Bacterias, Caracteristicas Generales Y Metodos De dx En Microbiologia Flashcards
Cuáles son las características de las bacterias
Son un grupo heterogéneo de microrganismos unicelulares.
Se distinguen por poseer: estructura celular de células procariota y transmisión de material genético mediante mecanismos de transferencia genética
Cuáles son las características de una célula procariota en este caso bacterias
Carece de membrana nuclear, retículo endoplasmico o plastos autónomos.
Plastos autónomos son mitocondrias y cloroplastos.
Esto lo diferencia de las células eucariotas es decir plantas animales y protistas.
Además poseen una membrana citoplasmática de estructura similar a la Eucariota con el modelo típico de bicapa fosfolípidica y matriz proteica.
A diferencia de las células eucariotas membrana carece de esteroles, salvo el género Mycoplasma.
Los elementos bacteriana se dividen en:
1- Elementos bacterianos obligados: pared celular, membrana citoplasmática, citoplasma, ribosomas y núcleo.
2- Elementos bacterianos facultativos: cápsula, glucocalix, flagelo, fimbria, esporo.
Diferencias en la estructura entre una célula procariota y una célula eucariota
Membrana nuclear: la célula procariota no posee membrana nuclear, La eucariotas si.
Cromatina: células procariota tiene un único cromosoma, la eucariota tiene varios cromosomas.
Retículo endoplasmico: procariota no lo posee, eucariotas si.
Lisosomas y aparato de Golgi: procariota no, eucariotas si.
Ribosomas: ambos tienen ribosomas.
Plastos autonómicos: mitocondrias y cloroplastos: procariotas no, eucariotas si.
Citoesqueleto: procariota no, eucariota sí.
Qué es la pared celular
Estructura fundamental de la que sólo carece el género mycoplasma.
Es un elemento obligado, y es el elemento obligado más extenso.
Genera una cubierta rígida que se encuentra separada de la membrana plasmática por el espacio Periplasmatico.
Según su composición y estructura da una serie de propiedades de tinción que permite clasificar a las bacterias.
Cuál es la composición de la pared celular
Es diferente según se trate de bacterias grampositivas o Gramnegativas o bien ácido-alcohol sensibles o resistentes.
Sin embargo todas ellas tienen en común un elemento: que forma un auténtico esqueleto el péptidoglucano.
El péptidoglucano está formado por cadenas de amino azúcares enlazados con polipéptidos.
Cuál es la composición de la pared celular de las bacterias grampositivas
Componente fundamental y más abundante es el péptidoglucano.
Además están presentes otros componentes: que son específicos de los microorganismos grampositivos:
1- Ácidos Teicoicos: se entrelazan con el péptidoglucano formando un armazón que contribuya a la adhesión a la superficie celulares.
2- Ácidos lipoteicoicos: se inserta en el membrana plasmática por su parte lipofilica interviniendo en el mantenimiento de la integridad celular.
Cuáles son los componentes de la pared celular de las bacterias gramnegativas
Proporción de péptidoglucanos mucho menor.
La pared es más compleja en composición y estructura que los grampositivos.
Se distinguen tres zonas diferenciadas: capa externa, capa intermedia y capa profunda.
Cuáles son las características de cada capa de la pared celular de las gramnegativas
Capa externa: constituida por un lipopolisacarido. Se divide en partes.
Capa intermedia: compuesta por lipoproteínas que se inserta en su parte lipídica con los fosfolípidos de la capa externa y en su parte peptípica con el péptidoglucano.
Capa profunda: constituida por el péptidoglucano, composición ligeramente diferente a los grampositivos.
Mencione las características que tiene el lipopolisacárido de la capa externa de la pared bacteriana o celular de las bacterias gramnegativas
El lipopolisacárido se divide en tres partes:
1- Oligosacáridos externo o antígeno O
2- Parte central o core.
3- Parte interna lipídica o lípido A o endotoxina.
Los fosfolípidos se unen a la parte hidrófoba del lipopolisacárido, es decir al lípido A, formando una membrana externa donde se insertan proteínas como porinas.
Las proteínas de la membrana externa se sintetizan en ribosomas y se transfieren al exterior por una zona de adhesión entre membrana citoplasmática y membrana externa denominadas uniones Bayer.
Cuál es la estructura de la pared celular de las bacterias ácido-alcohol resistentes
Ácidos micólicos: le confieren la propiedad de no ser decoloradas ante el ácido alcohol, son ácidos grasos no saturados.
Éstos ácidos micólicos pueden presentarse esterificados con el polisacárido superficial formando un factor de virulencia llamado factor cordón o Cord-factor (glucolípido)
El resto es similar a los grampositivos aunque no poseen ácidos teicoicos
Que bacterias son ácido-alcohol resistentes
Micobacterias: Tuberculosas y no tuberculosas.
Algunas especies de Nocardia: Bacilos grampositivos filamentosos ramificados débilmente ácido-alcohol resistentes.
