Semaine 15-Auto-immunité Flashcards
D’une façon générale, qu’est ce qui favorise le développement de maladies autoimmunitaires?
La prédisposition génétique
l’environnement (infection virale, stress, médicaments etc
Facteurs endogènes (microbiome, grossesse, être femme..)
C’est quoi un ANA? discuter la pertinence du terme
Ce sont des anticorps anti-nucléaires qui se lient à plusieurs composants cellulaires, cytoplasmiques et nucléaires
Initialement appelés ANA car historiquement le terme désigné des auto-anticorps ciblant les composants nucléaires,
Aujourd’hui, d’autres auto-anticorps non nucléaires ont été identifiés ce qui fait que la nomenclature est imprécise
Terme approprié : anticorps anti-antigènes cellulaires
Décrire la méthode de dépistage des ANA
Méthode qualitative par immunofluorescence indirecte (indirecte car on dose des auto-Ac du sang avec des Ac marqué).
Utilisation de cellules Hep-2 (type cellulaire de référence) comme substrat ayant les Ag ciblés par ANA.
Voici les étapes:
1-élaler le sérum de l’échantillon sur une lame contenant des cellules Hep2 fixées.
2-lavage
3-Incubation avec des anticorps anti-IgG marqués à la fluorescine (fixe les auto-Ac)
4-Lavage (éliminer les Ac non fixés)
5-lecture au microscope les profils
Comment la concentration d’ANA est mesurée par l’immnofluorescence indirecte?
La concentration est mesurée semi quantitativement en tant que titre.
Plusieurs dilutions sont faites sur le sérum d’un patient, plus l’échantillon est dilué plus l’intensité de la fluorescence diminue. le titre correspond à la dilution la plus forte qui produit une fluorescence plus grande que celle du contrôle (dont l’intensité est fixée comme étant la fluorescence minimale considérée positive).
L’ajout du type du profile dans l’interprétation des ANA, augmente la sensibilité ou la spécificité de l’analyse?
la spécificité
Car les profiles rajoutent des informations pertinentes sur des maladies spécifique
C’est quoi un ENA? et quelle est leur particularité?
Ce sont des antigènes extractibles des noyaux des cellules. les anticorps anti-ENA sont dirigés contre des antigènes qu’on peut extraire des noyaux de cellules riches en collagène.
Citer les différents ENA (7)
1-Anti-RNP
2-Anti-SM
3-Anti-Jo1
4-Anti-CENP
5-Anti- SSA/RO
6-Anti-SSB/La
7-Anti-SCL 70
Décrire une méthodes de dosage quantitative des ENA
Méthode FEIA (fluorescence enzyme immnoassay)
une variante de la méthode ELISA. En voici les étapes.
1-Les antigènes ENA sont fixés sur une paroi solide d’une façon séparée.
2-Ajout du sérum (contenant les Auto-Ac) –> incubation
3-lavage
4-Ajout d’un Ac marqué avec une enzyme contre l’auto-anticorps.
5-Lavage
6-Ajout du substrat de l’enzyme–> incubation
7-Mesure de la fluorescence qui sera proportionnelle à la concentration d’auto-Ac
Quels sont les avantages d’une méthode multiplex par rapport à une méthode FEIA?
- Permet de doser simultanément plusieurs auto-anticoprs (gain de temps et de coût)
- Permet de diriger plus rapidement vers un diagnostic personnalisé
- Utilise moins de sérum
Citer 5 symptômes typiques d’une collagénose
1-Fièvre et fatigue persistantes
2-Phénomène de Raynaud
3-Photosensibilité
4-Anémie héomytique
5-Athralgie ou arthrite
6-Symptômes neurologiques
7-Éruptions cutanées
8-Protéinurie
9-Myalgie
10-Perte de poids
c’est quoi une collagénose?
C’est un groupe de maladies inflammatoires systémiques, à caractère autoimmun et non spécifique d’organe. Les collagénoses portent atteinte aux tissus conjonctifs riches en collagènes.
C’est quoi un lupus érythémateux disséminé?
Est une maladie chronique auto-immune faisant partie des collagénoses. Le LED peut toucher une ou plusieurs parties du corps notamment les articulations, la peau, les muscles, le sang, cœur, rein
Décrire la physiopathologie du lupus
- La présence anormale de complexes immuns (Auto-Ac avec auto-Ag correspondant)–>active voie classique du complément
- Ensuite–> facteurs chimiotactiques –> recrutement de cellules immunitaires qui infiltrent les organes cibles–>Activation des lymphocytes, cellules dendritiques et macrophages –> engendre un état inflammatoire.
