DAT och hemolys Flashcards
1
Q
Antiglobulinteknik:
- definition
- princip
A
- Definition: Agglutination mellan erytrocyter(ag) och erytrocytantikroppar(ak) sker efter tillsats av en sekundärantikropp dvs. antihumanglobulin (AHG).
- Princip: Antikroppar av IgG-typ sensibiliserar erytrocyter. Agglutination uteblir initialt men kan åstadkommas efter tillsats av AHG. AHG reagerar med antikropparna/komplementfaktorer som bundit till erytrocytytanoch kopplar därigenom ihop erytrocyterna
2
Q
Antiglobulintest förekommer i två varianter vilka?
A
- Direkt antiglobulintest (DAT)
- Indirekt antiglobulin test (IAT)
3
Q
DAT-direkt antiglobulin test, hur fungerar det?
A
- Erytrocytersom är mantlade in vivoav antikroppar och/eller komplementfaktorer
- Påvisas genom att tillsätta antihumanglobulin (AHG) som ger agglutination
4
Q
IAT- indirekt antiglobulintest, hur fungerar den?
A
- Patientplasmainkuberasmed testerytrocyter(sensibilisering)
- AHG tillsätts, och om agglutination uppstår indikerar det att det finns erytrocytantikroppari patientens plasma
- Används för förenlighetsprövning innan transfusion
5
Q
DAT – IgG, C3d
- vad finns det för reagens?
- Vilka komponenter riktar sig AHG MOT?
A
- Polyspecifik DAT – AHG (antihumanglobulin) kallas reagens innehållande antikroppar riktade mot humana gammaglobuliner (IgG) och komplementfaktorer (C3d)
- Monospecifik DAT - AHG innehåller antikroppar riktade mot endast en komponent, vanligen IgGeller C3d.
- Utvidgat monospecifik DAT – specifika antikroppar mot IgG, IgM, IgA, C3d eller C3c
6
Q
När är DAT positivt?
A
- Autoimmun hemolytiskanemi (autoantikroppar)
- Transfusionskomplikation (alloantikroppar som sitter på transfunderade erytrocyter)
- Immunisering hos foster/nyfödda (antikroppar är passivt överförda från mamman och fäster på barnets erytrocyter)
- Kan vara normaltillstånd hos friska
7
Q
Vad är hemolys?
A
= sönderfall av erytrocyter
- Minskad livslängd av erytrocyterpgadestruktion (normal livslängd 120 dagar)
- Medfödd– defekt i erytrocyten
- Förvärvad– yttre påverkan av erytrocyten
8
Q
Vad innebär en medfödd hemolys?
A
- Defekt i erytrocyten
- membrandefekt, tex hereditär sfärocytos
- enzymdefekt, tex glukos-6-fosfat dehydrogenasbrist(G6PD)
- hemoglobinopatiermedelhavsländer, tex sickle-cell anemi, thalassemi
9
Q
Vad innebär förvärvad hemolys?
A
- Yttre påverkan av erytrocyten
- immunbetingad, tex autoimmun hemolytiskanemi
- ej immunbetingad, tex mekanisk hemolys
10
Q
Diagnostik av hemolys?
A
11
Q
Vad är Autoimmun hemolytiskanemi (AIHA)?
A
- Autoantikroppar som är riktade mot antigen på egna erytrocyterger en ökad destruktion av dessa
- Antikroppar riktade mot något som bundit till individens egna erytrocyter
- Incidens 1/100 000
12
Q
Vad är Autoimmun hemolytiskanemi (AIHA)
- finns två typer vilka?
A
- AIHA av varm typ-70%
- AIHA av kall typ - 30%
- Läkemedelsinducerad immunhemolytiskanem
13
Q
Förklara AIHA av den varma typen?
A
- Primär 30%
- Sekundär 70%
- lymfom, KLL
- autoimmuna sjukdomar, tex SLE
- > Utredning för att ta reda på om patienten har enbart autoantikroppar eller även alloantikroppar som kan döljas av autoantikroppar. Viktigt vid transfusion!
- Positiv DAT : IgGeller IgG+ C3d
- Autoantikropparna oftast riktade mot epitoperi Rhsystemet
14
Q
Symptom AIHA av varm typ?
A
- Ofta kronisk, kommer i skov
- Anemisymptom: trötthet, andfåddhet, blekhet, yrsel
- Ikterus
- Mörk urin
- Splenomegali
- Subfebrilitet – feber
15
Q
Behandling av AIHA av varm typ?
A
- Utred möjlig bakomliggande orsak!
- Kortison
- (Folat)
- Splenektomi
- B-cellshämmare (Rituximab)
- Blodtransfusion
16
Q
Det finns AIHA av kall typ, hur delar man in den?
A
- > Cold agglutinin disease(CAD)
- > Paroxysmal köld hemoglobinuri(PCH)
17
Q
Vad är Cold agglutinin disease?
A
- Positiv DAT - C3d (orsakas av IgM)
- Autoantikropparna (IgM) är riktade mot I/i-antigenet
- Främst extravasal hemolys, men även intravasal hemolyskan ske
18
Q
Man delar in CAD i akut och kronisk, förklara dessa?
A
- Akut – ofta sekundärt till infektioner (mykoplasma, mononukleos/EBV) kan vara intravasal hemolys
- Kronisk – drabbar ofta äldre, associerat till lymfom, KLL eller Waldenströms makroglobulinemi, extravasal hemolys
19
Q
Mekanism Cold agglutinin disease
A
- IgM aktiverar komplement, men vid temp över 30 grader lossnar IgM och komplement aktiveringen avstannar vid C3d.
