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Biología molecular > Inmunotécnicas > Flashcards

Inmunotécnicas Flashcards

1
Q

Puede considerarse una inmunotécnica al emplearse un anticuerpo específico contra la proteína de unión al ácido nucleico

A

EMSA

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Q

Inmunotécnicas microscopía

A
  • Inmunohistoquímica
  • Inmunofluorescencia
  • Confocal de fluorescencia
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Q

Inmunotécnica al emplearse un anticuerpo específico contra la proteína de unión al ácido nucleico

A

Antígeno

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4
Q

¿Cuántos epítopes tiene un antígeno?

A

uno (al menos) o más epítopes

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Q

Región de la molécula del antígeno que es reconocida por el anticuerpo, formada por aminoácidos

A

Epítope

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6
Q

Es especifica de cada especie

A

Región constante (Fc)

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7
Q

Anticuerpo producido por un solo clon de linfocitos B

A

Anticuerpo monoclonal

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8
Q

Son una mezcla heterogénea de anticuerpos producidos por diferentes clones de células B

A

Anticuerpos policlonales

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9
Q

Es una herramienta para identificar y localizar antígenos (proteínas) en una muestra de tejido

A

Inmunohistoquímica

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10
Q

Anticuerpo primario específico para el antígeno que estamos tratando de identificar, acoplado a una enzima

A

Inmunohistoquímica método directo

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11
Q

Anticuerpo primario de una especie en contra del antígeno que estamos tratando de identificar

A

Inmunohistoquímica método indirecto

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12
Q

Anticuerpo secundario, contra la Fc la especie donde se obtuvo el anticuerpo primario, acoplado a una enzima

A

Método indirecto Inmunohistoquímica

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13
Q

Metodología de inmunohistoquímica:

A
  • Fijación
  • Cortes
  • Incubación con anticuerpos
  • Cromógeno para la enzima
  • Montaje
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14
Q

Inmoviliza las células y las preserva. Une
covalentemente las moléculas proteicas a sus vecinas

A

Fijación

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15
Q

Agentes utilizados para la fijación de las muestras:

A
  • Formaldehído
  • Glutaraldehído
  • Citrato pH 6
  • EDTA pH 9
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16
Q

Sistema de detección o visualización

A

Cromógeno para la enzima.

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17
Q

Indica replicación activa del virus de la hepatitis B en el hígado

A

HBcAg y HBsAg

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18
Q

Detectar específicamente algunas proteínas u otras moléculas en células y tejidos

A

Microscopio de fluorescencia

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19
Q

Molécula fluorescente

A

Fluorocromo

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20
Q

Parte del fluorocromo que absorbe la luz de una determinada longitud de onda y emite luz de otra longitud de onda más larga

A

Fluoróforo

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21
Q

Anticuerpo primario específico para el antígeno (Ag) que estamos tratando de identificar, acoplado a un fluorocromo (F)

A

Microscopio de fluorescencia: Método directo

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22
Q

Anticuerpo primario de una especie en contra del antígeno (Ag) que se está estudiando

A

Microscopio de fluorescencia: Método indirecto

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23
Q
  • Anticuerpo secundario acoplado a un fluorocromo (F)
A

Microscopio de fluorescencia: Método indirecto

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24
Q

En el método indirecto de la M. de fluorescencia el anticuerpo secundario reconoce específicamente la región constante (Fc) de la especie donde se obtuvo el anticuerpo primario. V/F

A

Verdadero

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25
Q

Superposición espacial entre dos etiquetas fluorescentes diferentes

A

Colocalización

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26
Q

Visualización de diferentes moléculas al mismo tiempo en una preparación

A

Contratinción

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27
Q

Deja pasar solamente la luz de cierta longitud de onda

A
  1. Filtro
28
Q

Refleja la luz de cierta longitud de onda y transmite la luz de otra longitud de onda mayor

A
  1. Espejo dicroico
29
Q

Deja pasar la señal fluorescente de cierta longitud de onda específica

A
  1. Filtro
30
Q

Identifica las regiones en proceso síntesis activa de DNA

A

BrdU (bromodesoxiuridina)

31
Q

Colocalizan en regiones de síntesis activa de DNA.

