53. Fyzikálno-chemické analytické metódy

Question 1

Základné delenie a všeobecný princíp jednotlivých skupín

Answer 1

1. OPTICKÉ
   -interakcia elmag žiarenia s analyzovanou látkou
2. CHROMATOGRAFICKÉ
   -separačné metódy
   -látky sa delia medzi stacionárnu a mobilnú fázu na základe afiníť k týmto fázam
3. ELEKTROFORETICKÉ
   -separačné metódy
   -látky s el. nábojom sa delia vplyvom jednosmerného el. poľa
4. ELEKTROCHEMICKÉ
   -meranie el. veličín (prúd, odpor, napätie, vodivosť)

Question 2

Princíp spektrofotometrie, zákl. zákon (názov, vzorec, vysvetlivky)

Answer 2

= optická analytická metóda
-spektrálna analýza v oblasti 200-800nm
-sleduje zmeny absorpcie žiarenia roztokom na základe absorpcie (pohltenia) a trasmitancie (prepustenia) svetla určitej vlnovej dĺžky
!!absorbancia = -log T, nie je to to isté čo absorpcia

LAMBERTOV-BEEROV ZÁKON
A = ε × d × c
ε - mol. absorpčný koef.
d - hrúbka kyvety/vrstvy
c - koncentrácia roztoku

Question 3

Definícia mólového absorpčného koeficientu

Answer 3

ε vyjadruje absorbanciu roztoku s koncentráciou 1mol/l v kyvete s hrúbkou 1cm

Question 4

Definícia absorpčného spektra a analytickej krivky

Answer 4

ABSORPČNÉ SPEKTRUM
= závislosť absorbancie od vlnovej dĺžky svetla
-celé spektrum sa meria pri konštantnej koncentrácii a hrúbke vrstvy, mení sa vln. dĺžka
A = f (λ)

ANALYTICKÁ KRIVKA
= grafická závislosť absorbancie od koncentrácie
-závislosť je lineárna, ale iba pre zriedené roztoky
A = f (c)

Question 5

Využitie spektrofotometrie v biochémii

Answer 5

1. stanovenie nízkej koncentrácie farebných látok
2. meranie absorpčných spektier (pri vnútornom krvácaní vieme zistiť, ako je staré podľa rôznych abs. maxím zložiek krvi)
3. sledovanie enzymatických reakcií

…

Question 6

Princíp sedimentácie

Answer 6

fyzikálny dej -> vplyvom gravitácie sa tuhé časti suspenzie ukladajú na dno

rýchlosť závisí od:
-veľkosti
-tvaru
-hustoty častíc
-viskozity a hustoty kvapaliny

Question 7

Princíp centrifugácie, relatívna odstredivá sila

Answer 7

fyzikálna metóda, využíva účinok odstredivej sily na častice s rozdielnou hustotou (viacstupňovou centrifugáciou vieme frakcionovať viacero častí)

relatívna odstredivá sila R
= udáva, koľkokrát je odstredivé zrýchlenie väčšie ako zemské gravitačné
bb
R = 1,118 × N² × r × 10 na-5
r - polomer otáčania
N - počet otáčok/1min

Question 8

Názvy frakcií, ktoré vzniknú po centrifugácii krvi s/bez antikoagulanta

Answer 8

S ANTIKOAGULANTOM
supernatant = krvná plazma
sediment = krvné bunky

BEZ ANTIKOAGULANTA
supernatant = sérum
sediment = zrazené časti krvi

Question 9

Princíp potenciometrie a príklad jej využitia

Answer 9

-meria rozdiel el. potenciálov medzi 2 elektródami
-jedna je indikačná, druhá referenčná (známa hodnota potenciálu)
-potenciál indikačnej elektródy závisí od pH
-potenciál refer. elektródy nezávisí od pH

využitie: v laboratóriách na meranie pH (napr. aj krvi)

Question 10

Princíp gélovej a tenkovrstvovej chromatografie

Answer 10

GÉLOVÁ CHROMATOGRAFIA
-separácia molekulárnych zmesí v géle na základe rôznej veľkostí častíc
-malé častice prejdú gélom pomalšie, pretože sa musia “predrať” pórmi
-častice, ktoré sa do pórov nezmestia sa budú eluovať skôr (póry obídu)
-absorbancia je rovná koncentrácii

TENKOVRSTVOVÁ CHROMATOGRAFIA
-rozdelenie látok na základe rôznej afinity k fázam
-princíp spočíva v rozdelení zmesi rozp. látok medzi mobilnú (rozpúšťadlo) a stacionárnu fázu (jemnozrnný adsorbent) na povrchu tenkého substrátu (plastová, sklenená, hliníková doska)
-mobilná fáza migruje cez stacionárnu fázu, pričom rozpúšťa a “berie” zložky vzorky rôznymi rýchlosťami
-po dokončení sa zaznamenajú body, kde mobilná fáza zastala

Question 11

Definícia retenčného faktora

Answer 11

udáva, ako ďaleko zaostáva škvrna analyzovanej látky za čelom rozpúšťadla

vyššia hodnota = silnejšia retencia a pomalšia elúcia analytu z kolóny a naopak

matematicky

pozn.: takto mi to vypľul chatGPT lebo k odpovedi som sa nevedela dopátrať, takže nie je na 100% dôveryhodná :(