Hibridación de ácidos nucleicos Flashcards
Simple y poderosa forma de detectar secuencias específicas de nucleótidos empleando sondas marcadas:
Hibridación de ácidos nucleicos
Los ácidos nucleicos involucrados en la hibridación proceden de:
fuentes diferentes, previamente no formaban una doble cadena
Son de cadena sencilla y su reconocimiento es altamente específico:
Sondas
Tipos de hibridación:
- Hibridación In situ
- Southern Blot
- Northern Blot
- Dot Blot
- Hibridación de colonias o placas
Tecnica de marcaje de cromosomas que permite mapear la ubicación relativa de secuencias diferentes a lo largo de secuencias únicas de DNA mediante la hibridación de sondas que emiten fluorescencia
Fluorescent in situ Hybridization (FISH)
Fluorescent in situ Hybridization (FISH) fue desarrollada en:
1969 con marca radiactiva
Cuándo se realiza FISH?
- cuando se sospecha de una anormalidad cromosómica en algún sx concreto habiendo excluido otras posibilidades no genéticas
- localizar la expresión génica en un tejido
Tipos de sondas:
- Especificas de locus
- Fusión dual
- Doble color para ruptura
- Centroméricas
- Teloméricas
Específicas para una región cromosómica unica.
Sondas específicas de locus
En las anomalías cromosómicas numéricas, en la imagen deben verse, ¿cuántas señales por núcleo?
dos por núcleo
¿La deleción o duplicación de la región cromosómica dará origen a cuántas señales?
uno o dos, respectivamente
Anomalías cromosómicas numéricas (aneuploidías)
- Trisomía
- Monosomía
Anomalías cromosómicas estructurales:
- Deleción
- Duplicación
- Se unen a regiones contiguas al punto de traslocación
- Observada como una señal conjunta
Sondas Fusión dual
Anomalía cromosómica estructural en donde se transfiere una parte de un cromosoma a otro
Translocación