Note:
* Les femmes sont plus prédisposées génétiquement (X9)
* Il y a des facteurs déclencheurs : stress, infection, grossesse, Mdx etc
Quels sont les critères de Dx du LED?
Doit inclure :
Positivité d’ANA (1:80) et
1 critère Clinique et
1 critère immunologique
Il faut un total de ≥10 points
Quels sont les tests biochimiques pour le Dx du LED
FSC (anémie hémolytique, leucopénie, thrombopénie)
Auto-Ac ANA, anti-ADNdb, anti-SS-A / SS-B, Anti-phospholipide (Anticoagulant lupique)
AST, ALT et CK (si atteintes au foie )
Protéine C réactive (CRP)
Complément (C3 et C4)
Fonction rénale : DFGe, creatinine, Protéinurie
Quels sont les profils d’ANA qui sont associés avec le LED
Le profil nucléaire homogène (associé avec l’Ag ADNdb)
et le profil nucléaire finement moucheté (associé avec les antigènes SSA/RO et SSB/LA)
Définir l’arthrite rhumatoide
Est une maladie inflammatoire auto-immune et systémique faisant partie des collagénoses. Elle peut toucher plusieurs articulations en attaquant la membrane qui recouvre les articulation
Citer les signes et symptômes de l’arthrite rhumatoide
Fatigue
Au moins une articulation avec une synovite (gonflement, douleur)
Évolution: plusieurs articulations peuvent être touchées (coudes, épaules, cou, pieds, orteils etc)
Altération des articulations-> déformations articulaires et destruction des tendons
Citer les tests biochimiques qui aident au Dx de l’arthrite rhumatoide.
Facteur rhumatoïde +++
Anti- CCP antipeptide anticyclique citrulliné
CRP ++
ANA: anti-histone, anti-U1RNP (nucléaire homogène-diffus ou granulaire)
Vrai ou faux
Le profil homogène diffus est associé uniquement au LED
Faux, d’autres maladies auto-immunes peuvent l’avoir comme l’arthrite rhumatoide.
C’est quoi le syndrome de Goodpasture?
Maladie auto-immunitaire faisant partie de vasculites à petits vaisseaux lié aux dépôts de complexes immuns. La maladie est caractérisée par la présence d’anticorps anti-membrane basale glomérulaire et se manifeste par une glomérulonéphrite rapidement progressive associée ou non à une atteinte pulmonaire
Décrire la physiopathologie du syndrome de goodpasture
Fixation des anti-GBM sur la chaine alpha3 du collagène de type IV (qui se trouve dans les glomérules rénaux et les membranes basales des alvéoles pulmonaires –> activation du complément–> recrutement de lymphocytes T auto-réactifs qui stimulent la production des Ac par les lymphocytes B –>foyer pro-inflammatoire
Quels sont les signes et symptômes du syndrome de goodpasture?
Glomérulonéphrite rapidement progressive–> Insuffisance rénale
-Symptômes associés : Hématurie, asthénie, fièvre, nausée/vomissement, anurie
Atteinte pulmonaire (n’est pas systématique chez tous les patients)
-Symptômes associés : Hémorragie intra-alvéolaire, toux, Toux sanglante (hémoptysie), dyspnée
Quels sont les tests biochimiques du syndrome de goodpasture?
Auto-Ac anti-GBM
Syndrome néphrétique: hématurie, sédiment néphrétique, protéinurie (moins que le syndrome néphrotique)
ANCA peut être négatif ou positif donc à faire (car pt être positif chez 10 à 30% )
C’est quoi une dermatomyosite?
Une maladie de type collagénose qui est caractérisée par l’inflammation de certaines zones de la peau et de certains muscles (myosite/myopathie des muscles proximaux)
quels sont les signes et symptômes de la dermatomyosites?
une éruption et des rougeurs cutanées
une faiblesse et des douleurs dans les muscles (hanches, cuisses, bras et épaules)
Qu’est ce qui différencie la dermatomyosite de la polymyosite au niveau des symptômes?
Dans la polymyosite la réaction auto-immune affecte uniquement le tissu musculaire sans porter atteinte à la peau
Citer les tests biochimiques nécessaires pour le Dx de la dermatomyosite
↑ enzymes musculaires:
CK , Aldolase, myoglobine urinaire, LDH, AST
ANA positif: profil cytoplasmique finement moucheté
Auto-Ac : Anti-Jo, Anti-Mi-2, Anti-SAE, Anti-NXP-2, Anti-MDA5, Anti-TIF 1ɤ
C’est quoi une vasculite ?
