Hibridación de ácidos nucleicos Flashcards

1
Q

Simple y poderosa forma de detectar secuencias específicas de nucleótidos empleando sondas marcadas:

A

Hibridación de ácidos nucleicos

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
2
Q

Los ácidos nucleicos involucrados en la hibridación proceden de:

A

fuentes diferentes, previamente no formaban una doble cadena

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
3
Q

Son de cadena sencilla y su reconocimiento es altamente específico:

A

Sondas

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
4
Q

Tipos de hibridación:

A
  • Hibridación In situ
  • Southern Blot
  • Northern Blot
  • Dot Blot
  • Hibridación de colonias o placas
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
5
Q

Tecnica de marcaje de cromosomas que permite mapear la ubicación relativa de secuencias diferentes a lo largo de secuencias únicas de DNA mediante la hibridación de sondas que emiten fluorescencia

A

Fluorescent in situ Hybridization (FISH)

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
6
Q

Fluorescent in situ Hybridization (FISH) fue desarrollada en:

A

1969 con marca radiactiva

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
7
Q

Cuándo se realiza FISH?

A
  • cuando se sospecha de una anormalidad cromosómica en algún sx concreto habiendo excluido otras posibilidades no genéticas
  • localizar la expresión génica en un tejido
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
8
Q

Tipos de sondas:

A
  • Especificas de locus
  • Fusión dual
  • Doble color para ruptura
  • Centroméricas
  • Teloméricas
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
9
Q

Específicas para una región cromosómica unica.

A

Sondas específicas de locus

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
10
Q

En las anomalías cromosómicas numéricas, en la imagen deben verse, ¿cuántas señales por núcleo?

A

dos por núcleo

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
11
Q

¿La deleción o duplicación de la región cromosómica dará origen a cuántas señales?

A

uno o dos, respectivamente

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
12
Q

Anomalías cromosómicas numéricas (aneuploidías)

A
  • Trisomía
  • Monosomía
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
13
Q

Anomalías cromosómicas estructurales:

A
  • Deleción
  • Duplicación
How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
14
Q
  • Se unen a regiones contiguas al punto de traslocación
  • Observada como una señal conjunta
A

Sondas Fusión dual

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
15
Q

Anomalía cromosómica estructural en donde se transfiere una parte de un cromosoma a otro

A

Translocación

How well did you know this?
1
Not at all
2
3
4
5
Perfectly
16
Q
  • Revelan eventos de traslocación
  • Se unen al cromosoma intacto flanqueando el punto de ruptura
A

Sondas Doble color para ruptura

17
Q

Sondas Doble color para ruptura
Cuando la translocación ocurre, la sonda…

A

se separa

18
Q

Hibridan en las regiones repetidas que rodean los centrómeros. Pueden detectar aneuploidía de cualquier cromosoma

A

Sondas centroméricas (satélites)

19
Q

Útiles para revelar pequeñas deleciones o translocaciones que no son fáciles de visualizar en el cariotipo estándar

A

Sondas Teloméricas

20
Q

Su objetivo es identificar secuencias de interés en el ácido nucleico inmovilizado en una matriz de papel, nylon o nitrocelulosa

A

Southern y Northern Blot

21
Q

Cómo es la transferencia en Southern y Northern Blot?

A

Pasiva o electrotransferencia

22
Q

DNA genómico digerido previamente con enzimas de restricción

A

Southern Blot

23
Q

Análisis de expresión. Niveles de mRNA

A

Northern Blot

24
Q

Sonda marcada o acoplada a una etiqueta

A
  • Fósforo radiactivo (32P)
  • Digoxigenina (DIG)
25
Q
  • Anticuerpo acoplado a fosfatasa alcalina
  • Anticuerpos específicos a αDIG
  • Sustrato quimioluminiscente
A

Digoxigenina

26
Q

Para la interpretación se debe considerar la muestra que se está analizando y lo que representa el que haya o no reconocimiento específico de la sonda empleada

A

Southern Blot

27
Q

Analisis de expresión de genes:

A
  • Niveles de la proteína (proteómica)
  • Niveles de mRNA
28
Q

Niveles de mRNA

A
  • RT-qPCR
  • Northern Blot
  • Microarreglos
29
Q

Analiza el nivel de expresión de un gen relacionado con el cuadro clínico

A

Northern Blot

30
Q

Util tanto para muestras de DNA y RNA

A

Dot Blot

31
Q

En vez de hacer la separación electroforética en gel de cada una de las muestras, éstas se aplican con un capilar en la membrana directamente

A

Dot Blot

32
Q

Dot Blot permite analizar de forma rápida la presencia de una secuencia especifica en una muestra determinada. V/F

A

Verdadero

33
Q

La membrana se pone en contacto con las colonias

A

Hibridación de colonias o placas

34
Q

La membrana se trata de forma que se promueve que el DNA o RNA quede expuesto y pueda hibridar con la sonda marcada

A

Hibridación de colonias o placas

35
Q

La colonia identificada por hibridación de colonias, ¿puede ser resembrada y expandida?

A

Si