Enzimas de restricción, ligasas y polimerasas

Question 1

cortan o degradan los ácidos nucleicos hidrolizando el enlace fosfodiester de nucleótidos contiguos

Answer 1

nucleasas

Question 2

exonucleasas actuan

Answer 2

en los extremos 5’ 3’

Question 3

endonucleasas actuan

Answer 3

sobre los enlaces internos

Question 4

unen moleculas de dna

Answer 4

ligasas

Question 5

sintetizan acidos nucleicos

Answer 5

polimerasas

Question 6

-endodeoxirribonucleasas
-tienen la capacdad de cortar DNA doble cadena en una secuencia especifica
-warner arber, hamilton smith y daniel nathans en 1978
-en la actualidad se conocen miles de ellas con mas de 100 diferentes sitios de reconocimiento

Answer 6

endonucleasas de restricción

Question 7

sistema de defensa bacteriana contra patogenos, protegiendolas del ataque de DNA foraneo (ej bacteriofago)

Answer 7

-restricción
-metilación
-ambas cadenas reconocen la misma secuencia de bases

Question 8

endonucleasa que corta dna doble cadena rompiendo uniones fosfodiester dentro o fuera de la secuencia de reconocimiento

Answer 8

restricción

Question 9

metilasa que modifica al dna por metilacion en una base determinada siempre dentro de la secuencia de reconocimiento

Answer 9

metilación

Question 10

la metilacion de las 2 hebras del dna evita que la …

Answer 10

enzima de restriccion pueda cortar la molecula de DNA

Question 11

la__________protege el dna genomico y plasmidico bacteriano del ataque de sus propias enzimas

Answer 11

metilación

Question 12

si ambas cadenas estan metiladas

Answer 12

no hay ni metilacion ni restricción

Question 13

si solo una cadena esta metilada

Answer 13

hay metilación y no restricción

Question 14

si ninguna cadena esta metilada

Answer 14

no hay metilacion, si restriccion

Question 15

el sistema de restricción modificación sirve como:

Answer 15

sistema inmune

Question 16

bacteria EcoRI+ (met)
Hindlll-

Answer 16

hay lisis bacteriana

Question 17

bacteria EcoRl - Hindlll+

Answer 17

no hay lisis bacteriana

Question 18

bacteria EcoRl+ Hindlll- (met)

Answer 18

no hay lisis bacteriana

Question 19

digestion con enzimas de restricción puede producir 2 tipos de cortes:

Answer 19

-extremos cohesivos o pegajosos
-extremos abruptos(romo)

Question 19

-corte de manera escalonada en dos puntos diferentes, pueden ser unidos (ligados) nuevamente.
-si provienen de la digestion de 2 secuencias diferentes (ya sea con la misma enzima o con enzimas con extremos compatibles) se generara una nueva secuencia final (dna recombinante

Answer 19

extremos cohesivos o pegajosos

Question 19

-corte en un solo punto en ambas cadenas

Answer 19

extremos abruptos (romo)

Question 20

son distintas enzimas de restricción que reconocen la misma secuencia, con distintas especificidades

Answer 20

isoesquizomeros

Question 21

enzimas de restriccion que reconocen distintas secuencias pero dejan los mismos extremos
BamHl
Bglll

Answer 21

enzimas con extremos compatibles

Question 22

mapa de restricción

Answer 22

-muestra en una secuencia de bases todos los posibles sitios de corte para las enzimas de restricción conocidas
-se emplean programas informativos para obtenerlo
-nos permite seleccionar la enzima adecuada para editar la secuencia original y al final obtener la secuencia deseada

Question 22

-los sitios de reconocimiento de enzimas de restricción pueden verse alterados por variación en la secuencia del dna
-esta variación se secuencia es inherente en regiones polimorficas (varian entre individuos y sirven como marcador genetico) o puede deberse a mutacion

Answer 22

variación de los patrones de corte

Question 23

RFLPs es

Answer 23

polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción

Question 24

segmentos de dna doble cadena producidos por la accion de una endonucleasa de restricción sobre un DNA mas largo

Answer 24

fragmentos de restricción

Question 25

procedimiento de RFLPs

Answer 25

-extracción de DNA de diferentes individuos
-amplificacion por PCR de la secuencia polimorfica y/o potencialmente mutante
-digestion empleando varias enzimas de restricción por separado y/o diferentes juegos de enzimas
-separación e identificación del numero de fragmentos y sus distintas longitudes (tamaños) por electroforesis en gel agarosa
-interpretación

Question 26

RFLPs en rasgos fenotipicos recesivos:

Answer 26

un sitio de restricción (marcador genetico) puede estar geneticamente ligado a una mutación que lo produce

Question 27

los fragmetos de restriccion del hijo estan presentes en los fragmentos de restricción de:

Answer 27

la madre y del padre

Question 28

-es una enzima que tiene como fx corregir las discotinuidades en la hebra de DNA generadas en la replicacion (cadena retrasada), reparación de errores en la replicación o bien daño al dna
-su papel en la biologia molecular es catalizar la union de fragmentos distintos de dna, tanto si poseen extremos romos o cohesivos, obteniendose el correspondiente dna recombinante
-forma enlaces covalentes entre el extremos 5’-fosfato de una cadena polinucleotidica y el extremo 3’-oh de otra cadena polinucleotidica

Answer 28

ligasa

Question 29

en una ligasa un enlace fosfodiester es formado a

Answer 29

expensas de otro

Question 30

la ligación a extremos cohesivos requiere:

Answer 30

complementariedad de secuencia

Question 31

la ligación de extremos romos no requiere

Answer 31

de secuencias complementarias

Question 32

2 extremos romos cualquiera pueden ser unidos por

Answer 32

la dna ligasa

Question 33

la eficiencia de ligación de extremos cohesivos es _______ que la de extremos romos

Answer 33

mayor

Question 34

-requeridas para los ciclos repetidos de desnaturalización (calentamiento) y polimerización del DNA
-provienen de organismos cuyas enzimas son resistentes a las altas temperaturas

Answer 34

dna polimerasas termpoestables