Maladie faisant partie des collagénoses qui se caractérise par une inflammation, ischémie et nécrose des vaisseaux sanguins
Quelle est la vasculite qui est associée au développement de l’asthme?
la granulomatose avec éosinophile et polyangéite (EGPA)
Nommer les vasculites associées aux ANCA
- Polyangéite microscopique (MPA)
- Granulomatose avec polyangéite (GPA)
- Granulomatose avec éosinophiles et polyangéite (EGPA)
Quels sont les tests de laboratoires utilisés pour le Dx des vasculites?
FSC
Vitesse de sédimentation
CRP
dosage qualitatif par immunoflurescence indirecte des ANCA (anti-MPO pour p-ANCA et anti-PR3 pour C-ANCA) et d’anti-GBM.
Dosage quantitatif (ELISA ou FEIA d’anti-MPO, Anti-PR3 et anti-GBM.
Vrai ou faux?
La polyangéite microscopique est associée avec le profil c-ANCA +, anti-PR3+
Vrai
Mais principalement retrouvés au cours de la GPA
De quel type est ce patron ?
Nucléaire homogène
De quel type est ce patron ?
Centromère
De quel type est ce patron ?
Nucléaire moucheté (à gros grain)
Entre parenthèse = suite du nom complet correspondant
De quel type est ce patron ?
Dots nucléaires
De quel type est ce patron ?
Nucléolaire (granulaire en motte)
Entre parenthèse = suite du nom complet correspondant
De quel type est ce patron ?
Enveloppe nucléaire (lisse)
Entre parenthèse = suite du nom complet correspondant
De quel type est ce patron ?
Cytoplasmique finement moucheté (aka jo-1=dermatomyosite)
Chez quel type de clientèle le test des ANA est-il recommandé?
Uniquement chez les patients présentant des symptômes liés aux collagénoses.
Nommer en ordre les phases de la mitose
1. Prophase : Au cours de cette phase, les chromosomes se condense et deviennent visibles, les centrioles se déplacent vers les pôles opposés de la cellule, les fibres du fuseau commencent à se former et la membrane nucléaire commence à se dissoudre.
2. Métaphase : Au cours de cette phase, les chromosomes se déplacent vers le centre de la cellule et s’alignent sur la plaque équatoriale, les fibres du fuseau se connectent aux kinétochores des chromosomes.
3. Anaphase : Au cours de cette phase, les fibres du fuseau se raccourcissent et tirent les chromatides sœurs vers les pôles opposés de la cellule.
4. Télophase : Au cours de cette phase, les chromosomes atteignent les pôles opposés de la cellule, les fibres du fuseau se désintègrent et deux noyaux se forment. La membrane nucléaire se reforme autour des deux ensembles de chromosomes.
Pourquoi est-il intéressant de faire des dosages qualitatifs et quantitatifs d’ANA ?
Les méthodes qualitatives pour les ANA ont une sensibilité élevée mais une spécificité relativement faible, tandis que les méthodes quantitatives pour les ANA ont une spécificité plus élevée mais une sensibilité plus faible. Il est donc important d’utiliser des méthodes complémentaires pour confirmer le diagnostic d’une maladie auto-immune en tenant compte des résultats cliniques et des antécédents médicaux du patient.
Décrire brièvement un protocole d’ANCA par IIF
a. Dépôt de l’échantillon sur une lame qui contient des (Granulocytes/Monocyte) fixé à la formaline ou ETOH exprimant les Ag ciblés par l’auto Ac (IgG ANCA)
b. Lavage pour retirer les Ac non fixés aux cellules
c. Incubation avec des Ac anti-IgG marqués à la fluorescéine qui fixeront les ANCA
d. Lavage des Ac non fixés
e. Lecture au microscope des profils
Il s’agit souvent de Biochip contenant plusieur champs avec les différentes preparation ; Gouttes PR3+, Gouttes MPO+, Granulocytes fixés formaline, Granulocytes fixés EtOH, Hep-2/Granulocytes
Selon les résulats présentés ci-dessous, quelles information est-il possible de tirer ?
Les résultats révèlent un patron C-ANCA sur les granulocytes fixés à la formaline et à l’ETOH ainsi qu’une fluorescence positive pour PR3 mais pas pour MPO = PR3-cANCA = Indicatif d’une vasculite des petits vaisseaux associés aux ANCA (le plus souvent de type GPA (granulomatose avec polyangéite))
Selon les résultats présentés ci-dessous, quel diagnostic est-il possible de tirer ?
