Immunchemische Verfahren II

Question 1

Antikörper

Aufbau an IgG zeigen (Ketten)

Wodurch werden Ak zusammengehalten? (Bindungen)

Answer 1

Question 2

Antikörper Aufbau

Zuordnen: Leichte und schwere Kette

VH und VL

CL, CH1, CH2, CH3

Welcher Bereich ist Fab-Fragment, Fc-Fragment?

Wo befinden sich die Antigen-Bindungsstellen?

Answer 2

Question 5

Wie nennt man die Antigenbindungsstelle noch?

Woraus beseht es?

Answer 5

Paratop

Besteht aus mehreren CDR-Regionen

Question 6

Fab

(Def.)

Answer 6

Fragment antigen-binding (Bereich des Antikörpers, der an ein Antigen bindet)

Question 7

Unterschied im Aufbau von IgG, IgA und IgD im Vergleich zu IgM und IgE

Answer 7

IgG, IgA und IgD: Gelenkregion

IgM und IgE: Weitere konstante Domäne

Question 8

Was sind die CDR-Regionen?

(Def.)

Was stellen sie dar?

Was ist die Summe der CDR’s?

Answer 8

Complementary Determining Region

Stellen die variablen Bereiche des Moleküls dar.

Mehrere CDR’s -> Paratope

Question 9

Antigenbindungsstelle

Welche Region des AK besitzt diese?

Answer 9

VL und VH

Question 11

Heidelberger Kurve

Was gegen was aufgetragen?

Answer 11

Präzipitation/Messignal gegen Antigenkonzentration

Question 12

Wie lassen sich die einzelnen Bereiche der Heidelberger Kurve erklären?

Welcher Bereich ist dementsprechend für Analysen geeignet?

Answer 12

1. Antikörperüberschuss (nahezu linearer Bereich) AK > AG
2. Äquivalenzbereich AK = AG
3. Antigenüberschuss AK < AG

Der Bereich des Antikörperüberschuss (da er nahezu linear ist -> Kalibrationsgerade)

Question 13

Fc

(Def.)

Wofür notwendig?

Answer 13

Fragment Crystallizable region (Fc-region)

Interagiert mit Zelloberfläche (Fc-Rezeptor, z.B. Makrophage) und dem Komplementsystem

Question 14

Wie ist die Beziehung zwischen B-Zellen mit ihren Rezeptoren und den zu erkennenden Antigen?

Answer 14

B-Zellen bilden VIELE VERSCHIEDENE Rezeptoren aus.

Wenn der Rezeptor ein Antigen erkennt -> Proliferation B-Zelle und Umwandlung in Plasmazelle -> Plasmazelle produziert Antikörper

Question 15

Präzipitation

Wodurch entsteht es?

Zu was führt es?

Wie wird ausgewertet?

Answer 15

Wechselwirkung lösliches Antigen mit IgG

• > Führt zu Trübung
• > Auswertung mit Turbidimetrie oder Nephelometrie

Question 16

Trypsin

Wo gebildet?

Was macht es und wozu braucht man es?

Wo wirkt es?

Answer 16

Im Pankreas

Eine Protease die Proteine abbaut um daraus AS zu gewinnen.

Im Dünndarm

Question 17

Was ist das Problem bei zu stark erhöhten Trypsin Werten?

Was ist die Lösung?

Answer 17

Wäre Trypsin zu stark erhöht würde Gewebe abgebaut werden.

Antitrypsin ist der Gegenspieler von Trypsin und hält die Homöostase aufrecht.

Question 18

Welche Fraktionen in der Serumeiweißelektrophorese sind bei einer Entzündung erhöht?

Wie ist der Antitrypsinspiel bei einer Entzündung?

Was bedeutet eine Entzünding in Kombination mit niedrigen Antitrypsin Spiegel?

Answer 18

Akkute Phase Proteine Alpha 1 und Alpha 2

Erhöhter Spiegel an Antitrypsin

Wenn Antitrypsin vermindert ist, obwohl ein Leberschaden (Hepatitis) vorliegt, so muss es sich um einen vererbten Defekt handeln.

Question 19

Zu was kommt es bei der Gabe von falschem Spenderblut?

Welches Molekül ist für die Vermittlung dieses Problems verantwortlich?

Wie viele Bindestellen hat es?

Answer 19

Agglutination der Erythrozyten -> Erythrozytenabbau -> Hämolyse

IgM

10 Bindestellen -> Agglutiniert

Question 20

4 typische Radionukleotide

Answer 20

¹²⁵I, ¹⁴C, ³H, ³²P

Question 21

Wo wird HCG hergestellt und wo weißt man es nach?

