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Biología molecular > Investigación en enfermedades causadas por virus > Flashcards

Investigación en enfermedades causadas por virus Flashcards

1
Q

El hecho de que una célula sea susceptible a la infección no garantiza que…

A

la replicación viral se lleve a cabo, así como tampoco que el individuo que se infecte sufra la enfermedad

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2
Q

El estudio de virus requiere poder cultivarlos a través de:

A

Inoculación de una preparación de viriones a hospederos vivos o a cultivos celulares permisibles adecuados

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3
Q

Cambios bioquímicos y moleculares, morfológicos y de viabilidad celular, visibles a microscopía óptica,

A

Efectos citopáticos

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4
Q

Efectos citopáticos:

A
  • Perdida de adherencia al sustrato e Inhibición por contacto
  • Redondeamiento celular
  • Agregación celular
  • Formación de sincitios
  • Cuerpos de inclusión
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5
Q

Las partículas virales son:

A

De gran tamaño con respecto a los componentes moleculares de la célula y más estables que las estructuras celulares

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6
Q

Tipos de centrifugación usadas para la purificación de virus:

A
  • Centrifugación diferencial
  • Centrifugación en gradiente de densidad
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7
Q

Las diferentes fracciones de virus se separan según sus tamaños y densidades relativas. Implica una serie de centrifugaciones a diferentes velocidades para separar los virus de otros componentes celulares y del medio de cultivo.

A

Centrifugación diferencial

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8
Q

Con este método, se crea un gradiente de densidad en equilibrio en el tubo de centrifugación. Se logra mediante el uso de cloruro de cesio o la sacarosa, que se mezcla con la muestra.

A

Centrifugación en gradiente de densidad isopícnica

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9
Q

No distingue partículas infecciosas de no infecciosas

A

Titulación de virus físicos

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10
Q

Distingue partículas infecciosas de no infecciosas

A

Titulación de virus biológicos

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11
Q

Titulación de virus físicos:

A
  • Microscopía electrónica
  • Hemaglutinación
  • qPCR
  • Medición de la densidad óptica
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12
Q

Titulación de virus Biologicos:

A
  • Método de punto final
  • Concentración de unidades infecciosas
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13
Q

Numero de genomas virales por célula

A

qPCR (PCR Tiempo real)

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14
Q

Réplicas de diluciones seriadas que son inoculadas y permite determinar la dilución que resultó en la infección del 50% de las réplicas

A

Método de punto final

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15
Q

Titulación de virus biológicos por concentración de unidades infecciosas:

A
  • PFU
  • Ensayo de enfoque
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16
Q

Muestra del stock viral mezclada con una concentración conocida de partículas de látex

A

Titulación viral por microscopia electrónica

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17
Q

Unidad de hemaglutinación (UHA)

A

Mínima cantidad de virus requerida para causar aglutinación

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18
Q

Muchos virus tienen la capacidad de expresar proteínas de unión a la célula a través del reconocimiento del ácido siálico presente también en los eritrocitos, ¿verdadero o falso?

A

Verdadero

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19
Q

Paso 1 de la titulación viral por PFU

A

Cultivo celular en cajas Petri

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20
Q

Paso 2 de la titulación viral por PFU

A

Agregar un medio semisólido

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21
Q

Paso 3 de la titulación viral por PFU

A

Aparición de placas líticas

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22
Q

Paso 4 de la titulación viral por PFU

A

Cuantificación de las placas líticas

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23
Q

El número de placas líticas observadas en la monocapa celular va en relación con:

A

el número de partículas virales viables que había en la suspensión viral utilizada para la infección inicial

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24
Q

Para virus transformantes. Las células crecen como focos o pilas de células que se tiñen y pueden ser contadas

A

Titulación viral por ensayo de enfoque

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25
Q

Cantidad promedio de virus que se adiciona por cada célula en una infección. Muy importante en protocolos de investigación

A

Multiplicidad de la infección MOI

26
Q

Asegura que todas las células en el cultivo están infectadas y lo más sincronizadas posibles

A

MOI 10

27
Q

Viroplasmas:

A

Inclusiones citoplasmáticas densas en donde se replica el dsRNA y se empaquetan las partículas virales

28
Q

Ejemplos de viroplasmas

A

Rotavirus y miembros de la familia Reoviridae

29
Q

Cómo comienza la entrada del virus a una célula animal:

A

Con la unión del virus a la superficie celular a través de receptores/factores de unión de diversa naturaleza

30
Q

La mayoría de virus envueltos son _____ en vez de fusionarse directamente con la membrana celular

A

Endocitados

31
Q

La cápside se transporta al núcleo donde se decapsida el genoma y se replica, ¿en qué virus?