Le patient est positif pour les anti-GBM. Les anti-GMB sont par définition présents chez tous les patients atteints de la maladie de Goodpasture. 20 à 35% des patients présentant des anticorps anti-GBM ont également des ANCA, principalement spécifiques à la myéloperoxydase (MPO). La maladie de Goodpasture et les vasculites des petits vaisseaux associés aux ANCA pouvant avoir la même présentation clinique, il est recommandé d’analyser en parallèle les anti-GBM et les ANCA chez les patients atteints d’insuffisance rénale.
Selon les résulats présentés ci-dessous, quelles information est-il possible de tirer ?
Les résultats révèlent un patron C-ANCA sur les granulocytes fixés à la formaline et un patron p-ANCA lorsque fixé à l’ETOH ainsi qu’une fluorescence positive pour MPO mais pas pour PR3 = MPO-pANCA = Indictif d’une vasculite des petits vaisseaux associés aux ANCA (le plus souvent de type MPA (Polyangéite microscopique))
Je serai portée à dire positif ANCA pour la fixation à la formaline puisqu’il ne permet pas de distingue les p- et c-ANCA.
AC: Lorsque fixation à l’ETOH = périphérique donc p-ANCA.
Quels profils ANA de niveau compétent ont une plaque équatoriale en métaphase marquée?
Profil
-Nucléaire homogène
-Moucheté fin et dense
-Centromère
Profil nucléaire homogène (AC-1)
1. Description du profil
2. Quels sont les auto-Ac associés?
3. Quels pathologies sont associées?
- Fluorescence homogène et régulière de tout le nucléoplasme.
Les nucléoles peuvent être marqués ou non
Les cellules en mitose (métaphase, anaphase et télophase) sont positives - dsDNA, nucleosomes, histones
- Lupus érythémateux disséminé, hépatite autoimmune chronique
Profil nucléaire moucheté fin et dense (AC-2)
1. Description du profil
2. Quels sont les auto-Ac associés?
3. Quels pathologies sont associées?
- Aspect moucheté fin réparti sur tout le noyau en interphase
La métaphase est positive et fortement granulaire avec quelques gros grains plus intenses - DFS70/LEDGF
- Souvent présent chez individus sains
Profil nucléaire centromère (AC-3)
1. Descrption du profil
2. Quels sont les auto-Ac associés?
3. Quels pathologies sont associées?
- Dans les cellules en interphase, 40 à 80 gros grains par cellule sont dispersés
Les métaphases sont positives, ces grains sont alignés et superposés à la chromatine apparence d’un zip - CENP-A/B (C)
- Sclérodermie systémique limitée cutanée (SSc), cholangite biliaire primitive (PBC)
Profil Dots nucléaires (AC-6/7)
1. Description des profils
2. Quels sont les auto-Ac associés?
3. Quels pathologies sont associées?
- Discrets dots nucléaires (AC6: 6 à 20 et AC7: 1 à 6)
Les métaphases sont négatives - Sp-100, PML, MJ/NXP-2, p80-coilin, SMN
- cholangite biliaire primitive (PBC), SARD, polymyosite (PM) dermatomyosite (DM), Syndrome de Sjogren (SjS), lupus érythémateux systémique (SLE), Sclérodermie systémique (SSc)
Profil nucléolaire homogène/ granulaire/ poncué (AC-8/9/10)
1. Décrire des profils
2. Quels sont les auto-Ac associés?
2. Quels pathologies sont associées?
- Fluorescence des nucléoles, Homogène: métaphase négative
Clumpy: métaphase positive
Ponctué: métaphase - PM/Scl-75, PM/Scl-100, Th/To, RNA POL I, ARN pol I
- Sclérodermie systémique (SSc), Polymyosite (PM), syndrome de Sjogren
Quels sont les signes et symptômes d’un syndrome de Sjogren?
-La xérostomie: sécheresse buccale
-La xérophtalmie: sécheresse occulaire
-La sécheresse d’autres muqueuses
-Arthrite
Quels sont les tests biochimiques à effectuer pour le Dx d’un syndrome de Sjogren?
FSC
ANA
Auto-Ac anti-SSA/Ro,
Auto-Ac anti-SSB/La
Facteur rhumatoïde (FR)
Enzymes hépatiques (ALT et AST)
CRP
Analyses d’urines
Qu’est-ce qu’une sclérodermie et quels sont les signes et symptômes?