Answer 21

In Plazenta hergestellt und im Urin nachgewiesen.

Question 22

Wie wird ein Antikörper quantifiziert?

Answer 22

AK

AK

Ag

Erster AK ist mit einem Fluorophor (Z.B. Radionukleotid) verbunden.

Question 23

Drei Voraussetzungen für einen Enzym Immunoassay

Answer 23

Affinität (Bildungsgeschwindigkeit Ag-AK-Komplex)

Avidität (Bindungsstabilität Ag-AK-Komplex)

Spezifität (Keine Kreuzreaktionen dürfen möglich sein!)

Question 24

Aufbau heterogener kompetitiver Immunoassay

Answer 24

1. AK auf Well fixieren
2. +Probe
3. Fluoreszenzmarkierte Ag, die mit der Probe kompetitiv um Bindestellen konkurrieren zugeben

Question 25

heterogener kompetitiver Immunoassay

Zusammenhang zwischen Messignal und Antigenkonzentration?

Proportionalität?

Answer 25

Keine Probe -> 100% markiert

-> Lichtintensität maximal

Viel Probe -> Bindet an Ak

-> Lichtintensität vermindert

Probenkonzentration umgekehrt proportional zur Lichtintensität

Question 26

Warum funktioniert der HIV Test erst nach 3 Monaten?

Answer 26

Weil der Körper Zeit braucht um gegen HIV Antikörper zu bilden und diese erst nach 3 Monaten nachweisbar sind.

Question 27

Welche Zellen werden bei der HIV-Infektion primär befallen (genaue Bezeichnung)?

Answer 27

CD4-T-Lymphozyten

Question 28

Wie heißen die drei Parameter, die bei einer HIV-Infektion gemessen werden?

Answer 28

HIV-RNA-Kopienzahl HIV-Antikörper CD4-T-Lymphozyten

Question 29

Mit welcher modernen Methode können Sie die HIV-RNA-Kopienzahl ermitteln?

Answer 29

Real-Time-PCR

Question 30

Mit welcher modernen Methode können Sie die Anzahl der mit HIV befallenen Zellen bestimmen?

Answer 30

Durchflußzytometrie

Question 31

Beantworten Sie die folgenden Fragen zum HIV-Bestätigungstest mit Richtig oder Falsch! 1. Zur Bestätigung eines positiven Suchtestergebnisses wird oft eine Western-Immunoblot-Analyse durchgeführt 2. Zur Durchführung werden die Nucleinsäurefragmente des Virus entsprechend ihres Molekulargewichtes elektrophoretisch aufgetrennt und auf eine Membran übertragen 3. Zu den nachzuweisenden Virusproteinen zählen env, gag, oder pol-Proteine 4.Die aufgetrennten Proteine auf der Membran werden mit Patientenserum inkubiert 5. Die Detektion erfolgt z.B. mit einem markierten Sekundärantikörper 6.Der entstehende Immunkomplex, der detektiert wird, ist ein Sandwich-Komplex

Answer 31

2. und 6. sind falsch, der Rest ist richtig. Zur Bestätigung eines positiven Suchtestergebnisses wird oft eine Western-Immunoblot-Analyse durchgeführt. Dafür werden Virusproteine (Antigene) entsprechend ihrem Molekulargewicht elektrophoretisch aufgetrennt und auf eine Membran übertragen, die dann als Teststreifen verwendet wird. Nachgewiesen wird ein Ag-Ak-Ak Komplex.

Question 32

hEPO vs rEPO Was ist das? Wozu dient es?

Answer 32

humanes EPO und rekombinantes EPO EPO dient der Neubildung von Erythrozyten

Question 33

CERA (Def.) Wie hergestellt? Was ist der Unterschied zu EPO?

Answer 33

Continuous Erythroiesis Receptor Activator Rekombinant hergestellt Verweilt im Körper länger als EPO

Question 34

Was ist der Unterschied zwischen human und rekombinant? Worin unterscheiden sich diese? Wie kann man analytisch unterscheiden?

Answer 34

Unterschiedliches Glykosylierungsmuster -\> Es geht um die Verteilung von Sialinsäure im Peptid Verteilung von Sialinsäure unterschiedlich - \> Isoelektrische Punkte unterschiedlich - \> Trennung über IEF möglich

Question 35

human/rekombinant Wie wird die Analyse durchgeführt?

Answer 35

1. Trennung über IEF (Weil IEP unterschiedlich) 2. Immunoblot-Einsatz hochspezifischer MAK 3. Zweiter Immunoblot-Übertragung der spezifisch von MAK gebundenen AK 4. Detektion über Chemoluminiszenz 5. Erhalte Bandenmuster zur Auswertung