Transcripción Flashcards
burbuja de transcripción
lugar de sintesis de rna (40nt/s) que se mantiene dentro de la rna polimerasa que desenrrolla el dna (12-20pb)
sitio de iniciación:
primer par de bases que se transcribe (+90% purina)
transcrito primario:
-es el producto inmediato de la transcripcion
-extremos 5´-3´originales
-procariotas: de degrada rapidamente (rnam) o madura a rrna y trna
-eucariotas: se modifica en los extremos (mrna) o madura (todos los rna´s)
etapas de transcripcion:
-reconocimiento del molde
-iniciacion
-elongacion
-terminacion
reconocimiento del molde:
-union de la rna polimerasa al promotor
-separacion del duplex del dna
-formacion de la burbuja de transcripcion
iniciacion:
-sintesis de los primeros 9nt del rna
-se presentan intentos abortivos liberando pequeños rnas (-9nt)
-termina cuando la enzima abdona el promotor
elongacion:
-cadena de rna crece
-la burbuja de transcripcion se mueve
terminacion:
-reconocimiento del terminador (punto de adicion de la ultima base al RNA)
-la burbuja de transcripcion colapsa enseguida
en eubacterias una sola holoenzima:
sintetiza todo el mRNA, rRNA, tRNA
core o nucleo
alfa2betabeta’
no distingue entre promotores y otras secuencias, se una al dna debilmente
sigma
-se requiere para reconocer al promotor
-se libera al termino de la iniciacion, evitando que la enzima quede parada en el promotor
-libre no reconoce al dna evitando bloquear los promotores
fuerza del promotor
frecuencia de iniciacion (1s rRNA a 1/30min lac)
determinada en parte por la afinidad de la holoenzima hacia dicha secuencia
fragmentos de 60pb
son secuencias de consenso conservadas(esenciales)
secuencia de consenso -10
t80a95t95a60a50t96
procariotes: señal para el reconocimiento de la rna pol
eucariotes: para factores basales de la transcripcion recluten a la rna polimerasa, se una y complete la fase de iniciacion
35%
genes clase 2, no clase 1
casi ninguno de clase lll
secuencia consenso -35
t82t84g78a65c54a45
permite la conversion de la forma cerrada a abierta (duplex dna desnaturalizado) del complejo
rpoA
-2 subunidades alfa
-40kda cada una
-ensamblaje de la enzima reconocimiento del promotor une algunos activadores
rpoB
-subundad beta
-155kda
-centro catalitico
rpoC
-subunidad beta’
-160kda
-centro catalitico
rpoD
-subunidad sigma
-32-90kda
-especificidad del promotor
la mayoria de los sitios de union a la enzima estan corriente…
arriba de -10 en la misma cara de la cadena no molde (codificante)
terminadores intrinsecos
-no requieren factor externo
-requiere la formacion de un tallo burbuja
(hairpin) en el rna transcrito
-si el num de bases G-C y poli U es mayor de 9, la rna polimerasa hace una pause pero no termina la trnascripcion
-el hibrido rU-dA tiene un apareamiento mucho mas debil quue cualquier otro hibrido RNA-DNA
Rho
-factor auxiliar de la RNA polimerasa
-tiene actividad ATPasa dependiente y actividad helicasa que separa rna-dna
-interacciona con la subunidad beta de la rna polimerasa
-modelo del objetivo caliente
terminadores dependiente de la rho
-abundante en genoma fago
-requiere secuencia de 50 a 90 bases corriente arriba del terminador
ricas en C y pobres en G
ciclo de vida de la mrna procariota
-se traduce antes de terminar la transcripcion
-inestable (tiempo de vida 2mino-)
-se degrada 5’-3’
-500 bases aprox, 180kda
-mRNA aparece cada 2.5 min y la proteina 30s despues
tiempo de vida media de una mRNA en vertebrados
3hrs
rna polimerasa l
transcribe rRNAs (28s, 5.8s,18s)
nucleolo
rna polimerasa ll
transcribe mRNA, miRNA, snRNA, otros
nucleoplasma
rna polimerasa lll
transcribe tRNA,rRNA 5s, snRNA
nucleoplasma
CIS
en la secuencia
trans
reconoce al cis del dna
elementos de respuesta
reguladores en cis localizados en un promotor o enhacer; permiten que un gen responda a una factor de transcripcion necesario para el inicio de la transcripcion