Maladie auto-immune rare qui affecte les tissus conjonctifs et provoque plusieurs atteintes localisées ou systémiques (limitée ou diffuse)
Signes et symptômes:
des lésions cutanées sclérotiques
un épaississement de la peau
sclérodactilie
rigidité de la bouche
perte de la pulpe des doigts
atteinte pulmonaire, cardiaque, rénale, GI
Quelle est la physiopathologie de la sclérodermie?
Durcissement des fibres de collagènes du derme réduisant la
souplesse et la mobilité de la peau et surproduction de
collagène des cellules conjonctives, et ainsi, une fibrose et un épaississement de plusieurs autres organes
Quels sont les types de sclérodermie et leurs particularités?
-Sclérodermie Localisée (ScL): Épaississement de la peau et présence de taches
-Sclérodermie Systémique limitée (ScS): Épaississement de la peau moins répandu et plus lent (CREST)
-Sclérodermie Systémique diffuse (ScS): Épaississement de la peau plus rapide et touche plus de zones du corps
Risque augmenter de développer une sclérose au GI
Qu’est-ce que le syndrome de CREST?
C’est une forme de sclérodermie limitée avec les symptômes suivants:
-Calcinose: dépôt de calcium dans la peau)
-Raynaud: trouble de la circulation sanguine des doigts
-Esophageal : (reflux gastrique et diminution de la motilité oesophagienne
-Sclérodactylie: épaississement et raidissement de la peau des doigts et des orteils
-Télangiectasie: petits capillaires dilatés visible sur le visage et les mains
Quels sont les tests biochimiques à faire pour le Dx de la sclérodermie?
-ANA
-ENA
Anti-Scl 70 (sensibilité à 65% / spécificité à 98,5%)
Anti-PM Scl
Anti-RNP
Anti-Fibrillarine
Anti-CENP (sensibilité à 1,6% / spécificité à 100%)
Qu’est-ce qu’une ce que la maladie du tissu conjonctif indifférencié (UCTD)?
Maladie auto immune systémique
Personnes qui présentent des caractéristiques de CTD mais qui ne remplissent pas les critères Dx établis pour une maladie en particulier
Profil nucléolaire moucheté (AC-2/4/5)
1. Décrire des profils
2. Quels sont les auto-Ac associés?
2. Quels pathologies sont associées?
- Petits/gros grains dans tout le nucléoplasme
Les nucléoles peuvent être plus ou moins marqués
Les cellules en métaphase sont négatives - U1RNP, Sm, SSA/Ro, SSB/La, RNA Pol III, Mi2, Ku
- Lupus érythémateux systémique, syndrome de sjogren, dermatomyosite, sclérodermie, polymyosite
Quel types de vasculites sont associés aux petits vaisseaux?
Vasculite nécrosante avec peu ou pas de dépôts de complexes immuns, associés aux ANCA (MPO ou PR3)
-Polyangéite microscopique (MPA)
-Granulomateuse avec polyangéite (GPA)
-Granulomatose avec éosinophile et polyangéite (EGPA)
Quelles maladies sont associées aux vasculites affectant les gros vaisseaux?
-Artérite de Takayasu et -Artérite gigantocellulaire (GCA)
Quelles maladies sont associées aux vasculites affectant les moyens vaisseaux?
-Polyartérite noueuse
-Maladie de Kawasaki
Quelles sont les spécificités des C-ANCA, P-ANCA et X-ANCA?
c-ANCA: anti PR3 +
Principalement retrouvés dans la GPA
p-ANCA: anti MPO +
Retrouvés dans MPA,
glomérulonéphrites, EGPA, périartérite noueuse, LED et la PR
x-ANCA: p-ANCA + et anti-MPO
Principalement retrouvés dans MII, C.U. et cholangite sclérosante
Qu’est-ce qui explique les différents patrons observés lors d’une fixation à l’EtOH vs la formaline?
La fixation à la formaline est trop rapide et il n’y a donc pas de migration de charge dans la cellule
La fixation à l’EtOH permet une migration des cations fortement positifs périnucléaire et les charges neutres migrent à travers le cytoplasme
Vrai ou faux?
Les C ANCA ont un aspect similaire lorsqu’ils sont fixés avec EtOH et formaline
Vrai
Quelle est l’utilité de la fixation de la formaline lors de l’analyse des ANCA?
L’objectif principal de l’analyse sur un substrat fixé au CH2O est
de différencier les aspects ANCA des autres types de
fluorescence susceptibles de ressembler aux aspects ANCA
(ex. aspects ANA)
