Immuno : RECOMBINAISON ISOTYPIQUE

Question 1

Quelles sont les étapes de la vie des AC ?

Answer 1

• 1ère étape : Réarrangement.
• 2ème étape : Hypermutation somatique
• 3ème étape : Switch

Question 2

Quelle est la condition pour parvenir à la recombinaison isotypique ?

Answer 2

collaboration entre les LT-CD4 TFh et LB
dans les centres germinatifs des organes lymphoïdes secondaires

Question 3

Quelles sont les types Ig et leur partie constante de la chaine lourde associée ?

Answer 3

• Gamma pour les IgG
• Alpha pour les IgA
• Mu pour les IgM
  *Delta pour les IgD
• Epsilon pour les IgE

Question 3

Structure des Ig ?

Answer 3

• 2 chaînes polypeptidiques : lourde + légère identique reliées par des ponts disulfures
• Pour chaque chaîne : partie constante + partie variable

Question 3

Localisation gène de la partie constante de la chaine lourde des Ig ?

Answer 3

• Xsome 14
• Chaque segment est formé par 3 ou 4 exons

Question 4

Impact de la nature de la partie constante de la chaine lourde des Ig ?

Answer 4

détermine la classe et la sous-classe des Ig

Question 4

Définition recombinaison isotypique ?

Answer 4

On remplace la partie constante de la chaîne lourde d’un IgM par la partie constante de la chaîne lourde d’une autre classe d’Ig

Question 4

Que permet le processus de recombinaison isotypique ?

Answer 4

Changement de fonctions effectrices tout en gardant la spécificité de l’AC

Question 4

Composition du segment Cδ ?

Answer 4

IgD : on a 3 segments δ (δ1, δ2, δ3 S)

Question 4

Que retrouve t’on en aval d’un segment Cμ?

Answer 4

1 promoteur Iμ puis 1 région pré switch Sμ → Existe pr tous les segments sauf pour segment δ
L’activation de promoteur en amont de la région switch cible le mécanisme sur un isotype particulier

Question 4

Composition du segment Cμ ?

Answer 4

IgM : on a 4 segments μ (μ1, μ2, μ3, μ4 S)

Question 5

Comment se fait le choix de la présence d’IgM ou IgD à la surface des LB ?

Answer 5

Selon la force du promoteur :
* Fort : IgM + IgD
* Faible : IgM
Par transactivation : expression du segment D : IgD
- LB immature expriment IgM uniquement
- LB mature expriment à la fois IgM et IgD

Question 5

Quelle est la spécificité du segment δ ?

Answer 5

Ne possède ni de promoteur, ni de région pré-switch
→ dépendant du promoteur et de la région pré-switch du Cμ

Question 6

A quoi servent les séquences S et M1/M2 ?

Answer 6

S : code pour un peptide de 21 AA, permet aux Ac de prendre la forme Sécrétoire
M : M1 et M2 : peptide de 41 AA, intégrer dans la Membrane plasmique des LB
* Ac ont 2 types d’expression : les formes membranaires (sur LB) ou formes sécrétés (dans les
plasmocytes)
Structure des Ac codé par l’exon M :
- 12 aa pour M1 dans la partie extérieure de la membrane plasmique
- 26 aa pour M1/M2 dans la membrane
- 3 aa pour M2 dans la partie cytoplasmique*

Question 7

Comment se passe le switch de IgM vers IgG1 ?

Answer 7

LB synthétise recombinase
→ forme une boucle non fonctionnelle entre les séq de commutation
→ provoque rapprochement d’1 segment codant d’1 domaine constant auprès d’un segment VDJ
→ boucle permet d’éliminer le segment Cμ et le segment D que l’on remplace par un segment ୪
* *Le mécanisme moléculaire de ce processus est peu connu, par contre des domaines de 2 à 3 kb en amont de chaque segment C (région pré-switch) sont impliqués dans ce mécanisme
* Si on est passé de IgM à IgG3, on peut encore refaire un switch vers IgA. Cependant, si on est passé de IgM à IgA, on ne peut pas revenir en arrière et faire un switch vers IgG3 car la boucle a été éliminée *

Question 8

De quoi sont formés les séquences pré-switch ?

Answer 8

correspond à des séquences répétées :
- 10 paires de bases pour Sμ, Sα et Sɛ
- 49 paires de bases pour Sγ répétés sur 1 à 2 kb
* riches en “GC” = motifs de type “hotspots” de mutation → site d’action de l’AID

Question 9

Modèle proposé pour le mécanisme de switch ?

Answer 9

1 fois le promoteur d’un segment C activé, le transcrit stérile est formé via cette activation et va faire un appariement stable avec le brin d’ADN transcrit (“R-loop”)

Question 10

Définition de la R loop ?

Answer 10

Boucle d’ADN simple brin formée par hybridation avec un ARN
structure faciliterait l’accès de l’AID à cette région résultant dans la formation de 2 désaminations proches sur des brins opposés qui produirait une cassure double brin

Question 11

Facteur spécifique du switch ?

Answer 11

AID
pas d’AID = pas de processus d’hypermutation somatique = pas de switch

Question 12

Facteurs ubiquitaires du switch ?

Answer 12

Uracile glycosylase ou MMR pour la formation d’un site abasique

Question 13

Quels sont les mécanisme mis en place pour réparer les cassures doubles brin causées par l’AID ?

Answer 13

• Mécanisme NHEJ qui répare ce type d’anomalie
• Besoin de q70, q80, de DNA-PKcs, d’Artemis, XRCC4, ligase IV et de la terminale transférase

Question 14

Quels sont les facteurs déterminants dans le choix du passage de l’IgM vers IgG ou IgE ?

Answer 14

Activation du promoteur en amont de la région switch cible le mécanisme sur un isotype particulier :
- Active les C immunitaires par LPS → On passe de IgM vers IgG
- Associe le LPS + IL-4 → On passe de IgM vers IgE

Question 15

Comment passe-t-on d’un centrocyte à un plasmocyte ?

Answer 15

3 étapes :
* Centroblaste : population ayant subi le processus d’hypermutation somatique
* Centrocyte : population ayant subi le switch. Ils sont de différents types : IgA, IgE…
* Différenciation en plasmocytes
* cytokines jouent un rôle très important sur l’orientation d’une cellule switchée vers le plasmocyte. Par exemple, l’INF gamma va donner des plasmocytes secrétant IgG2 ou IgG3*

Question 16

Impact de l’interaction B (centroblaste)/ THF (LT-helper) sur la recombinaison isotypique ?

Answer 16

1. Libération IL-21 par L-Tfh
2. IL21 agit sur LB
   → induit l’expression de BCL-6
   → Augmentation de l’expression cMYC
   → Prolifération des centroblastes et passage vers le switch et centrocytes

Question 17

Impact de l’augmentation de l’expression d’IRF-4 par centrocytes (quelques uns) ?

Answer 17

inhibe l’expression de BCL-6 et de BACH2 → induit augmentation de l’expression de BLIMP-1 → vers la formation de plasmocytes

Question 18

Conséquence des processus de remaniement des gènes des Ig ?

Answer 18

Translocations d’oncogènes dans les tumeurs :
* c-MYC : lymphomes de Burkitt
* BCL-2 : lymphome folliculaire
* BCL-6 : lymphocytes B larges et diffus