44. Enzýmy - mechanizmus účinku a kinetika enzýmových reakcií Flashcards
Štruktúra enzýmov
-zvyčajne globulárne proteíny (niektoré RNA - ribozýmy)
-môžu mať primárnu až kvartérnu štrukúru (to isté ako proteíny)
-vysoko špecifické
-z reakcie odchádzajú nezmenené
-pôsobia v malých množstvách
-tvar, ktorý priťahuje špecifický substrát
Funkcia enzýmov
=biokatalyzátory
-účastnia sa všetkých biochem. reakcií tvorby a odbúrania látok (metabolizmus)
-zvyšujú rýchlosť reakcie
-nemenia rovnováž. konštantu
-znižujú aktivačnú energiu
-orientujú substrát do vhodnej polohy pre reakciu
Rozdelenie na základe štruktúry + názvy jednotlivých zložiek
Aktívne miesto enzýmu
-tvoria ho zvyšky AMK
-má väzbové (S) a katalytické miesto (reakcia)
-niektoré enzýmy majú viac aktívnych centier
-zaberá malú časť
-lokalizované v štrbinách a priehlbinách
-substrát sa do neho viaže mnohými slabými (min 3) interakciami
-E uvoľnená pri interakciách = väzbová energia
Typy väzby substrátu na aktívne miesto enzýmu
-slabé, ale početné interakcie, minimálne 3mi sa viaže substrát
× vodíková väzba
× hydrofóbne interakcie
× iónové interakcie
× výnimočne kovalentná väzba
Teórie väzby substrát + enzým
-
teória kľúča a zámku
-substrát (kľúč) pasuje presne do zámku (enzým)
-vysoko špecifické interakcie (E rozoznáva stereoizoméry)
-aktívne centrum E je presne sformované a rigidné -
model indukovaného prispôsobenia (ruka v rukavici)
-flexibilita proteínov
-S sa viaže v aktívnom centre E a mení jeho konformáciu (prispôsobí si ho)
-komplex ES oslabí väzby v substráte a ľahšie sa premieňa na produkt
Mechanizmus enzýmovej reakcie
a) enzým viaže 2 substráty v tesnej blízkosti
b) náboje v aktívnom centre indukujú zmeny nábojov na substráte
c) deformácia substrátu uľahčí premenu S->P
všade platí univerzálna schéma:
substrát sa naviaže do akt. miesta E, vznikne komplex, S sa premení na P (ten je následne uvoľnený) a E ostáva nezmenený
Stupne enzýmovej reakcie
- E+S -> E-S komplex
- E-S -> E-S* aktivácia komplexu
- E-S* -> E-P premena substrátu na produkt
- E-P -> E+P oddelenie produktu od enzýmu
-reaktanty sa musia zraziť s dostatočnou (aktivačnou) energiou
Kinetika 1-substrátových enzýmových reakcií - vzťah pre výpočet
výpočet rýchlosti enz. reakcie podľa Michaelis-Mentenovej
Kinetika 1-substrátových enzýmových reakcií - grafické vyjadrenie závislosti rýchlosti reakcie od koncentrácie substrátu
závislosť rýchlosti reakcie od c substrátu (má strop, nedá sa donekonečna zrýchľovať)
Definícia konštanty Km a jej grafické vyjadrenie
Km = Michaelisova konštanta (zákl. kinetická veličina pre E-S) = koncentrácia substrátu, pri ktorej enz. reakcia prebieha polovičnou rýchlosťou z maximálne dosiahnuteľnej rýchlosti
väčšia Km = nižšia afinita S ku E (a naopak)