Semaine 8_Chimie sèche et microscopie Flashcards

1
Q

Vrai ou faux, les lectures par réflectance des chimies sèchent se font toujours du même côté que celui du dépôt de l’échantillon.

A

Faux.

C’est vrai pour les chimies sèches simples (Ex. Bandelettes urinaires), mais les analyseurs Vitros (chimie sèches sanguines) lisent la réflectance du côté opposé duquel l’échantillon est apposé.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Vrai ou faux, la majorité des lecteurs de bandelettes urinaires ne sont pas calibrés par les utilisateurs.

A

Plutôt faux, mais un peu vrai…

1-) Habituellement, les calibrations ne sont pas requises et sont programmés dans l’appareil.

2-) Toutefois, les systèmes automatisé (tel que le iChem de beckman) ont des bandelettes de «calibration» réutilisable avec échelle de gris avec des valeurs pré-définies. Celles-ci servent surtout à vérifier l’alignement optique après que l’appareil un choc (déménagement, coup sur l’appareil) ou après une maintenance. Ce ne sont toutefois pas des calibrations avec des réactifs liquides etc.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Vrai ou faux, la majorité des multianalyseurs de chimies sèches (ex: vitros) ne sont pas calibrés par les utilisateurs.

A

Faux, les chimies sont calibrés comme pour n’importe quel autres types de multianalyseurs. En fonction des chimies, une calibration en 6 points est possible.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Décrire brièvement comment les cartouches des multianalyseurs de chimies sèches fonctions (exemple: microSlide de vitros)

A
  1. Dépôt de l’échantillon (ou CQ, calibrateur, etc.)
  2. En fonction de la composition de la bandelette, certains composants sont retenus et d’autres pénètres dans la bandelette
  3. Une fois en contact avec la couche de réactif, une réaction chimique permet la formation d’un composé coloré.
  4. La spectrométrie de réflectance permet de détecter la formation de composés et de déterminer la concentration de l’analyte d’intérêt.
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Décrire brièvement les types de couches possibles composant les cartouches de chimie sèche.

A
  1. Couche d’étalement de l’échantillon: souvent composée de billes de silicone qui permet le passage du sérum, mais pas des éléments figurés du sang
  2. Couche semi-perméable (scavenger) : empêche certains composés de traversé jusqu’à la couche de réactif. Permet d’éviter des interférences analytiques.
  3. Couche de réactif (souvent divisé en plusieurs couches). Elle(s) peut(peuvent) contenir :
    a. des enzymes
    b. des colorants
    c. des tampons
    d. des couches «scavenger» entre plusieurs couches de réactifs
    Note : Plusieurs matériaux peuvent composer les matrices des couches de réactifs. Ex : papier, alginate, et autres.
  4. Couche d’indicateur : couche de réactif «spécialisée» qui permet l’apparition de la couleur pour certaines chimies.
  5. Support plastique souvent composé de plastique qui est transparent ou qui laisse passer la lumière
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Il existe une substance interférente de plusieurs analyses des bandelettes de chimies urinaires. Ses effets sont les suivants:
* Hémoglobine (sang) ↓
* Bilirubine ↓
* Nitrite ↓
* Glucose ↓
* Leucocytes ↓

Quelle est cette substance

A

Acide ascorbique.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Nommez 3 avantages et 3 inconvénients lorsque l’on compare le principe de spectrophotométrie standard et le principe de photométrie par réflectante.

A

Avantage:

  • Simple
  • Rapide
  • Appareil peu coûteux $ comparé au spectrophotomètre

Inconvénients:

  • Peu précis
  • Intensité du signal non-linéaire
  • Davantage soumis aux interférences chromatiques de la matrice (couleur de la matrice).
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Vrai ou faux, la loi de Beer-Lambert s’applique à la spectrométrie de réflectance

A

Faux.

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Nommez 3 éléments pouvant interférés avec le test de glucose sur les bandelettes urinaires (Indiquer si cela risque d’occasionner un faux négatif ou un faux positif).

