6. Microscopia Especular. Microscopia Confocal Flashcards
Microscopia Especular - Qual é o principio óptico da Microscopia Especular?
- Luz que incide na superficie corneana POSTERIOR é reflectida em 0,22% devido à interface córnea-posterior com humor aquoso
- É esta luz reflectiva que vai ser captada pelo aparelho e usada para avaliação
Microscopia Especular - Quais são as diferenças entre a Microscopia Especular de contacto e de não contacto? Como abordam o problema da reflexão da superfície anterior da córnea?
Contacto:
- Aplanam a córnea, de forma a eliminar a reflexão da superficie ANTERIOR
- Permitem amplicação da imagem
- Mais tempo de exame
- Mais desconforto
Não contacto:
- Focagem e centrada automáticas
- Reflexo da superficie corneana anterior é eliminado através do aumento do ângulo de incidência
- Não necessitam de anestesia tópica
Microscopia Especular - Que características do Endotélio avaliam?
Avaliação quantitativa e qualitativa de
- Tamanho celular
- Forma celular
- Densidade celular
- Distribuição celular
Microscopia Especular - Que métodos de análise morfológica podem ser usados?
Método de comparação - compara com forma geométrica exacta em favo de mel
Método de Moldura - Conta numero de células dentro de uma área definida, contando as que saem parcialmente
Método do contorno - Determina área das células pela localização das intercepções dos bordos celulares
Método do ponto central - Determina a área de células contiguas pela localização do seu centro
Microscopia Especular - Quais são os graus de qualidade de imagem?
- Excelente - Toda a imagem pode ser avaliada, células facilmente identificadas
- Boa - > 75% da imagem pode ser avaliada
- Razoável > 50% da imagem pode ser avaliada
- Má 25% da imagem pode ser avaliada
- Não classificável < 25% da imagem com MÁ definição celular
Microscopia Especular - Que factores podem limitar a realização do exame?
- Alteração do filme lacrimal / superfície ocular
- Haze
- Cicatriz Estromal
- Edema de Córnea
- Lesão da Descemet
- Doente não colaborante
- Nistagmus
- Ptose marcada
(Opacidades ou incapacidades de fixar)
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Microscopia Especular - Porque é que as células do endotélio são hexagonais?
- É a forma GEOMÉTRICA e TERMODINAMICA mais eficiente
- Permite aumentar a área de superficie celular relativamente ao seu perímetro
Microscopia Especular - Qual é o mínimo de células hexagonais para se considerar o exame normal? A partir de que número se considera que há Pleomorfismo?
- 60% é o limite do normal
- < 50% considera-se que há Pleomorfismo
Microscopia Especular - Qual é o coeficiente de variação de tamanho celular normal? A partir de que valor se considera que há Polimegatismo?
- Normal < 30
- Polimegatismo > 40
Microscopia Especular - O que é cada um dos parâmetros do output?
Num - Número de células avaliadas
CD - Densidade celular, com número de células/mm2
AVG Area - Área celular média
SD - Desvio padrão do TAMANHO celular
CV - Coeficiente de variação do TAMANHO celular
- Normal < 30
- Polimegatismo > 40
Max - Tamanho células máximo detectado
Min - Tamanho celular mínimo detectado
Hex / 6A - % de células hexagonais
- Normal < 60
- Pleomorfismo < 50
- Atenção ao facto de nem para o tamanho nem para a forma, o cut-off do normal corresponde ao cut-off a partir do qual começamos a chamar a patologia
Microscopia Especular - De forma geral, qual é o mínimo aceitável para fazer cirurgia intraocular sem risco de descompensação corneana?
1200-1500
Microscopia Especular - Risco de descompensação corneana começa a ser iminente a partir de que contagens?
< 700
Microscopia Especular - Indicações principais?
- Avaliar a reserva funcional endotelial antes de qualquer cirurgia intraocular
- Avaliar a reserva funcional endotelial após cirurgia intraocular
- Avaliação de córneas em contexto peri-transplante (viabilidade e elegibilidade)
- Avaliação do endotélio em patologia endotelial (distrofias corneanas)
Microscopia Especular - Quais são as principais Endoteliopatias Primárias? (5)
- Cornea Guttata
- Distrofia de Fuchs
- Distrofia Endotelial Polimorfica posterior
- CHED
- S. ICE
Microscopia Especular - Quais são as principais Endoteliopatias Secundárias? (6)
- Queratite bolhosa pseudofáquica
- Endoteliopatia por LC
- Endoteliopatia por pseudoexfoliação
- Endoteliopiatia por inflamação ocular
- Endoteliopiatia por fórceps
- Endoteliopiatia induzida por fármacos
Microscopia Especular - Como se Classifica a Cornea Guttata em estadios? (5 estadios)
Estadio 1
- Estrutura nodular, pequena e escura no centro da célula endotelial
Estadio 2
- Presença de vacúolos do MESMO tamamho que células endoteliai
- Células circundantes alongadas
Estadio 3
- Nódulos múltiplos e de tamanho SUPERIOR às células endoteliais
- Dificuldade em delimitar células adjacentes
Estadio 4
- Nódulos coalescem e tem maiores dimensões
- Células endoteliais ente vacúolos com aspecto anómalo
Estadio 5
- Coalescencia contínua de vacúolos
- Mosaico celular difícil de observar
*Baseada no tamanho das células relativamente ao tamanho das Guttatas
Microscopia Especular - Qual é o padrão dos S. ICE na Microscopia especular?
