Immunchemische Untersuchungsverfahren Flashcards
Welches Testsystem nutzt man bei dem Latex-Agglutinations- Schwangerschaftsstest?
Latex-Agglutinaionshemmtest:
Latex-Kügelchen mit fixierten HCG (=AG) und Anti-HCG-Antikörper
Wie ist ein Latex-Agglutinationstest aufgebaut?
Test auf AK :
Latexkügelchen mit fixierten AG+Probe(AK) -> Niederschlag
(Test auf AG: analog mit fixierten AK)
Welches Hormon wird bei einem Schwangerschaftstest nachgewiesen?
HCG (humanes Choriongonadotropin)
Wie funktioniert der Schwangerschaftstest?
Wenn nicht Schwanger:Verklumpung (Agglutinat)
Reaktion von Latex-HCG mit Anti-HCG-AK
Bei Schwangerschaft: keine sichtbare Verklumpung (Präzipitat)
Konkurrenz Latex-HCG mit natürlichen HCG; Anti-HCG-AK bindet mit größerer Affinität an natürlichen HCG
Wie ist ein Sandwich-Komplex aufgebaut?
Fixierter AK- Zielmolekül: AG- markierter AK
Zur quantitativen Bestimmung von AG
Wie kann man quantitativ AK bestimmen?
Mit einem AG-AK1-AK2-Komplex
AK1: Zielmolekül
AK2: markierter AK
RIA
Radio-Immun-Assay
LIA
Lumineszenz-Immunassay
ECLIA
Elektrolchemiumineszenz-Immunassay
EIA/ELISA
Enzym linked Immuno Sorbent Assay
EMIT
Enzym Multiplied Immunoassay Technique
FPIA
Fluoreszenz-Polarisations-immunoassay
Welche Aussage kann man zu der Signalstärke eines heterogenen kompetitiven Immunoassays machen?
indirekte Proportionalität
viel Analyt >>wenig Effekt
kein Analyt>> starkes Signal
Wie ist ein heterogener kompetitiver Immunassay aufgebaut?
feste Phase mit fixierten AK+ Analyt (AG) + Tracermolekül(Substratähnlich)
>> kompetitive Besetzung der Bindungstellen der AK
Welche Aussage kann man zur Signalstärke eines heterogenen nicht-kompetitiven Immunassays machen?
direkte Proportionalität
je mehr Analyt desto stärker Signal
Wie ist ein heterogenen nicht-kompetitiven Immunassay aufgebaut?
Platte mit fixierten AK+ Analyt (AG) +im Überschuss markierte AK (“Catcher”)
Sandwich-Komplex-Bildung
Welcher Immunochemische Test wird bei kleinen Molekülen angewendet?
kompetitiver Immunassay
Welcher Immunochemische Test wird bei großen Molekülen angewendet?
nicht-kompetitiver Immunassay
Schwangerschaftstest.Testreifen.
Was wird nachgewiesen?
HCG-Hormon als Antigen
Wie wird ein Antigen quantifiziert?
Wie nennt sich dieser Komplex?
Ak
Ag
Ak
Komplex
Ak 1 ist mit einem Flurophor verbunden.
Es handelt sich um einen Sandwich Komplex
Schwangerschaftstest. Teststreifensystem.
Wie ist der test aufgebaut:Sandwich-Kompex oder Ag-AK-AK- Komplex?
Kompetitiver oder nicht kompetitiver Immunoassay?
Sandwich Komplex
Nicht kompetitiver Immunoassay
Homogener kompetitiver Immunassay
Welche beide Verfahren kennen sie?
EMIT und FPIA
EMIT
kurze Beschreibung des Testsprinzips
Proportionalität?
- enzymmarkiertes AG ist an AK gebunden> keine Extinktion
- Zugabe von anderen AG(Probe) >Verdrängung des enzymmarkierten AG
- Freisetzung des Tracerenzyms> Extinktion durch Enzymaktivität
[AG] ist proportional zur Signalstärke
FPIA
kurze Beschreibung Testprinzp
- Testkit: Fluorescinmarkiertes AG+ AK+ AG (Probe)
- Kompetitive Vedrängung des fluorescinmarkierten AG
- Anregung mit polarisierten Licht (Flourescin Emission bei 520nm)
- Komplex von AK-fluorescinmarkiertes AG -> groß, langsame Rotation, größere Emission
- freies flourescinmarkiertes AG -> klein, kleine Emision
(je mehr Probe desto kleiner Emission)
