echografische afwijkingen

In het algemeen altijd multipele biopten, bilateraal tot 12

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Hoe verloopt de verwerking van een biopt in de pathologielab?

A
  • Hetzelfde als excisie
  • Biopt in cassette
  • Na fixeren wordt er ingebed, gesneden en gekleurd
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Hoe wordt een botbiopt afgenomen?

A

Via botboring door de hematoloog

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Wat is anders bij een botbiopt?

A
  • Het is bewerkelijker
  • Het bevat namelijk hydroxyapatiet en is te hard om direct naar een FFPE om te zetten
  • Het bot wordt ontkalkt

Botbiopt is wat bewerkelijker dan een huidbiopt of een maagbiopt, want het bevat hydroxy-apatiet (Gemineraliseerd) en is te hard om met formaline te fixeren. Het moet eerst worden ontkalkt.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Hoe is de naalddikte van een biopt uitgedrukt?

A

In Gauge (G)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Wat gebeurd er als een chirurgische resectie is ontvangen?

A
  • Fixeren
  • Lamelleren (In plakjes snijden)
  • Kijken
  • Bemonsteren
  • Microscopische beoordeling (Dit levert de diagnose op)
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Wanneer is er geen ‘inbedding’ of Formaline nodig?

A

Wanneer cytologie als morfologische ondersteuning geldt, dus bij Fine Needle Biopsy (Aspiratie/Smears)

Gaat sneller, maar is minder nauwkeurig

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Wat is cytologie?

A

Fine Needle Biopsy -> Losse cellen

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Hoe gaat de cytologie methode, dus hoe wordt het afgenomen?

A
  • Op geleide palpatie
  • Op geleide ultrasound
  • Geen verdoving
  • Duurt enkele tientallen seconden om het af te nemen

Cellen verkregen met cytologie zijn kleurloos, ze moeten nog gekleurd worden

Cytologie via scopie + Echo maakt lymfeklieren uit mediastinum bereikbaar

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Wat is exfoliatieve cytologie?

A

Met een borstel in plaats van een naald

De afgestreken cellen worden op een vloeistof gebracht. Hiervan worden preparaat gemaakt en gekleurd met een speciale mix -> De Papanicolaou Stain

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Wat zijn accessoire technieken?

A
  • Immunohistochemie (IHC)
  • NGS
  • Machine Learning
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Wat doet IHC?

A

Speelt rol bij de precieze typering van kanker

Bijvoorbeeld ER + Her2+ + Mamma carcinoom
Oestrogeen receptor -> Tamoxifen
Her2-neu-receptor -> Herceptin

17
Q

Wat zijn de verschillende moleculaire technieken?

A

1) Polymerase ketting reactie op Formaline gefixeerd, parafine embedded weefsel. Wel eerst DNA isoleren. Dan (Multiplex) PCR of quantitatieve PCT. Bijv. BRAF mutatie aantonen of uitsluiten
2) In-situ hybridisatie met probes op bijvoorbeeld ALK, EBER etc. Fluorescent tagging van DNA en RNA
3) Multimodaliteit In-situ techniek -> Array
4) NGS -> Vele tumorgenen tegelijk

18
Q

Wat doet NGS?

A

Opent de deur voor genome sequencing van alle tumoren via panel van 200-600 genen of alle genen (WES) of heel genoom (WGS)

Tumoren hebben 100-1000 mutaties en vele met onbekende betekenis -> Bioinformatica nodig voor interpretatie en relevantie eruit te halen

Maak onderscheid tussen driver mutations en passenger mutations

19
Q

Wat is het doel van pathologische techniek?

A

1) Histologie, cystologie van biopt, punctie -> Diagnose
2) Pathologie technieken voor chirurgische preparaten: Therapiecontrole, snijranden, biobanken, prognose
3) Pathologie voor therapie keuze: ER receptor bepaling, BRAFV600E, KRAS mutatie, EWS translocatie. Vaak dure geneesmiddelen