Immuno : ORIGINE DE LA DIVERSITÉ DES AC ET DES TCR Flashcards
1/10/24
caractéristiques de PL1 ou PDL2 ?
- Ligands du récepteur PD1
- Inhibe l’effet activateurs de lymphocytes
caractéristiques du CTLA4 ?
Inhibe l’activation des lymphocytes
caractéristiques du CD28 ?
Active la prolifération des lymphocytes
Utilisation des CTLA4 dans le ttt des cancers ?
- protéine CTLA4 → freine prolifération des LT
- bloquer par un anticorps anti-CTLA4 → action des LT au niveau des cellules tumorales
=> Ipilimumab®
Utilisation de PD1 dans le ttt des cancers ?
- récepteurs présents sur les cellules immunitaires
- ralentit la réponse immunitaire
- anticorps dirigé contre PD1 => réponse immunitaire activée
=> Nivolumab®
Quels sont les marqueurs de chaque types cellulaires ?
- LB : CD19/20
- LT : CD3
- CS hématopoïétiqes : CD34
- Plaquette : CD41
- C NK : CD56
- Neutrophile : CD10
- Monocyte : CD13
Quelles sont les composantes de l’immunité acquise et adaptative ?
- Immunité humorale (LB) : réponse antibactérienne et fabrication AC, anti pathogène extra₵
- Immunité cellulaire (LT) : réponse antivirale avec activation des cellules cytotoxiques NK et TCD8, anti pathogène intra₵
Action cellule infectée par un virus ?
cellule (1) infectée par un virus reçoit l’information de son infection → sécréter interféron de type 1 =>
* cellule (2) non infectée par le virus → exprime un certain nombre d’enzymes qui bloquent la réplication virale
* cellule (3) infectée par un virus → demande d’exprimer d’avantages les CMH I pour avoir + de chance de capter les protéines virales intracellulaires pour les présenter à la surface et révéler les cellules T cytotoxiques
Rôle des LTCD4 vis à vis des C cytotoxiques ?
LTCD4 responsable de l’activation des cellules cytotoxiques
Quelles sont les cellules activées par le biais des CPA ?
LT (CD4 et CD8)
Action des LTCD4 via CPA ?
=> CMH de classe 2
Synapse immunologique entre cellule CPA et LT → libération d’IL2 → prolifération de LT →
* population lymphocytaire T effectrice → faire des cytokines ou collaborer avec d’autres populations cellulaires
* Si a vu l’antigène va se transformer en LTCD4 mémoire
Activation des LTCD8 via CPA ?
=> biais de CMH de classe 1
LTCD8 qui produit de l’IL2 →
* prolifération des LT CD8 effecteurs → détruire les cellules infectées et activer les macrophages
* se transformer en LT cytotoxique mémoire
Quelles sont les cellules qui assurent l’immunité humorale ?
LB et permet une réponse anti-bactérienne : fabrication d’AC
Quels sont les mécanismes qui ont lieu lors de l’immunité humorale ?
- Le réarrangement des gènes des immunoglobulines (1ère étape de la diversité des Ac)
- L’hypermutation somatique (2ème étape de la diversité des Ac)
- La recombinaison isotypique i(= mécanisme switch), (3ème étape de la diversité des Ac)
- Mémoire immunitaire
Caractéristiques du réarrangement des gènes des immunoglobulines ?
formation d’AC très diversifiés et peu spécifiques
=> IgM dans un premier temps, avec une affinité faible
Caractéristiques de l’hypermutation somatique ?
- maturation des AC vis-à-vis d’un Ag spécial
- Passage d’un AC de faible affinité à un AC de forte affinité
Caractéristiques de la recombinaison isotypique i ?
changement d’isotype d’un Ac => transformation des IgM en IgG, IgE ou IgA selon les besoins
Caractéristiques de la mémoire immunitaire ?
- Principe de vaccination
- Dure presque toute la vie
- immunité acquise
Rôle de l’immunité acquise ?
responsable de:
* la réponse effectrice contre le pathogène et les cellules
tumorales
* la vaccination
* la mémoire immunitaire
* l’allergie
* les maladies auto-immunes
* le rejet de greffe
* l’hypersensibilité
* les déficits immunitaires au niveau humorale ou cellulaire
Quels sont les récepteurs des lymphocytes ?