- Komplementmantlade (C3b) erytrocyter sorteras bort i levern med extravasal hemolys som följd.
- Även intravasal hemolys kan ske
20
Q
Vad för symptom uppkommer vid CAD?
A
- Stillsamt – måttligt förlopp
- Anemisymptom
- Acrocyanosvid köldexponering
21
Q
Behandling vid CAD?
A
- Undvik nedkylning
- B-cellshämmare (Rituximab)
- CytostatikaPlasmaferes
- Den akuta formen som är sekundär till infektioner är själv övergående inom några veckor.
22
Q
Vad är Paroxysmal köld hemoglobinuri?
- vanligt?
- IgG är riktat mot något?
- har barn det?
- när uppkommer symptom?
A
- Ovanligt, 2-5 % av alla AIHA
- IgG riktat mot P-antigenet på erytrocyterna
- Vanligast hos barn
- Efter övre luftvägsinfektioner
- Symptom kommer minuter-timmar efter köldexponering
- Värk i rygg eller ben, magkramp, huvudvärk, frossa, feber
- Hemoglobinurises kort efter symptomstart och pågår några timmar
23
Q
Läkemedelsinducerad hemolys, när uppkommer detta?
- är det vanligt?
A
- Ovanligt, incidens 1/1000 000
- Antikropparna syns inte när plasma sätts mot vanliga testerytrocyter
oAbsorption- läkemedlet absorberas till cellytan och antikroppar riktade mot läkemedlet fäster(Penicillin)
oMembranmodifiering pga läkemedlet vilket gör att antikroppar ospecifikt binds in till cellytan (Cefalosporiner)
- Bildandet av autoantikroppar - läkemedlet ger upphov till autoantikroppar (Methyldopa, NSAID) - kan synas i test
24
Q
När är DAT positivt?
A
- Autoimmun hemolytiskanemi (autoantikroppar)
- Transfusionsreaktion(alloantikroppar som sitter på transfunderade erytrocyter)
- Immunisering hos foster/nyfödda (antikroppar är passivt överförda från mamman och fäster på barnets erytrocyter)
- Kan vara normaltillstånd hos friska
25
När sker Transfusionskomplikation (alloantikroppar) ?
- Patienten har tidigare bildat antikroppar som reagerar med transfunderade erytrocyter
- Fördröjd hemolys: feber, anemi, ikterus≥ 24h eftertransfusion; +DAT(transfunderade erytrocyter) – oftast anti-Jk, -Fy
26
Immunisering hos foster/nyfödda HemolyticDiseaseofthe Fetus/Newborn(HDFN)
- Mammans antikroppar (IgG) passerar placenta och bryter ner fostrets erytrocyter
- Under graviditeten kontrolleras förekomst av erytrocytantikropparhos mamman.
- Vanligaste orsaken är antikroppar mot RhD.
27
DAT positivitet utan kliniska tecken på hemolys, hur då?
- För ”lite” mantlat på cellytan för destruktion. 500-1000 IgG molekyler/cell krävs i normalfallet (test sensitivitet: ≈100 IgG-molekyler/cell)
- Antikropparna som mantlats kan ej initiera fagocytostrots många (IgG4)
- Sjukdomar som ger en polyklonalhypergammaglobulinemimed passiv absorbtionav gammaglobuliner på erytrocytytan
28
Kliniska tecken på hemolysutan positiv DAT, när?
- Erytrocyterna har redan hemolyserats
- Erytrocyt bundet IgGi mindre mängd (under cutoff)
- Annan orsak till hemolys
29
Hur går celldestruktionen till?
- Extravasal hemolysMakrofager i mjälten och levern fagocyterar erytrocytermantlade med antikroppar (ffaIgG1 och IgG3)
- Intravasal hemolysHemolysav erytrocytervia komplementaktivering (MAC-komplexet)
30
Patientfall 1
kommer in en man tidigare frisk man misstänker DAT tar prover.
Analyssvar:
- Plasman är brun och seg
- DAT är starkt positiv C3d och IgM
- Även kontrollen är positiv (hans egna erytrocyteri AB-plasma) pgaspontanagglutination, mycket IgMpå erytrocyterna
- Plasman innehåller ett starkt köldagglutinin (IgM) mot I-antigenet. Navelsträngsblodkroppar neg.
- Återkoppling till VC, mannen har gått hem
- Mår relativt bra, Hb 100
- Efter 3 månader upptäcks ett lymfom som orsak till AIHA av köldtyp
- år behandling med Rituximab(anti B-cellsbeh
- Marmoreringen försvinner efter ett tag, berodde på små agglutinati blodkärlen
31
Patientfall 2
- barn som blir gult andra dagen på BB
- man utför DAT prover och blodgruppering resulterar i följande;
- \> Barnet A RhD+ och DAT positiv IgG
- \> Begär prov på modern
- \> Mor 0 RhD+, neg antikroppsscreen
- \> ABO-immunisering konstateras
- \> Överföring av anti-A via placenta till barnet som är blodgrupp A
- \> Förhöjd bilirubinhalthos barnet
- \> Ljusbehandling av barnet: S-bilirubinhaltensänks genom att omvandla okonjugeratbilirubintill vattenlöslig och icke neurotoxisk form (bilirubinisomerer) så att det kan utsöndras (via galla, avföring och urin)utan konjugering i levern.
