Proteine (Enzymdiagnostik) II Flashcards
Isoenzym
Aussehen und Trennung?
Verhältnis zu Substrat?
Wo befinden sich diese?
- Unterschiedliche Proteinstrukturen
- > Unterschiedlicher IEP, Trennung über Elektrophorese
- Ähnliche Substratspezifität
aber unterschiedlicher KM-Wert
- unterschiedliche Gewebe- bzw. Organverteilung
Isoenzyme
LDH (Lactatdehydrogenase)
Wie viele Isoenzyme existieren davon?
Wo befindet sich LDH1?
Wo befindet sich LDH5?
Es existieren LDH1 bis LDH5
LDH1: Im Herzmuskel
LDH5: Im Skelettmuskel
Isoenzyme
LDH (Lactatdehydrogenase)
Die KM-Werte der einzelnen Isoenzyme sind unterschiedlich.
-> Ist der Herzmuskel hoch affin oder niedrig affin für Lactat?
Hoch affin! -> Kein Lactat im Herz!
Im Herzmuskel ist das umgekehrt (Kann Lactat nutzen)
Isoenzyme
CK (Creatinkinase)
Wo befindet sich:
- CK-MM
- CK-MB
- CK-BB
CK-MM: Skelettmuskel
CK-MB: Herz
CK-BB: Gehirn, Lunge
Isoenzyme
CK (Creatinkinase)
Wofür kann die CK-MB Aktivität herangezogen werden?
Was kann gemessen werden?
- CK-MB hauptsächlich im Herzmuskel aktiv
- > Dient zur Herzinfarktdiagnostik
- Nachweis CK-MB Aktivität oder direkte Bestimmung der CK-MB Masse
Isoenzyme
CK (Creatinkinase)
Wie kann die CK-MB Aktivität gemessen werden?
- Möglichkeit 1: CK-MB Aktivität: Antikörper gegen CK-M einsetzen
- > CK-B behält Funktion bei
- > Weise Restaktivität nach
- Möglichkeit 2: CK-MB Aktivität: Elektrophoretische Trennung, da die IEP unterschiedlich sind.
Isoenzyme
CK (Creatinkinase)
Wie kann die CK-MB Masse gemessen werden?
Direkter Nachweis von CK-MB mittels Immunoassay
-> Brauche aber eine Baseline
Isoenzyme
CK (Creatinkinase)
Wo liegt unter physiologischen Bedingungen der CK-MB Wert?
Auf was deutet eine erhöhte Menge an CK-MB hin und warum ist das so?
Unter 6% der Gesamt CK
Ist bei Verdacht auf einen Herzinfarkt die CK erhöht, steigt der Anteil des Isoenzyms CK-MB sehr schnell und beträgt sein Anteil über 6%, spricht dies für einen Herzinfarkt.
Wie lautet die Nachweisreaktion für ASAT?
Aspartat + 2-Oxoglutarat ⇌ Oxalacetat + Glutamat (ASAT)
Oxalacetat + NADH + H+ ⇌ Malat + NAD+ (Malat-Dehydrogenase)
Wie lautet die Nachweisreaktion für ALAT?
Alanin + 2-Oxoglutarat ⇌ Pyruvat + Glutamat (ALAT)
Pyruvat + NADH + H+ ⇌ Lactat + NAD+ (Lactat-Dehydrogenase)
Wie lautet die Nachweisreaktion für GLDH?
2-Oxoglutarat + NH4+ + NADH ⇌ Glutamat + NAD+ + H2O (Glutamatdehydrogenase)
Wie lautet die Nachweisreaktion für AP (Alkalische Phosphatase)?
4-Nitrophenylphosphat + H2O -> 4-Nitrophenolat + Phosphat
Bestimmung der Enzymaktivität der ASAT
-> Formuliere die beiden Reaktionsgleichung des Nachweises für ASAT
Bestimmung der Enzymaktivität der ASAT
Wie sieht das Diagramm der Extinktion bei diesem Nachweis aus?
Markiere den Punkt an dem alle Eduke (Alle nennen!) zugegeben werden
Halbwertzeiten von Enzymen
(Def.)
Die Halbwertzeit ist die Zeitspanne, in der die ursprünglich erhöhte
Enzymaktivität auf eine Restaktivität halber Höhe abgesunken ist
Neben dem de Ritis Quotienten existiert eine weiter Formel zu Einschätzung des Schweregrad einer Hepatozytenschädigung.
Wie lautet sie?
Was kann man hiermit unterscheiden?
GD = Glutamatdehydrogenase
Ermöglicht Unterscheidung zwischen Vergiftung und akuter Hepatitis
Wie ist der Wert bei einer akuten Hepatitis?
Warum ist er das?
> 50
-> Schädigung Hepatozyt, aber Mitochondrien noch intakt
Wie ist der Wert bei einer Vergiftung?
Warum ist er das?
Wert nahe 1
-> Gesamte Zelle zerstört, auch GD welche nur in den Mitochondrien vorliegt wurde freigesetzt
Wie kann man eine akuten Virushepatitis von einer akuten (toxischen) Alkohol-Hepatitis unterscheiden?
Virushepatitis: ASAT und ALAT erhöht, GGT nur wenig erhöht
Alkoholhepatitis: GGT sehr stark erhöht gegenüber ASAT und ALAT
