Immunchemische Verfahren II Flashcards

1
Q

Antikörper

Aufbau an IgG zeigen (Ketten)

Wodurch werden Ak zusammengehalten? (Bindungen)

A
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2
Q

Antikörper Aufbau

Zuordnen: Leichte und schwere Kette

VH und VL

CL, CH1, CH2, CH3

Welcher Bereich ist Fab-Fragment, Fc-Fragment?

Wo befinden sich die Antigen-Bindungsstellen?

A
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5
Q

Wie nennt man die Antigenbindungsstelle noch?

Woraus beseht es?

A

Paratop

Besteht aus mehreren CDR-Regionen

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6
Q

Fab

(Def.)

A

Fragment antigen-binding (Bereich des Antikörpers, der an ein Antigen bindet)

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7
Q

Unterschied im Aufbau von IgG, IgA und IgD im Vergleich zu IgM und IgE

A

IgG, IgA und IgD: Gelenkregion

IgM und IgE: Weitere konstante Domäne

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8
Q

Was sind die CDR-Regionen?

(Def.)

Was stellen sie dar?

Was ist die Summe der CDR’s?

A

Complementary Determining Region

Stellen die variablen Bereiche des Moleküls dar.

Mehrere CDR’s -> Paratope

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9
Q

Antigenbindungsstelle

Welche Region des AK besitzt diese?

A

VL und VH

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11
Q

Heidelberger Kurve

Was gegen was aufgetragen?

A

Präzipitation/Messignal gegen Antigenkonzentration

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12
Q

Wie lassen sich die einzelnen Bereiche der Heidelberger Kurve erklären?

Welcher Bereich ist dementsprechend für Analysen geeignet?

A
  1. Antikörperüberschuss (nahezu linearer Bereich) AK > AG
  2. Äquivalenzbereich AK = AG
  3. Antigenüberschuss AK < AG

Der Bereich des Antikörperüberschuss (da er nahezu linear ist -> Kalibrationsgerade)

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13
Q

Fc

(Def.)

Wofür notwendig?

A

Fragment Crystallizable region (Fc-region)

Interagiert mit Zelloberfläche (Fc-Rezeptor, z.B. Makrophage) und dem Komplementsystem

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14
Q

Wie ist die Beziehung zwischen B-Zellen mit ihren Rezeptoren und den zu erkennenden Antigen?

A

B-Zellen bilden VIELE VERSCHIEDENE Rezeptoren aus.

Wenn der Rezeptor ein Antigen erkennt -> Proliferation B-Zelle und Umwandlung in Plasmazelle -> Plasmazelle produziert Antikörper

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15
Q

Präzipitation

Wodurch entsteht es?

Zu was führt es?

Wie wird ausgewertet?

A

Wechselwirkung lösliches Antigen mit IgG

  • > Führt zu Trübung
  • > Auswertung mit Turbidimetrie oder Nephelometrie
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16
Q

Trypsin

Wo gebildet?

Was macht es und wozu braucht man es?

Wo wirkt es?

A

Im Pankreas

Eine Protease die Proteine abbaut um daraus AS zu gewinnen.

Im Dünndarm

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17
Q

Was ist das Problem bei zu stark erhöhten Trypsin Werten?

Was ist die Lösung?

A

Wäre Trypsin zu stark erhöht würde Gewebe abgebaut werden.

Antitrypsin ist der Gegenspieler von Trypsin und hält die Homöostase aufrecht.

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18
Q

Welche Fraktionen in der Serumeiweißelektrophorese sind bei einer Entzündung erhöht?

Wie ist der Antitrypsinspiel bei einer Entzündung?

Was bedeutet eine Entzünding in Kombination mit niedrigen Antitrypsin Spiegel?

A

Akkute Phase Proteine Alpha 1 und Alpha 2

Erhöhter Spiegel an Antitrypsin

Wenn Antitrypsin vermindert ist, obwohl ein Leberschaden (Hepatitis) vorliegt, so muss es sich um einen vererbten Defekt handeln.

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19
Q

Zu was kommt es bei der Gabe von falschem Spenderblut?

Welches Molekül ist für die Vermittlung dieses Problems verantwortlich?

Wie viele Bindestellen hat es?

A

Agglutination der Erythrozyten -> Erythrozytenabbau -> Hämolyse

IgM

10 Bindestellen -> Agglutiniert

20
Q

4 typische Radionukleotide

A

125I, 14C, 3H, 32P

21
Q

Wo wird HCG hergestellt und wo weißt man es nach?

A

In Plazenta hergestellt und im Urin nachgewiesen.