A

Faux positifs:

  • Contamination avec des agents fortement oxydant (jaxel) ou des peroxydes
  • Exposition prolongée à l’air

Faux négatifs:

  • Ascorbate (si glucosurie < 5,5 mmol/L) ou autre agent réducteur
  • Conservation prolongée à TP°
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

Nommez 3 éléments pouvant interférés avec le test de corps cétonique sur les bandelettes urinaires (Mentionner si cela occasionne un risque de faux négatif ou faux positif).

A

Faux positifs:

  • Substances avec groupes sulfhydryl libres (captopril, MESNa, cystéine, etc.)
  • Urine hautement pigmentée
  • Couleurs atypiques avec phtaléines et phénylcétones

Faux négatifs:

  • Conservation prolongée à TP°
  • Le beta3-hydroxybutyrate n’est pas détecté
  • Contenant d’urine maintenu mal fermé
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

Nommez 3 éléments pouvant interférés avec le test de densité urinaire sur les bandelettes urinaires (dire si risque de faux négatif ou faux positif).

A

Faux positifs :

  • Protéines (100- 500 mg/L)
  • Cétoacides (lactate et cétones)

Faux négatifs :

  • Présence d’osmoles “inefficaces”: glucose , urée
  • Urine alcaline
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Nommez 3 éléments pouvant interférés avec le test de pH sur les bandelettes urinaires (Mentionner si cela risque d’occasionner un faux négatif ou un faux positif).

A

Il n’y a aucune interférence analytique connue!

La conservation prolongé tend à alcaliniser l’urine, à moins que celle-ci contienne des bactéries (ce qui peut acidifier l’urine).

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Nommez 3 éléments pouvant interférés avec le test de leucocytes sur les bandelettes urinaires (Mentionner si cela risque d’occasionner un faux négatif ou un faux positif).

A

Faux positifs :
* Substances colorées (phenzopyridine, bettraves, etc.)
* Contamination par perte vaginale
* Formaldéhyde
* Certains antibiotiques

Faux négatif :
* Glucosurie élevée (>55,6 mmol/L)
* Protéinurie élevée (>500 mg/dL)
* Médicaments (gentamicine, céphalosporine, etc.)
* Ascorbate
* Présence de leucocytes sans estérase leucocytaire (ex: lymphocyte)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q

Nommez 3 éléments pouvant interférés avec le test de nitrite sur les bandelettes urinaires (Mentionner si cela risque d’occasionner un faux négatif ou un faux positif).

A

Faux positifs :

  • Substances colorées (phenzopyridine, bettraves, etc.)
  • Conservation prolongée à TP° (prolifération bact.)

Faux négatifs :

  • Absence de nitrates dans la diète du patient
  • Temps de rétention ds la vessie trop court
  • Bactérie gram + sans nitrate réductase
  • Ascorbate
  • Traitement antibiotique
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Nommez 3 éléments pouvant interférés avec le test de protéines sur les bandelettes urinaires (Mentionner si cela risque d’occasionner un faux négatif ou un faux positif).

A

Faux positifs :

  • Urine fortement alcaline ou tamponnée (cause = médicament)
  • Substances colorées (phenzopyridine, bettraves, etc.)

Faux négatifs :

  • Protéines autres que l’albumine (chaines légères ou globulines)
  • Substances colorées (phenzopyridine, bettraves, etc.)

Basé sur un indicateur pH le rend sensible principalement à l’albumine qui est chargée négativement

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q

Nommez 3 éléments pouvant interférés avec le test de bilirubine et d’urobilinogène sur les bandelettes urinaires (Mentionner si cela entraîne un risque de faux négatif ou faux positif).

A

Faux positif :

  • Substances colorées (phenzopyridine, bettraves, etc.)
  • Bilirubine pour urobilinogène (création d’une coloration jaune, bleu, ou verte)

Faux négatif :

  • Conservation prolongée à la lumière ou à la température pièce
  • Ascorbate pour bilirubine
17
Q

Nommez 3 éléments pouvant interférés avec le test de sang sur les bandelettes urinaires (Mentionner si cela risque d’occasionner un faux négatif ou un faux positif).

