Bioch : TTT DES MALADIES PAR THÉRAPIE GÉNIQUE Flashcards
25/11/24 => Pinel
Définition de la thérapie génique ?
Stratégie thérapeutique qui consiste à délivrer des acides nucléiques dans les C somatiques d’un patient pour soigner ou prévenir une pathologie
Quels sont les acides nucléiques délivrés en fonction de la pathologie, lors de la thérapie génique ?
- Gène fonctionnel (transgène : mucoviscidose)
- Gène à action thérapeutique (gène CSF : mélanome + cadre ttt de cancers)
- ARN régulant l’expression d’un gène altéré (microARN ; oligonucléotides antisens ;
traitement de la dystrophie de Duchenne)
Quelles sont les différentes stratégies de thérapie génique ?
- Suppléer un gène « malade » pour un « gène fonctionnel »
- Eliminer ou réparer un gène altéré directement dans la cellule par édition génomique (CRISPR CAS9)
- -Modifier l’ARNm pour obtenir une protéine fonctionnelle
- Produire des cellules thérapeutiques par thérapie génique
- Utiliser des virus génétiquement modifiés pour tuer des cellules cancéreuses
Quelle manipulation est à réaliser en amont de l’insertion du transgène dans la thérapie génique ?
Il faut associer au « gène normal » un promoteur pour induire la transcription du gène et un terminateur de gène
Quelles sont les différentes étapes de thérapie génique ?
1 – Identifier le gène responsable de la maladie (*NGS = « Next Generation Sequencing » *)
2 – Réaliser le vecteur capable de transférer le gène médicament dans la cellule cible
3 – Administration du vecteur au patient et vérification de l’efficacité et la sécurité du médicament
Quels sont les différents types de promoteurs que l’on peu utiliser ?
- Promoteur d’origine virale : induisent une expression constitutive du gène permanente et durable de la protéine. /!\ peut ê reconnu par le syst immu et donc faire perdre le bénéfice du mdt
- Promoteur réglable : promoteur inductible sous l’effet d’une molécule pour permettre l’expression de la protéine.
- Promoteur spécifique d’un tissu
Caractéristiques des vecteurs viraux ?
- Vecteurs les + utilisés
- Parasites intracellulaires capables de transfecter leur matériel génétique
Nécessité de rendre le virus défectif, la place libéré par la délétion des protéines virulents permet d’insérer le gènes médicament
Nom des stratégie utilisées à base de vecteurs viraux ?
- Stratégie intégrative : Rétrovirus, Lentivirus
- Stratégie non intégrative : Adénovirus (très détecté par le syst immu), Adéno-associated virus (AAV)
Gènes impliqués dans la virulence des rétrovirus et la conséquence de leur activité en thérapie génique ?
On doit se séparer de ces gènes pour éviter le syst immu
⚫ GAG
⚫ PRO-POL (polymérase)
⚫ ENV (enveloppe)
Capacité d’insertion de transgène dans un rétrovirus ?
< 8kb
Il ne faut pas que la taille du gène-médicament dépasse les 8 Kb.
Différences des lentivirus avec les rétrovirus dans la thérapie génique ?
- Transfection du matériel génétique à travers la membrane nucléaire dans les C quiescentes ET en division
- Intégration du génome lentiviral en aval des sites d’initiation de transcription génique
➔ Profil de sécurité meilleur
Capacité d’insertion de transgène dans un lentivirus ?
< 8kb
* Il ne faut pas que la taille du gène-médicament dépasse les 8 Kb*
Quels sont les gènes conservés chez le lentivirus pour la thérapie génique ?
rev, tat, Vif, Vpu, Nef, Vpr
Quels différents adénovirus utilisés en thérapie génique ?
- 1ère génération : délétion de E1 ET E3, transgène de 8kb
- 2ème génération : délétion E1, E2, E3 et E4, transgène de 14kb
- 3ème génération : tout est enlevé, transgène de 36 kb
Caractéristiques des adénovirus utilisé en thérapie génique ?
➔ Position extra-Xsomique = épisome
➔ Infection des C en division ou non
➔ Expression à court terme du gène médicament
