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Biología molecular > Métodos de transferencia de material genético > Flashcards

Métodos de transferencia de material genético Flashcards

1
Q

Métodos de transferencia de material genético en bacterias:

A
  • Conjugación
  • Transducción
  • Transformación
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Q

Al sembrar juntas dos cepas auxótrofas K12 de E. coli se aislaban colonias protótrofas

A

Lederberg y Tatum, 1946

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Q

Conjugación plásmidos

A

DNA extracromosómico

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3
Q

Es el proceso de transferencia horizontal de material genético entre una célula bacteriana donadora y una receptora mediante contacto directo o una conexión que las una

A

Conjugación

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Q

Proceso mediante el cual el DNA es transferido de una bacteria a otra mediante un bacteriófago

A

Transducción

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4
Q

Tipos de transducción:

A
  • Generalizada
  • Especializada
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5
Q

Partícula fágica transductora

A

Pseudovirión

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6
Q

Transferencia de cualquier región del genoma bacteriano

A

Transducción generalizada

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7
Q

Transferencia de loci adyacentes al sitio de integración del profago

A

Transducción especializada

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8
Q

Transducción también se utiliza para designar el proceso mediante el cual ADN exógeno es introducido a una célula mediante vector viral. V/F

A

Verdadero

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9
Q

Un bacteriófago infecta a una bacteria y puede integrarse en el genoma bacteriano, manteniendo…

A

el ciclo lisogénico antes de activar el ciclo lítico

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10
Q

El ADN puede integrarse al genoma de la bacteria por:

A

recombinación en un sitio especifico (homología de secuencia)

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11
Q

Variación hereditaria de una célula bacteriana susceptible originada por la captación de ADN desnudo libre en el medio, con la posterior integración del ADN exógeno en el genoma celular

A

Transformación

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12
Q

Célula que ha sido transformada

A

Transformante

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13
Q

Principio de transformación

A

Griffith 1928

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14
Q

Una bacteria muerta se degrada y libera fragmento de ADN al entorno. Otra bacteria puede captar ese ADN

A

Transformación

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15
Q

Estado fisiológico característico limitado en el tiempo que permite captar ADN del medio exterior, influido por factores ambientales

A

Competencia

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16
Q

La competencia es variable en cada especie capaz de experimentar transformación. V/F

A

Verdadero

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17
Q

Codificada en el genoma o lograda de forma artificial

A

Competencia

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18
Q

Tipos de transformación:

A
  • Natural
  • Artificial
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19
Q

En algunas especies de bacterias, que cuentan con la maquinaria específica para llevar el ADN a través de la membrana.

A

Transformación natural

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20
Q

Donde se codifica la transformación natural?

A

En los genes celulares

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21
Q

No está codificada en los genes celulares, es inducida por procedimientos en donde las células son convertidas en permeables a través de condiciones que normalmente no ocurren en la naturaleza

A

Transformación artificial

22
Q

Las técnicas de transformación artificial se basan en tratamientos químicos o físicos que producen microporos en la célula, lo que permite…

A

la introducción de DNA exógeno de modo eficiente

23
Q

Técnicas de transformación artificial

A
  • Química
  • Microinyección
  • Lipofección
  • Electroporación
  • Vectores vírales
  • Biobalística
24
Q

Las células se incuban en hielo con el DNA exógeno en presencia de cationes divalente como Ca2+, lo cuál prepara las membranas para hacerlas permeables al DNA exógeno

A

Transformación artificial química

25
Q

Qué causa que el ADN entre en la célula en la transformación a. química?

A

la incubación de las células a 42 ºC por 30 seg (shock térmico)

26
Q

Se realiza bajo el microscopio empleando micro agujas y micromanipuladores

A

Microinyección

27
Q

El DNA se encapsula en liposomas, las cuales se fusionan enseguida con la membrana celular

A

Lipofección

28
Q

Aumenta la permeabilidad de la membrana celular mediante aplicación de un campo eléctrico, forma poros

A

Electroporación

29
Q

Una exposición excesiva a campos eléctricos en la electroporación ¿qué provoca?

A

puede causar muerte celular

30
Q

Aprovecha la capacidad natural que tienen los virus de ingresar su información genética a la célula blanco. Pueden obstaculizar la replicacion del virus

A

Vectores virales

31
Q

La selección del virus para un vector viral se hace en base a:

A

su estructura, se fabrican conteniendo la información genética de interés

32
Q

Pequeñas partículas de oro o tungsteno cubiertas de ADN se disparan a las células

A

Biobalística

33
Q

Como es la eficiencia de transformación en la biobalística?

A

Baja, pero la mayoría de plantas pueden ser transformadas por este método

34
Q

Para que queremos incorporar DNA exógeno en una célula?

A
  • Clonación in vivo
  • Producir y purificar proteínas
  • Estudiar la expresión
  • Estudiar la carencia de proteínas
  • Crear OGM
  • Terapia génica
35
Q

Procesos que pueden usarse para producir copias genéticamente idénticas e un ente biológico

A

Clonación

36
Q

Tipos de clonación

A
  • DNA
  • Proteína
37
Q

Tipos de clonación de DNA:

A
  • In vitro acelular (PCR)
  • In vivo celular
38
Q

Amplificación de moléculas de ácido nucleico mediante su introducción, asistida por vectores, en células en cultivo

A

Clonación de DNA in vivo

39
Q

Tipos de clonación de proteínas:

A
  • Sistemas de traducción in vitro
  • In vivo celular
40
Q

Producción de proteínas mediante la introducción asistida por vectores, en células en cultivo, de la información genética requerida para la síntesis de dicha proteína

A

Clonación de proteínas in vivo

41
Q

El vector tiene como misión unirse con el fragmento de DNA llamado _______

A

Inserto

42
Q

Los vectores son elementos genéticos con capacidad autoreplicante. V/F

A

Verdadero

43
Q

De qué puede ser el inserto?

A

ADN genómico, cADN, producto de la retrotranscripción del ARN, producto de PCR

44
Q

Aspectos importantes a considerar al seleccionar un vector:

A
  • Tamaño máximo del inserto que admiten
  • Tipo de célula anfitriona
  • Plásmidos (compuestos terapéuticos)
  • Virus (eucariotas)
45
Q

Clasificación de vectores:

A
  • de clonación
  • de expresión
46
Q

Su finalidad es almacenar secuencias y permitir la obtención de grandes cantidades del inserto

A

Vector de clonación

47
Q
  • Capacidad de expresar DNA recombinante
  • Su objetivo es producir un transcrito (RNA) o la proteína de ese transcrito
A

Vector de expresión

48
Q

Ejemplo de vector de clonación

A

pBR322

49
Q

Vector de expresión, ejemplo

A

pCMVTnT

50
Q

Procedimiento general

A
  1. Preparación del inserto
  2. Preparación del vector
  3. Preparación de la construcción
  4. Transformación
  5. Selección de transformante
  6. Propagación de transformantes
  7. Purificación de vectores o de proteínas recombinantes
51
Q

El DNA se corta con las enzimas de restricción adecuadas

A

Preparación del inserto

52
Q

El policonector o sitio múltiple de clonación permite emplear cualquier combinación de enzimas de restricción

A

Preparación del vector

53
Q

Unión covalente in vitro del inserto de DNA al vector cortado, empleando una ligasa

A

Preparación de la construcción

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