A

Faux positifs :

  • Contamination par sang (menstruel ou hémorroïde) détecte également la myoglobine
  • Agent oxydant fort (providone iodé)
  • Peroxydase bactérienne

Faux négatifs :

  • Ascorbate ou autre agent réducteur
18
Q

Nommez des avantages des multianalyseurs de chimies sèches par rapports aux multianalyseurs standards

A

A) Faible coût d’infrastructure :

  • Ne requiert pas d’eau! Pas besoin de plomberie, de drain, etc.
  • Pas besoin de système de génération d’eau ultra pure

B) Appareils simples :

  • Moins de pièces mobiles
  • Simplification des maintenances : pas de pompes, de tubulure ou de mixeurs
  • Les électrodes pour la mesure des électrolytes sont dans chacune des cartouches = pas de maintenance d’électrode à faire

C) Réduction d’interférences grâce aux couches semi-perméables :

  • Entre-autres, risque réduit d’interférence avec les paraprotéines, puisque les grosses Ig peuvent être filtrée par les couches supérieures.

D) Stabilité des réactifs augmentée

19
Q

Nommez des désavantages des multianalyseurs de chimies sèches par rapports aux multianalyseurs standards

A
  1. Coût d’exploitation très élevés : les cartouches sont habituellement plus chers que les réactifs traditionnels
  2. Cadence plus faible que méthodes traditionnelles
  3. Le menu des instruments de chimies sèches est généralement moins large que celui des chimies traditionnelles (chimies à canaux ouvert impossible)
20
Q

Décrire les spécificités dans la conception d’un microscope à contraste de phase, comparé à un microscope à fond clair.

A

Il y a un anneau de phase sous le condensateur pour que l’image du condensateur se superpose à la lame de phase annulaire (anneau). Lame de phase annulaire retarde de 1⁄4 de longueur d’onde le rayon qui la traverse l’échantillon

Il y a ensuite amplification de la diffraction des objets observés en fonction de leur indice de réfraction.

21
Q

Décrire les spécificités de la microsopie à lumière polarisée, comparé à la microscopie à fond clair.

A

La présence de 2 filtres sur un microscope à fond clair permet de faire de la miscroscopie à lumière polarisée.

  • 1er filtre polarisant après la source lumineuse
  • 2ème filtre polarisant après l’échantillon, avant l’analyseur ou l’objectif, à un angle de 90° comparé au 1er filtre.

Ce système bloque tous les plans de lumière qui ne sont pas parallèles au sens du filtre. Il y a absence de lumière émergente (fond noir!)

22
Q

Nommer les types de microscopie automatisée ou semi-automatisée utilisée dans le secteur des urines et un avantage et désavantage pour chacun.

A

Microscopie automatisée sur cuvette (plusieurs appareils) : photographie faite sur des images de champs.
Avantage: se rapproche des méthodes manuelles.
Désavantage: cadence analytique réduite.

Photographie de flux (IQ200 beckman Coulter) : similaire à cytométrie en flux, mais avec une caméra et lumière normale (pas de laser ni de fluorescence). Éléments photographiés un a un.
Avantage: haute cadence analytique.
Désavantage: pas de zoom sur la caméra et la qualité des images ne permet pas toujours de classer les éléments (plus d’inconnu/validation manuelle).

Cytométrie en flux (Auwi siemens) : analyse du type de ¢ à partir de leur couleur et granularité. Avantage: haute cadence analytique.
Désavantages : absence d’image pour valider ce qui a été vu par l’appareil.

23
Q

Quel est le type de microscopie idéale pour observer les lipides urinaire

A

Microscopie à lumière polarisée (réfringence des cristaux de cholestérol et présence de croix de malte dans les corps ovalaires graisseux.