22
Q

Wie wird ein Antikörper quantifiziert?

A

AK

AK

Ag

Erster AK ist mit einem Fluorophor (Z.B. Radionukleotid) verbunden.

23
Q

Drei Voraussetzungen für einen Enzym Immunoassay

A

Affinität (Bildungsgeschwindigkeit Ag-AK-Komplex)

Avidität (Bindungsstabilität Ag-AK-Komplex)

Spezifität (Keine Kreuzreaktionen dürfen möglich sein!)

24
Q

Aufbau heterogener kompetitiver Immunoassay

A
  1. AK auf Well fixieren
  2. +Probe
  3. Fluoreszenzmarkierte Ag, die mit der Probe kompetitiv um Bindestellen konkurrieren zugeben
25
Q

heterogener kompetitiver Immunoassay

Zusammenhang zwischen Messignal und Antigenkonzentration?

Proportionalität?

A

Keine Probe -> 100% markiert

-> Lichtintensität maximal

Viel Probe -> Bindet an Ak

-> Lichtintensität vermindert

Probenkonzentration umgekehrt proportional zur Lichtintensität

26
Q

Warum funktioniert der HIV Test erst nach 3 Monaten?

A

Weil der Körper Zeit braucht um gegen HIV Antikörper zu bilden und diese erst nach 3 Monaten nachweisbar sind.

27
Q

Welche Zellen werden bei der HIV-Infektion primär befallen (genaue Bezeichnung)?

A

CD4-T-Lymphozyten

28
Q

Wie heißen die drei Parameter, die bei einer HIV-Infektion gemessen werden?

A

HIV-RNA-Kopienzahl HIV-Antikörper CD4-T-Lymphozyten

29
Q

Mit welcher modernen Methode können Sie die HIV-RNA-Kopienzahl ermitteln?

A

Real-Time-PCR

30
Q

Mit welcher modernen Methode können Sie die Anzahl der mit HIV befallenen Zellen bestimmen?

A

Durchflußzytometrie

31
Q

Beantworten Sie die folgenden Fragen zum HIV-Bestätigungstest mit Richtig oder Falsch! 1. Zur Bestätigung eines positiven Suchtestergebnisses wird oft eine Western-Immunoblot-Analyse durchgeführt 2. Zur Durchführung werden die Nucleinsäurefragmente des Virus entsprechend ihres Molekulargewichtes elektrophoretisch aufgetrennt und auf eine Membran übertragen 3. Zu den nachzuweisenden Virusproteinen zählen env, gag, oder pol-Proteine 4.Die aufgetrennten Proteine auf der Membran werden mit Patientenserum inkubiert 5. Die Detektion erfolgt z.B. mit einem markierten Sekundärantikörper 6.Der entstehende Immunkomplex, der detektiert wird, ist ein Sandwich-Komplex

A
  1. und 6. sind falsch, der Rest ist richtig. Zur Bestätigung eines positiven Suchtestergebnisses wird oft eine Western-Immunoblot-Analyse durchgeführt. Dafür werden Virusproteine (Antigene) entsprechend ihrem Molekulargewicht elektrophoretisch aufgetrennt und auf eine Membran übertragen, die dann als Teststreifen verwendet wird. Nachgewiesen wird ein Ag-Ak-Ak Komplex.
32
Q

hEPO vs rEPO

Was ist das?

Wozu dient es?

A

humanes EPO und rekombinantes EPO

EPO dient der Neubildung von Erythrozyten

33
Q

CERA

(Def.)

Wie hergestellt?

Was ist der Unterschied zu EPO?

A

Continuous Erythroiesis Receptor Activator

Rekombinant hergestellt

Verweilt im Körper länger als EPO

34
Q

Was ist der Unterschied zwischen human und rekombinant?

Worin unterscheiden sich diese?

Wie kann man analytisch unterscheiden?

A

Unterschiedliches Glykosylierungsmuster

-> Es geht um die Verteilung von Sialinsäure im Peptid

Verteilung von Sialinsäure unterschiedlich

  • > Isoelektrische Punkte unterschiedlich
  • > Trennung über IEF möglich
35
Q

human/rekombinant

Wie wird die Analyse durchgeführt?

A
  1. Trennung über IEF (Weil IEP unterschiedlich)
  2. Immunoblot-Einsatz hochspezifischer MAK
  3. Zweiter Immunoblot-Übertragung der spezifisch von MAK gebundenen AK
  4. Detektion über Chemoluminiszenz
  5. Erhalte Bandenmuster zur Auswertung