Semaine 2_Méthode enzymatique Flashcards
Afin de mesurer l’ammoniaque dans les échantillons sériques, la chimie la plus fréquente utilise le système de détection suivant :
A) L’utilisation de la glutamate déshydrogénase qui oxyde le NAD+ en NADH, occasionnant une augmentation de l’absorbance à 340 nm.
B) L’utilisation de la glutamate déshydrogénase qui réduit le NADH en NAD+, occasionnant une diminution de l’absorbance à 340 nm.
C) L’utilisation de la glutamate déshydrogénase qui réduit le NAD+ en NADH, occasionnant une augmentation de l’absorbance à 340 nm.
D) L’utilisation de la glutamate déshydrogénase qui oxyde le NADH en NAD+, occasionnant une diminution de l’absorbance à 340 nm.
D) L’utilisation de la glutamate déshydrogénase qui oxyde le NADH en NAD+, occasionnant une diminution de l’absorbance à 340 nm.
Quel est le cofacteur des aminotransférases?
A) Pyridoxal 5′-phosphate
B) Vitamine B9
C) Quinoneimine
D) Un sel de diazonium
A (autre nom de la vitamine B6)
Vrai ou faux, la méthode suivante représente la méthode de dosage enzymatique de la créatinine:
1-) créatinine + H2O => (créatininase) => créatine
2-) créatine + H2O => (créatinase) => sarcosine + urée
3-) sarcosine + O2 + H2O => (sarcosine oxydase) => formaldéhyde + glycine + H2O2
4-) Indicateur réduit + H2O2 => (peroxydase) => indicateur oxydé + 2 H2O
Vrai
Vrai ou faux, il existe une méthode enzymatique de dosage du magnésium.
Faux
La PEP carboxylase (Phosphoenol pyruvate carboxylase) est une enzyme utilisé dans le dosage de quel analyte?
A) Créatinine (méthode enzymatique)
B) Lactate
C) Urate
D) Bicarbonate
E) Cholestérol
F) Triglycéride
D
Lors du dosage de plusieurs enzymes sériques, tels que ALP et GGT, la réaction est calibrée avec :
A) De l’eau ou du diluant
B) 1 calibrateur contenant une certaine concentration d’enzyme
c) 4 à 6 calibrateurs contenant une série de concentration croissante d’enzyme.
D) Aucun calibration n’est nécessaire, il n’y a que des facteurs intégré à bord des appareils qui sont requis.
A
L’uricase est l’enzyme permettant le dosage de quel analyte?
A) Urée
B) Ammoniaque
C) Urate (Acide urique)
D) Homocystéine
C
Plusieurs réactions enzymatiques utilisent la glutamate déshydrogénase, lesquelles?
Urée, Ammoniaque
Nommer 5 analytes pouvant être dosés par une méthode enzymatique utilisant le NADPH/NADP+/NADH/NAD+
Ammoniaque, ALT, AST, Bicarbonate, CK, Glucose, Lactate, Lactate déshydrogénase, Urée
Nommer 3 analytes pouvant être dosés par une méthode enzymatique utilisant la peroxydase.
Lipase, Acide urique, Triglycéride, LDL-cholestérol, HDL-cholestérol
1-) Nommer les enzymes utilisées en cliniques qui possèdent des isoenzymes.
2-) Nommer les isoenzymes pour chacunes d’entre-elles.
CK (CK-MM, CK-MB and CK-BB)
LD (LD-1, LD-2, LD-3, LD-4, LD-5)
Amylase (surtout: pancréatique et salivaire; dans une moindre mesure: utérine/trompe de faloppe)
ALP (Os : Osseuse. H1: hépatique, H2 : Biliaire. I1 et I2 et I3 : Intestinal. P1 et P2 : Placentaire)
Quels sont les méthodes principales de détection des macroenzymes?
Il y en a 2 principales:
1-) Électrophorèse des isoenzymes
2-) Précipitation de la macro enzyme au PEG 20%
Il est également possible de mesurer un clairance urinaire pour l’amylase dans les cas de suspicions de macro-amylase (puisqu’elle est mesurable dans l’urine et le sérum).
Décrire les réactions enzymatique d’ordre zéro et d’ordre 1.
Ordre 0 : Lors d’excès de substrat, le sens de la réaction est favorisé vers le complexe ES jusqu’à saturation de l’enzyme, où V0 = Vmax, [S] > Km ([S] = 10 à 100 x Km).
Ordre 1 : Lorsqu’il y a une concentration fixe d’enzyme et une variation de substrat, seulement une fraction de l’enzyme forme des complexes avec le substrat, où V0 = (Vmax / Km)* [S], [S] < Km ([S] = ~1/5 Km).
La première étape des dosages enzymatiques de la plupart des analystes (glucose, etc.) est d’ordre 1. Lors des réactions à multiple étape, les autres étapes sont souvent d’ordre 0.
Que sont les réactions enzymatiques bi-substrat?
Certaines enzymes (Ex. Déhydrogénase, Aminotransférase) catalysent des réactions ayant 2 substrats et plus. Les réactions peuvent alors être modulées par la concentration de l’ensemble des substrats. Il existe 2 scénarios possibles pour les enzymes à bi-substrat :
1-) Formation de complexe ternaire enzyme-substrat : ES1, ES1S2, ES2
2-) Relâche du produit avant la liaison du second substrat : Réaction de type Ping-Pong bi-bi.
Est-ce que cet énoncé est vrai ou faux?
Lors de réactions consécutives, la première réaction de méthode enzymatique doit être la réaction limitante, afin que la réaction secondaire ou indicatrice soit directement proportionnelle au taux de formation du produit de la première réaction.
Vrai
Sur le graphique de Lineweaver-Burk suivant identifier les différents types d’inhibiteurs enzymatiques (Compétitif, Non-compétitif et Incompétitif).
A) Compétitif
B) Incompétitif
C) Non-compétitif
Sur le graphique de Lineweaver-Burk suivant, nommer les différents éléments identifiés.
Définir la formule décrivant ce graphique basé sur l’équation de Michaelis-Menten.
A) 1/v : Inverse de la vélocité ou vitesse
B) 1/Vmax
Si 1/[S] = 0, 1/v=?
1/v = (Km) / (Vmax * [S]) + 1 / Vmax
1/v = (Km/Vmax1/[S]) + 1 / Vmax
1/v = (Km/Vmax0) + 1 / Vmax
1/v = (0) + 1 / Vmax
1/v = 1 / Vmax
C) -1/Km
Si 1/v = 0, 1/[S] =?
1/v = (Km) / (Vmax * [S]) + 1 / Vmax
0 - 1/Vmax = (Km) / (Vmax * [S])
-1/Vmax = (Km / Vmax) * (1/[S])
-1/Vmax(Vmax / Km) = (Km / Vmax)(1/[S])*(Vmax / Km)
-1/Km = (1/[S])
1/[S] = -1/Km
D) 1/[S] : Inverse de la concentration du substrat
L’équation est la suivante: 1/v = (Km + [S]) / (Vmax * [S])
1/v = (Km) / (Vmax * [S]) + ([S]) / (Vmax * [S])
1/v = (Km) / (Vmax * [S]) + 1 / Vmax