- TCR
- BCR
Caractéristiques de TCR ?
- surface de LT
- 2 gènes (αβ ou γδ)
- capables de produire 10^18 récepteurs
/!\ tjrs le même R sur 1 même LT /!\
Caractéristiques des BCR ?
- 3 gènes (H, κ, λ)
- capables de produire 5.10^13 récepteurs
- Chaque LB exprime un récepteur BCR différent → qd Ag arrive 1 seul LB capable de le reconnaître de façon spécifique
Avec seulement 24000 gènes dans le génome humain, comment on fait pour produire 10^18 protéines ?
→ La diversité provient du réarrangement
Structure des Ac ?
formés de 2 chaînes polypeptidiques reliées entre elles par des ponts disulfures avec des parties variables et des parties constantes au niveau des chaînes légères et lourdes
Comment à été mis en évidence le réarrangement des gènes pour la diversité des AC ?
- Gènes d’AC par analyse en Southern blot sur l’ADN des cellules :
- germinales (pas encore réarrangées)
- myélomateuses (issues du plasmocyte en fin de réarrangement)
- traiter ces ADN par enzymes de restriction (EcoR1) :
- 2 bandes pour les cellules embryonnaires (1 à 6kB et 1 à 4Kb)
- 1 bande pour les cellules myélomateuses (8Kb)
Répartition des gènes des AC ?
Chez l’Ho : répartis en plusieurs segments sur 3 Xsomes différents (14, 2, 22)
Que se passe-t-il au niveau des gènes des AC lors de la maturation des LB ?
Certains de ces segments géniques sont cassés au hasard par un système génétique capable de créer jusqu’à 10^10 combinaisons
Caractéristiques des gènes des AC ? (localisation, nb de segments…)
- chaîne lourde : Xsome 14, 51 gènes segment V sous forme de segments géniques, 25 pour le D, 6 pour le J
- chaîne légère Kappa : Xsome 2, 2 segments : V (40 gènes) et J (5)
- chaîne légère Lambda : Xsome 22, 2 segments : V (31) et J (4)
Comment se fait le réarrangement de la chaine lourde des AC ?
1) prend au hasard un segment D que l’on colle contre un segment J = réarrangement DJ (MO durant maturation des LB)
2) ensuite segment V au hasard contre le réarrangement DJ = réarrangement VDJ
3) transforme l’ADN en ARN pré messager → épissage : on enlève la partie entre la partie constante (segment C) et le segment J = réarrangement VDJCµ
4) phénomène de switch il faut enlever µ et mettre par exemple γ pour avoir IgG a la place de IgM
Pourquoi l’IgM est tjrs produit en 1er ?
Car partie constante µ du gène (IgM) est la + proche u réarrangement VDJ lors de l’épissage
Pourquoi les AC de faible affinité sont toujours les 1er produits ?
pour éviter les maladies auto-immunes
Comment se fait le réarrangement de la chaine légère ?
=> Après le réarrangement de la chaine lourde
1) choisit un segment V (κ ou λ) que l’on colle à un segment J = réarrangement VJ
2) épissage de l’ARNm qui va coller la partie constante soit κ soit λ
Grâce au réarrangement de gène combien de combinaison différentes d’IgM a-t-on ?
2 500 000
Rôle de la terminale transférase ?
multiplier par un facteur 10, 100 voire 1000 le nb de combinaison d’IgM possible
Comment agit la terminal transférase ?
Additionner des nucléotides P ou N entre chaque jonction de la chaîne lourde
Quels sont les facteurs nécessaire au processus de réarrangement des AC ?
- Signaux de recombinaison (RSS)
- Facteurs spécifiques aux cellules lymphoïdes : LT et LB
- Facteurs ubiquitaires
Quels sont les signaux de recombinaison pour le segment V de la chaine légère ?
- 3’ on a un motif heptamer séparé de 23 pdb du nonamer
- Rien en 5’
Quels sont les signaux de recombinaison pour le segment J de la chaine légère ?