A

En la mayoría de virus de DNA y unos pocos de virus de RNA

32
Q

Moléculas de superficie que unen al virus a la célula y promueven su entrada

A

Receptores

33
Q

Ayudan a concentrar las partículas virales en la superficie celular incrementando su entrada:

A

Factores de unión

34
Q

Los receptores:

A
  • Inducen cambios conformacionales en el virus que promueven la fusión membranal y penetración
  • Transmiten señales a través de la membrana que conducen a la penetración y preparan a la célula para la invasión
  • Guían al virus a través de la vía endocítica
35
Q

Los factores de unión:

A
  • No promueven activamente la entrada del virus ni median señales
  • Las interacciones con el virus no son altamente especificas
36
Q

Secuencia de eventos en la fusión viral a la membrana celular:

A
  • Segmentos de una proteína de fusión son insertados en la membrana blanco
  • La proteína viral se repliega poniendo en cercanía a ambas membranas viral y celular
  • Ambas membranas v y c se fusionan formando un poro por el cual atraviesa el virus
37
Q

Fusión membranal Clase I

A

Hélices α

38
Q

Fusión membranal Clase II

A

Barriles

39
Q

Fusión membranal Clase III

A

Proteína G con dos asas hidrofóbicas

40
Q

Sus estructuras exponen residuos hidrofóbicos que son acomodados dentro de las cadenas alifáticas que constituyen las membranas

A

Hélice α, barril β, proteína G

41
Q

No es infectiva ya que es incapaz de fusionarse con las membranas celulares a través del dominio III

A

Partícula viral inmadura

42
Q

Cambios conformacionales en la fusión membranal clase II DENV

A

Se expone el péptido de fusión del extremo distal del dominio II al disminuir el pH del endosoma, el cual se inserta a sí mismo en la membrana, habiéndose formado el barril β

43
Q

Secuencia hidrofóbica de aprox 12 residuos de aminoácidos (98-100) esencial para la fusión del DENV con la célula hospedera

A

Péptido de fusión

44
Q

De los 15 tipos de HA, ¿cuáles son las mas comunes en virus que afectan a los humanos?

A

H1, H2 y H3

45
Q

Proteína situada en la envoltura viral, reconoce al ácido siálico en células del sistema respiratorio.

A

Hemaglutinina

46
Q

Evita que el virus quede atascado en la superficie celular cuando salga de la célula recién infectada

A
  • Baja afinidad por el receptor
  • Enzima que destruya al receptor
  • Disminución de la expresión del receptor en la célula infectada
  • Ruptura catalítica de una proteína estructural durante la maduración
47
Q

Remueve el ácido siálico de la membrana permitiendo que el virus abandone la célula:

A

Neuraminidasa (influenza)

48
Q

La neuraminidasa se clasifica en nueve tipos, siendo __ y __ las más frecuentes en humanos

A

N1 y N2

49
Q

ssRNA del SARS-CoV 2

A

(+) 30,000 nt

50
Q

Proteínas estructurales del SARS-CoV 2

A
  • S
  • E
  • M
  • N
51
Q

Homotrímero de glicoproteína cuyo ensanchamiento distal de sus pliegues forma las puntas de la superficie. Une su dominio al receptor celular de ECA2/ACE2

A

Proteína S (spike)

52
Q

Pequeña proteína de envoltura del SARS-CoV2

A

Proteína E

53
Q

Proteína de la matriz que une la envoltura con el núcleo vírico

A

Proteína M

54
Q

Fosfoproteína de la nucleocápside

A

Proteína N

55
Q

Oncoproteína, inhibe a p53, regulador negativo del ciclo celular, supresor tumoral, factor de transcripción para la apoptosis

A

Proteína E6

56
Q

Oncoproteína, inhibe a Rb (retinoblastoma, proteína supresora tumoral) permite que la célula progrese a través del ciclo celular en ausencia de signos mitogénicos normales

A

Proteína E7

57
Q

Inhibición de la diferenciación de queratinocitos. Incremento y desorganización de las células basales. Incremento en la expresión de E6 y E7.
-60% regresión NIC3

A

VPH persistente. Infección abortiva

58
Q

Diferenciación de queratinocitos, baja expresión de E6 y E7
-90% regresión NIC3

A

VPH transitoria. Infección productiva

59
Q

Progresión de la enfermedad cervical:

A
  • Expresión génica celular alterada
  • Expresión génica viral alterada
  • Cambios epigéneticos
  • Integración del genoma viral, mutagénesis insercional
  • Cáncer
60
Q

Cambios epigéneticos:

A

Metilación DNA viral y celular, microRNAs

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