A

DNA polimerasa y PCNA

32
Q

Antígeno nuclear de células en proliferación (siglas)

A

PCNA

33
Q

Permite obtener una imagen de la arquitectura tridimensional de una célula o un tejido

A

Microscopio confocal de fluorescencia

34
Q

El microscopio confocal de fluorescencia utiliza métodos electrónicos que permiten:

A

enfocar un plano de una muestra eliminando la luz que proviene de las zonas fuera de foco superiores e inferiores a ese plano

35
Q

A partir de una serie de secciones ópticas obtenidas a diferentes profundidades, archivadas en un ordenador, resulta sencillo construir una imagen tridimensional. V/F

A

Verdadero

36
Q

En el proceso de obtención de secciones finas, se pierde información respecto a la tercera dimensión. V/F

A

Verdadero

37
Q

Se emplea en el recuento y clasificación de células según sus características morfológicas y presencia de biomarcadores

A

Citometría de flujo

38
Q

Características morfológicas:

A
  • Tamaño
  • Granularidad
39
Q

Marcados específicamente mediante anticuerpos acoplados a fluorocromos

A

Presencia de biomarcadores

40
Q

Mide la dispersión de la luz en un ángulo de 90 grados con respecto al láser y proporciona información sobre la complejidad celular

A

SSC

41
Q

Mide la dispersión de la luz en la misma dirección que el láser y proporciona información sobre el tamaño celular

A

FSC

42
Q

En el marcaje con fluorescencia se puede detectar cualquier molécula en la célula, siempre y cuando tengamos:

A

un anticuerpo específico para ella, acoplado a un fluorocromo

43
Q

En el marcaje con fluorescencia las células:

A
  • Pueden contarse.
  • Pueden ser separadas y recuperadas.
44
Q

En las poblaciones leucocitarias, la baja cantidad de eosinófilos y basófilos hace que en general no se defiendan en base a FSC y SSC, V/F

A

Verdadero

45
Q

Compuesto que atraviesa la membrana celular alterada en células muertas y las tiñe

A

Ioduro de propidio

46
Q

Las células vivas presentan fluorescencia en la pureza y viabilidad de poblaciones celulares. V/F

A

Falso, no presentan fluorescencia en ese canal

47
Q

¿Qué significa ELISA?

A

Enzyme-Linked InmunoSorbent Assay
“Ensayó de inmunoadsorción ligado a enzima”

48
Q

Permite evaluar a una proteína de manera cuantitativa

A

ELISA

49
Q

Ej. Detección de Ag en sangre u orina

A

ELISA: Directo

50
Q

Ej. Detección de Ag con un solo secundario acoplado a enzima-cambiando el primario- o detección de anticuerpos (HIV, SARS-CoV-2)

A

ELISA: Indirecto

51
Q

Ej. Detección de Ag, más sensible, el Ag se retiene en la placa mediante su unión específica al anticuerpo de captura y el segundo Ag es policlonal, se amplifica la señal VS directo e indirecto

A

ELISA: Tipo sándwich

52
Q

Etapas del Western Blot

A
  1. Electroforesis
  2. Transferencia
  3. Inmunodetección.
53
Q

Tipos de transferencia en el Western Blot

A
  • Electrotransferencia
  • Difusión simple o pasiva
54
Q

Permite la detección mediante un anticuerpo específico, de una proteína dentro de una muestra biológica

A

Western Blot

55
Q

Las isoformas son reconocidas por el mismo anticuerpo y tienen el mismo peso molecular. V/F

A

Falso, podrían ser reconocidas por el mismo anticuerpo, pero variarán en peso molecular.

56
Q

Estima el tamaño de la proteína

A

Corrimiento electroforético

57
Q

Variantes alelicas que generan distintas formas de la misma proteína, splicing alternativo o maduración diferencial

A

Isoformas

58
Q

Western Blot se utiliza para:

A
  • Estimar el tamaño de la proteína
  • Evidenciar isoformas
  • Comparar los niveles de proteína entre muestras
59
Q

Proteína blanco inalterada y se asume que conserva su función y localización normal.

A

Proteína de fusión con una etiqueta de epítopo

60
Q

Secuencia proteica corta que es reconocida fuertemente por un anticuerpo comercial bien caracterizado.

A

Etiqueta de epítopo

61
Q

La proteína de fusión con una etiqueta de epítopo se puede emplear para:

A
  • Inmunofluorescencia
  • Inmunoprecipitación
62
Q

En la inmunofluorescencia el anticuerpo está unido a:

A

un fluorocromo

63
Q

Permite identificar interacciones funcionales proteína-proteína con proteínas hasta ese momento desconocidas

A

Inmunoprecipitación

64
Q

En la inmunoprecipitación, el complejo proteico puede estar formado por varias proteínas. V/F

A

Verdadero

65
Q

Una variante de la inmunoprecipitación puede ser:

A

La purificación del complejo proteico por columna de afinidad

66
Q

En la purificación del complejo proteico por columna de afinidad, el anticuerpo es inmovilizado en la columna. V/F

A

Verdadero

Biología molecular (41 decks)

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