- 3’ : rien
- 5’ : motif heptamer, 12 pdb puis nonamer
Quels sont les signaux de recombinaison pour le segment V de la chaine lourde ?
- 3’ : heptamer, 23 pdb, nonamer
- 5’: rien
Quels sont les signaux de recombinaison pour le segment J de la chaine lourde ?
- 3’ : rien
- 5’ : nonamer, 23 pdb, heptamer
Quels sont les signaux de recombinaison pour le segment D de la chaine lourde ?
- 3’ : heptamer, 12 pdb, nonamer
- 5’ : nonamer, 12 pdb, heptamer
Activité des signaux de recombinaison ?
Agissent “comme” des sites de restriction
Quels sont les facteurs spécifiques aux cellules lymphoïdes nécessaire au réarrangement des gènes des AC ?
2 enzymes : RAG-1 et RAG-2
Impact d’une mutation sur les enzymes RAG-1 et RAG-2 ?
pas de production des LB et LT
Rôles des enzymes RAG ?
- contrôlent le mécanisme de réarrangement
- connaissent des sites spécifiques
RSS - se comportent “comme” des enzymes de restriction
Quand et où sont exprimés les enzymes RAG ?
*seulement exprimées durant la maturation des LB et des LT
* dans la MO et le thymus
Comment agissent les enzymes RAG (mécanisme) ?
- rapprochement de 2 segments → former une sorte de boucle via une invagination de l’ADN → rapproche les segments RSS
- boucle qui reste au milieu va partir dans le cytoplasme et sera éliminé
- Les RAG coupent au niveau des séquences RSS
Caractéristiques du segment V ?
- En 5’ : existe une séquence leader → code pour un peptide signal → permet à la chaîne lourde de pénétrer dans la lumière du RE
- porte un promoteur
- 2 séqu régulatrices dans l’intron des gènes d’AC : un enhancer intronique et un enhancer en 3’ = sites de fixation des facteurs de transcription
Quels sont les “couples” d’AC que l’on peut trouver en même temps à la surface des LB ?
il peut y avoir des AC de type IgM et IgD ou les 2 en même temps à sa surface
Rôles des facteurs ubiquitaire dans le réarrangement des AC ?
Interviennent pour réparer/coller l’ADN cassé par RAG1 et RAG2
Pourquoi les syst de réparation de l’ADN sont ubiquitaire ?
L’ADN n’est pas une entité chimique unique inerte : sensible à de nombreuses agressions
Action de RAG-1 et de RAG-2 ?
reconnaissent les signaux RSS et permettent leur rapprochement ainsi que leur clivage
Comment se passe la réparation de l’ADN lors du réarrangement des AC ?
1) approche du segment D vis-à-vis du segment J et avec RAG 1 et 2 on casse l’ADN → se referme sur lui-même rapidement pour empêcher sa dégradation => formation « hairpin »
2) recoller les 2 morceaux proprement on utilise une enzyme : «Artemis » : rouvrir l’ADN
3) colle en rajoutant des bases complémentaires via la polymérase
4) Ligase lie le tout
5) terminal-transférase intervient sur un bout d’ADN et ajoute des bases
Différence entre la polymérase et la terminal transférase ?
- polymérase : besoin d’une matrice pour synthétiser l’ADN
- terminal-transférase n’en a pas besoin : ajoute les nucléotides au hasard
Localisation des gènes du TCR ?
- Locus de la chaîne α : Xsome 14, segments : Va, Ja, Cb
- Locus de la chaîne β : Xsome 7, segments : Vb, Db, Jb, Cb
Comment se fait le réarrangement des gènes de la chaîne β des TCR ?
- Dans thymus
- Comparable au réarrangement des gènes des chaînes lourdes du BCR/Ig
- Rapprochement aléatoire de 2 segments D et J
- Rapprochement aléatoire de DJ avec un segment V = VDJ
- Réarrangements effectués jusqu’à l’obtention d’une jonction VDJ fonctionnelle, sinon apoptose
- Transcription de VDJC
- Expression de β en surface
- Début de réarrangement des gènes α
