Enzimas de restricción, ligasas y polimerasas

Question 1

Enzimas de uso común en Biología Molecular:

Answer 1

• Nucleasas
• Ligasas
• Polimerasas

Question 2

Cortan o degradan los ácidos nucleicos hidrolizando el enlace fosfodiéster de nucleótidos contiguos

Answer 2

Nucleasas

Question 3

Nucleasas que actúan sobre los extremos 5´, 3´

Answer 3

Exonucleasas

Question 4

Nucleasas que actúan sobre enlaces internos

Answer 4

Endonucleasas

Question 5

Unen moléculas de DNA

Answer 5

Ligasas

Question 6

Sintetizan ácidos nucleicos

Answer 6

Polimerasas

Question 7

¿Las endonucleasas de restricción son endodeoxiribonucleasas?

Answer 7

Si

Question 8

Las endonucleasas tienen la capacidad de cortar DNA doble cadena en una secuencia específica, V/F

Answer 8

Verdadero

Question 9

Premio Nobel 1978

Answer 9

Werner Arber, Hamilton Smith y Daniel Nathan

Question 10

Sistema de defensa bacteriano contra patógenos, protegiéndolas del ataque de DNA foráneo

Answer 10

Sistema de Restricción-Modificación

Question 11

Endonucleasa que corta DNA doble cadena rompiendo uniones fosfodiéster dentro o fuera de la secuencia de reconocimiento

Answer 11

Restricción

Question 12

Metilasa que modifica al DNA por metilación en una base determinada siempre dentro de la secuencia de reconocimiento

Answer 12

Metilación

Question 13

En el sistema de Restricción-Modificación, ambas enzimas reconocen la misma secuencia de bases. V/F

Answer 13

Verdadero

Question 14

La metilación en las dos hebras del DNA evita que:

Answer 14

la Enzima de Restricción pueda cortar la molécula de DNA

Question 15

La metilación protege el DNA genómico y plasmídico bacteriano del ataque de sus propias enzimas. V/F

Answer 15

Verdadero

Question 16

Si ambas cadenas están metiladas….

Answer 16

No hay ni metilación ni restricción

Question 17

Si solo una cadena está metilada…

Answer 17

hay metilación y no restricción

Question 18

Si ninguna cadena está metilada…

Answer 18

no hay metilación, pero si restricción

Question 19

El sistema RM sirve como:

Answer 19

Sistema inmune

Question 20

La digestión con enzimas de restricción puede producir dos tipos de cortes:

Answer 20

• Extremos cohesivos o pegajosos
• Extremos abruptos (romo)

Question 21

Corte de manera escalonada en dos puntos diferentes. Pueden ser unidos nuevamente. Si provienen de la digestión de dos secuencias diferentes, se generará una nueva secuencia final

Answer 21

Extremos cohesivos o pegajosos

Question 22

Corte en un sólo punto en ambas cadenas:

Answer 22

Extremos abruptos

Question 23

Son distintas enzimas de restricción que reconocen la misma secuencia, con distintas especificidades de corte.

Answer 23

Isoesquizómeros

Question 24

Enzimas de restricción que reconocen distintas secuencias, pero dejan los mismos extremos

Answer 24

Enzimas con extremos compatibles

Question 25

Muestra en una secuencia de bases todos los posibles sitios de corte para las enzimas de restricción conocidas

Answer 25

Mapa de restricción

Question 26

Los mapas de restricción nos permiten:

Answer 26

seleccionar la enzima adecuada para editar la secuencia original y obtener la secuencia deseada.

Question 27

Los sitios de reconocimiento de enzimas de restricción pueden verse alterados por:

Answer 27

Variación en la secuencia del DNA

Question 28

Varían entre individuos y sirven como marcador genético

Answer 28

Regiones polimórficas

Question 29

Polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción

Answer 29

RFLPs

Question 30

Segmentos de DNA doble cadena producidos por la acción de una endonucleasa de restricción sobre un DNA más largo.

Answer 30

Fragmentos de restricción

Question 31

Procedimiento RFLPs

Answer 31

• Extracción de DNA
• Amplificación por PCR
• Digestión
• Electroforesis en agarosa
• Interpretación

Question 32

Sitio de restricción puede estar genéticamente ligado a una mutación que lo produce. V/F

Answer 32

Verdadero

Question 33

En las pruebas de paternidad los fragmentos de restricción del hijo están presentes solo en los fragmentos de restricción del padre. V/F

Answer 33

Falso, están presentes en los fragmentos de restricción de la madre y del padre

Question 34

Enzima que tiene como función corregir las discontinuidades en la hebra de DNA generadas en la replicación, reparación de errores en la replicación o bien daño al DNA

Answer 34

Ligasa

Question 35

El papel de la ligasa en la biología molecular es:

Answer 35

catalizar la unión de fragmentos distintos de DNA para obtener el correspondiente DNA recombinante

Question 36

Tipo de enlaces formados por la ligasa:

Answer 36

enlaces covalentes entre el extremo 5-fosfato de una cadena polinucleotídica y el extremo 3’-OH de otra

Question 37

La ligación de extremos cohesivos requiere complementariedad de secuencia. V/F

Answer 37

Verdadero

Question 38

La ligación de extremos romos no requiere de secuencias complementarias porque….

Answer 38

dos extremos romos cualquiera pueden ser unidos por la DNA ligasa.

Question 39

La eficiencia de ligación de extremos romos es mayor que la de extremos cohesivos. V/F

Answer 39

Falso, la ligación de extremos cohesivos es mayor

Question 40

Tipos de polimerasas:

Answer 40

• DNA pol RNA dependiente
• DNA pol DNA dependiente
• RNA pol DNA dependiente
• RNA pol RNA dependiente

Question 41

Requeridas para los ciclos repetidos de desnaturalización y polimerización del DNA

Answer 41

DNA polimerasas termoestables

Question 42

Las DNA polimerasas termoestables provienen de:

Answer 42

organismos cuyas enzimas son resistentes a las altas temperaturas

Question 43

Tipos de DNA polimerasas termoestables

Answer 43

• Taq
• Pfu
• Tli
• Tth
• Fragmento Klenow