Padrão “negativo” de um endotélio normal, com células de BORDOS claros e CENTRO escuro :O !!
Microscopia Confocal - Qual é o princípio óptico?
- 1 ponto único do tecido é iluminado por um ponto de luz (pode ser luz convencional ou LASER) e uma imagem é capturada simultaneamente por uma câmara nesse mesmo ponto de focagem
- Repetido n vezes originando uma imagem com elevada resolução
- Leva a definições tao altas que é possível distinguir constituintes celulares - análise in vivo de um tecido
Microscopia Confocal - Qual é o aspecto das células do epitélio? E o tamanho das células em cada camada?
1ª camada celular - Células Superficiais
- Células com 40-50 μm
- Nucleos Brilhantes com citoplasma escuro
Bordos bem definidos
2ª camada celular - Células Alares
- Células com 30-45 μm
- Formato e diametro mais variáveis
- Bordos brilhantes, citoplasma escuro, nucleos de DIFICIL visualização
3ª camada celular - Células Basais
- Células com 10-15 μm (as mais pequenas do epitélio)
- Bordos brilhantes com citoplasma escuro e núcleos de mais dificil visualização
- No epitélio, quanto mais fundo, mais pequenas as células e mais dificil visualização dos núcleos
Microscopia Confocal - Qual é o aspecto da M Bowman? O que é que se vê bem nesta camada?
- Situada imediatamente posterior à camada basal epitelial
- Espessura de 10 μm
- SEM células
- Vê-se bem plexo nervoso
(Espessura igual à da Descemet no adulto)
Microscopia Confocal - Qual é o aspecto do Estroma? Como são os queratócitos? Forma e tamanho?
Estroma
Queratóritos
- Diametro de 5-30 μm
- Forma de feijão no estroma anterior
- Forma oval no estroma posterior (menos aplanados)
- Células dispostas mais anarquicamente, não justapostas
Fibras nervosas de 4-8 μm diâmetro, sem padrão definido
Microscopia Confocal - Qual é o aspecto do endotélio? Qual é o tamanho das células? O que é que as células têm de particularidade
Endotélio
- Camada celular única de espessura de 4-6 μm
- Células hexagonais com 20 μm de diâmetro
- Nucleos NÃO identificáveis. Corpo celular homogénio e brilhante. Bordos bem definidos
Microscopia Confocal - Qual é o aspecto das células epiteliais da conjuntiva?
- Pequenas, hiperreflectivas
Microscopia Confocal - Qual é o aspecto das células da zona juncional do limbo?
- Reflectividade homogenia
(as da conjuntiva tem hiperreflectividade)
Microscopia Confocal - Qual é o aspecto das células da paliçada de Vogt?
- Extensão trabecular
- Vasos sanguíneos na base
- Células em diferenciação
Microscopia Confocal - Quais são as aplicações clinicas relevantes segundo AAO? (4)
- Estudo de queratite infecciosas - sobretudo fungos e parasitas
- Estudo de Distrofias e Depositos corneanos
- Avaliação do processo de cicatrização pos-cirurgia
- Avaliação de processos inflamatórios e tóxicos - tumores, insuficiencia limbica e toxicidade medicamentosa
Microscopia Confocal - Qual é o papel nas Queratites Infecciosas?
- Permite aumentar sensibilidade diagnóstica em relação à identificação do agente, sobretudo FUNGOS e PARASITAS (Acantamoeba)
Microscopia Confocal - Qual é o aspecto dos fungos filamentosos? Como se podem diferenciar das terminações nervosas?
- Filamentos ramificados e hiperreflectivos nas diversas camadas corneanas
- Ramificações com traçados anárquicos e diametro elevado
- Podem-se confundir com as terminações nervosas, mas fungos tem padrão menos ordenado e mais aleatorio
Microscopia Confocal - Qual é o aspecto da Acantamoeba? Trofozoito e quisto?
Trofozoito
- Diametro de 20-45 μm
- Hiperreflectividade central com hiporreflectividade periférica
Quisto
- Diametro de 20-45 μm
- Sinal de dupla parede: Ectoquisto / Endoquisto
- Alta hiperreflectividade
- Forma esférica ou ovoide
Microscopia Confocal - Quais são as principais distrofias corneanas que permite identificar? (2) Como é o padrão?
- Distrofia da Membrana Epitelial Basal - estrias ou aneis hiperreflectivos associados a ilhas de pontos hiperreflectivos junto ao material amorfo
- Distrofia de Meesman - Pequenos quistos esféricos no epitélio com conteúdo altamente hiperreflectivo
Microscopia Confocal - Quais são as principais toxicidades medicamentosas que permite identificar? Como é o padrão?
Amiodarona
- Inclusoes celulares hiperreflectivas brilhantes
- Micropontos hiperreflectivos
Cloroquina
- Reflectividade inversa nas células epiteliais basais
- Aspecto reticulado da membrana epitelial basal
