Methoden der klinischen Chemie (Harnanalysen/Photometrische Verfahren)

Question 1

Fluorimetrie

Answer 1

Fluoreszenzmessung

Beispiel: DNA/RNA-Bestimmung

Question 2

Densitometrie

Answer 2

Messung der Dichte von Stoffen

Quantitative Messung der Farbmenge pro Flächeneinheit

(Messung der Lichtdurchlässigkeit)

-> Für Elektrophoreseauswertung wichtig!

Question 3

Lambert-Beersches-Gesetz

Answer 3

A = a_c * c * d

A: Absorbance (früher Extinktion)

a_c: Proportionalitätsfaktor (Extinktionskoeffizient)

c: Konzentration [mol/l]
d: Schichtdicke [cm]

Question 4

NIR (Def.)

Wozu kann es genutzt werden?

Answer 4

Nahes Infrarot 750 nm - 2500 nm, liegt zwischen IR und visible light.

Verwendung zur Substanzkontrolle (Große Stoffmengen kontrollieren) -> Beruht auf der guten Durchdringbarkeit des IR-Lichts.

Forschung an: NIR verwenden um Blutglucose zu messen (nicht invasiv)

Question 5

Radioimmunoassay

Nachweisgrenze?

Answer 5

10^-12 g/ml

Question 6

Direktes vs Indirektes Verfahren

Was ist der Unterschied?

Answer 6

Beim direkten Verfahren wird der Analyt direkt nachgewiesen. Beim indirekten Verfahren wird eine Hilfsreaktion benötigt.

Question 7

Optischer Test

Bei welcher Wellenlänge wird gemessen und warum?

Answer 7

NAD⁺ 260nm

NADH 340nm

Größeres delokalisiertes pi-Elektronensystem -> Bathochrome Verschiebung (längerwellig, weniger Energie)

Question 8

Optischer Test

Wie sehen die Moleküle aus die dafür wichtig sind?

Answer 8

Question 9

Optischer Test

Wie lautet die vereinfachte Reaktionsgleichung?

Welches ist das chromophore System?

Answer 9

NAD⁺ + H⁺+2e^- -> NADH

Nicotinamid ist chromophores System

Question 10

Optischer Test

Extinktionsdiagramm

Answer 10

Question 11

Ulbricht’sche Kugel

Aubau

Answer 11

Question 12

Wie funktioniert die Ulbricht’sche Kugel?

Question 13

Was ist die Gundlage aller immunchemischer Messverfahren?

Answer 13

Antigen-Antikörper-Reaktion

Question 14

Welche Klasse von Antikörper sind die kleinsten AK?

Answer 14

Immunglobulin G (IgG)

Question 15

Wie kann Lactat bei Sport gemessen werden?

Nimmt die Extinktion ab oder zu?

Answer 15

Optischer Test:

NAD⁺ + Lactat -> Pyruvat + NADH + H⁺

Zunahme Extinktion bei 340 nm

Question 16

Welches Enzym ist für die Umsetzung von Lactat zu Pyruvat zuständig?

Answer 16

Lactatdehydrogenase

Question 17

Warum kann Lactat bei Sport gemessen werden?

Answer 17

Bei Sport existiert nicht genug O2

• > Anaerobe Glykolyse läuft ab
• > Endprodukt ist Lactat

Question 18

Welche Eigenschaft nutzt man bei Immunchemische Untersuchuchungsverfahren

durch DIREKTE Antigen-Antikörper Reaktion ohne Tracer aus?

Answer 18

Präzipitatbildung im Äquivalenzbereich

Question 19

Nephelometrie (Def.)

Was ist hier zu beachten?

Answer 19

Messung von Streulicht, welches durch fein verteilte kolloide Teilchen entsteht (Tyndall-Effekt).

Wichtig: Das eingestrahlte Licht darf nicht absorbiert werden!

Question 20

Welchen Trick nutzt man bei bei der Immunnephletometrie und der Immunturbidimetrie aus?

Answer 20

Vergrößerung des Analyten durch Antigen-Antikörper-Reaktion (größerer Vernetzungsgrad, größeres Signal, da mehr Streulicht erhalten)

Question 21

Zu welcher Klasse von Antikörper zählen die Blutgruppen-Antikörper?

Answer 21

IgM

Question 22

Was bewirken Dehydrogenasen?

Answer 22

-2 H

Question 23

Wie funktioniert die Hexokinase Methode zur Bestimmung der Glucose im Plasma?

Answer 23

Glucose + ATP -> Glucose-6-P + ADP

Glucose-6-P + NADP⁺ -> Glucono-lambda-Lacton-6-Phosphat + NADPH + H⁺

Question 24

Nimmt bei der Hexokinase Methode die Extinktion zu oder ab?

Wo wird die Hexokinase Methode eingesetzt?

Answer 24

NADPH wird gebildet -> Extinktion nimmt zu

Als Referenzmethode in der Klinik verwendet

Question 25

Lactone (Def.)

Answer 25

Zyklische Ester

Question 26

Carbonsäureanhydrid (Struktur)

Answer 26

R = R’

Question 27

Gemischte Carbonsäureanhydride

Answer 27

R ist UNGLEICH R’ !

Question 28

POCT (Def.)

Answer 28

Point of care testing (Test direkt am Krankenbett)