MCB cours 4-croissance des microorganismes Flashcards
Vrai ou faux, chez la plupart des procaryotes, la croissance d’une nouvelle cellule se poursuit jusqu’à sa division en deux nouvelles cellules par fission binaire (scissiparité) ?
Vrai
Par quoi est représentée la courbe de croissance d’une population bactérienne se développant dans un milieu de culture liquide ?
Par le log10 de la concentration bactérienne (bact/ml) en fonction du temps d’incubation (heures)
Quelles sont les 4 phases de croissance ?
Latence, exponentielle, stationnaire, mortalité
Que se passe durant la phase de latence ?
Adaptation, aucune division, dépend de l’âge et origine (composition et température du milieu)
Que se passe durant la croissance exponentielle log ?
Accélération de la croissance et division cellulaire, vitesse maximale, population uniforme, courte durée, la relation entre concentration des nutriments et croissance
Que se passe durant la phase stationnaire ?
Nombre total viables reste constant (équilibre mort et division), causée par nutriments limités et accumulation de déchets toxiques + acidité
Que se passe durant la phase de mortalité ?
Arrêt de la division cellulaire, nombre bactéries viables ou cultivables diminue constamment en fonction du temps, causé par dommages irréparables (perte viabilité), réponse génétique déclenchée (mort cellulaire), formation de cellules viables non cultivables (VNC, dormance)
Quelles sont les types de mesures de la croissance des microorganismes ?
Méthodes directes et indirectes
Quelles sont les mesures directes de la croissance des microorganismes ?
Décompte total (dépend de la taille) et décompte des unités viables
Comment se fait le décompte total de microorganismes (mesures directes) ?
Compteur de cellules Coulter et Cytomètre de flux (protistes, levures, cellules mammifères) + chambre de comptage observée au microscope (hémocytomètre = levures et cellules mammifères, cellule de Petroff-Hausser = bactéries)
voir pwp
Quels sont les avantages et inconvénients du décompte total des microorganismes (méthode directe) ?
Avantage = facile à utiliser, rapide, peu coûteux, information morphologique et taille
Inconvénient : densité microbienne élevée (petit volume), décompte des cellules mortes et vivantes
Quels sont les avantages et inconvénients du décompte des unités viables (capable de se reproduire) (méthode directe) ?
Avantage = colonies proviennent des cellules vivantes capables de se reproduire
Inconvénient = amas de cellules c’est une colonie, il y a résultat significatif entre 30-300 colonies
Quelles sont les méthodes de décompte des unités viables ?
Méthode de dilutions en milieu liquide et d’étalement sur gélose, méthode des filtres de cellulose
Qu’est-ce que la méthode des filtres de cellulose ?
Échantillon est passé sur un filtre de cellulose dont la porosité retient les microorganismes, seules les cellules viables initiales, filtration plus rapide et plus simple que dilution
Quelles sont les méthodes indirectes de la mesure de la croissance des microorganismes ?
Mesure de l’activité + mesure de la masse cellulaire
En quoi consiste la mesure de l’Activité dans la mesure de la croissance des microorganismes (indirecte) ?
Mesure consommation de substrats, concentration des constituants cellulaires, excrétion de certains produits = évaluation de la concentration microbienne
En quoi consiste la mesure de la masse cellulaire dans la mesure de la croissance des microorganismes (indirecte) ?
Poids secs (récolte, lavage, pesée, valeurs en g/l ou cellules/ml (nécessite un décompte cellulaire avant récolte) + turbidité par la densité optique (D.O) = turbidimétrie
En quoi consiste la turbidimétrie ?
Évaluation de la concentration cellulaire à l’aide de sa densité optique (d.o) (absorption lumineuse) à une certaine longueur d’onde.
Vrai ou faux, la densité optique d’une suspension microbienne ne peut jamais être directement proportionnelle à sa concentration cellulaire ?
Faux, à une certaine limite, la D.O l’est
Vrai ou faux, pour évaluer la concentration microbienne d’une suspension inconnue, on doit probablement établir une courbe de référence des concentrations microbiennes connues à l’aide d’un spectrophotomètre ?
Vrai
Quelles sont les expressions mathématiques de la croissance bactérienne ?
Temps de génération ou doublement (g) + taux de croissance (k) + nombre de générations (n)
Expression mathématique de l’intervalle de temps entre deux divisions cellulaires successives (g= temps/nombre de génération) ?
Temps de génération ou doublement (g)
Expression mathématique exprimant le nombre de générations par unité de temps (inverse du temps de génération) (k= nombre de division/temps) ?
Taux de croissance (k)
Expression mathématique où n= (logNt-LogNo)/ log2, et où nt= nombre de cellules au temps t, et No= nombre initial de cellule de la population ?
Nombre de génération (n)
Quels sont les deux types de culture continue (ouvert) ?
Chémostat (apport constant de nutriments à la même vitesse que le milieu est éliminé) + turbidostat = vitesse de dilution déterminée par la densité
En quoi consiste la culture continue (ouvert) ?
Apport de nutriments (ajout en permanence), élimination des déchets, phase de croissance exponentielle plus longue, concentration constante de la biomasse