Rhodococcus equi: cocobacilo Grampositivo también débilmente ácido-alcohol resistente
Cuáles son las características que diferencian bacterias gran positivas de bacterias gran negativas
Tinción Gram: gran positivas azul o violeta, gran negativas rojo o rosa.
Decoloración: gran positivas no decoloran, gran negativas decoloran.
Endotoxina: gran positivas no, gran negativas si el lípido A.
Pared: gran positivas fina, gran negativas compleja.
Superficie: gran positivas homogénea, gran negativas es rugosa.
Continuación de las diferencias estructurales de bacterias gran positivas y bacterias gran negativas
Lípidos: gran positivas poco, gran negativas mucho.
Acido teicoico: gran positiva si, gran negativas no.
Sensibilidad a betalactámicos: gran positivas si más que gran negativas.
Sensibilidad a lisozima: Gran positivas sí, gran negativas no.
Relación ADN/ARN: gran positivas 8/1, gran negativas 1/1
Qué otras funciones desempeña la pared bacteriana
Exosqueleto bacteriano da rigidez y resistencia osmótica.
Forma al tabique en el caso de división bacteriana.
Función de filtro gracias a la presencia de porinas que no permiten paso de macromoléculas.
Poder patógeno en el caso del endotoxina o lípido A propia de los gramnegativos.
Confiere especificidad de tipo y de grupo determinada por el antígeno superficial O.
Es el sustrato sobre el cuál actúan ciertos antibióticos como los betalactámicos y glucopéptidos.
Define las propiedades de tinción de las bacterias: tinción Gram y Ziehl-Neelsen.
De fuera adentro cuáles son las estructuras de la pared celular de las bacterias gran positivas
Péptidoglucanos.
Lipoproteínas.
Membrana celular
De afuera para adentro cuáles son las estructuras de la pared bacteriana Ácido-alcohol resistentes
Factor cordón.
Ácidos micólicos.
Arabino galactano.
Péptidoglucanos.
Membrana celular.
En general todas las bacterias tiene las siguientes características
Tienen crecimiento fuera de la célula huésped.
Tienen síntesis proteica.
Tienen sensibilidad antibióticos.
Contienen ácidos nucleicos ADN y ARN.
Se reproducen por fisión binaria.
Tienen en una pared rígida.
No tienen sensibilidad al interferón obviamente hay.
No poseen un citoesqueleto
Hay tres bacterias especiales que no cumplen las características generales del resto de las bacterias cuáles son
Rickettsias: Se diferencian del resto en dos puntos, no tienen crecimiento fuera de la célula huésped y si tienen citoesqueleto, el resto es igual al resto de las bacterias.
Clamidia: Se diferencian en tres puntos, no crecen fuera de la célula huésped y no producen su propia energía por último no tienen pared rígida.
Mycoplasma: Se diferencia del resto porque su pared no es rígida, No tiene pared celular y su membrana citoplasmática a diferencia del resto de las bacterias si contiene esteroles.
Cuáles son las características estructurales de la membrana citoplasmática de las bacterias
Similar al de las eucariotas.
Salvo que no poseen colesterol, excepto en las bacterias pertenecientes al género mycoplasma.
Adopta una estructura de doble capa de fosfolípidos con proteínas englobadas con diferentes funciones: permeasas, fosfatasa alcalina ya, etc.
En la superficie externa de la membrana citoplasmática se localizan las proteínas fijadoras de penicilina o PBP.
Qué son las proteínas fijadoras de penicilina
Las penicilin binding proteins o PBP:
Intervienen en síntesis de péptidoglucanos.
La mutación de estas proteínas puede condicionar la resistencia los betalactámicos como ocurre en las cepas de staphylococcus aureus resistentes a meticilina. SAMR
Qué otras propiedades pose de la membrana citoplasmática
Barrera osmótica: función de filtro selectivo por sus propiedades y hidrofobas y sus proteínas (permeasas).
Se realiza la fosforilación oxidativa: mientras que en las eucariotas esto tiene lugar en las mitocondrias.
Síntesis de pared celular y otras estructuras externas como cápsulas y los dextranos del glucocalix entre otros.
Sobre ella actúa en agentes antimicrobianos y antisépticos (detergentes)
Qué es el citoplasma
Sistema coloidal formado por agua y que contiene el ADN bacteriano, ribosomas e inclusiones de naturaleza diversa
Son los ribosomas
Estructuras para la síntesis de proteínas y órganos diana de numerosos antibióticos.
Aminoglucósidos, tetraciclinas, macrólidos por ejemplo.
Tiene coeficiente de sedimentación diferente al de los ribosomas de las células eucariotas
Características del núcleo de una célula procariota
A diferencia del de las células eucariotas: Tres cosas
1- El núcleo es simplemente genomas celular que equivale al cromosoma bacteriano.
2- No limitado por una membrana nuclear.
3- El ADN extracromosómico o plasmido.
Cuáles son los elementos facultativos de una bacteria procariota
Cápsula.
Glucocalix.
Flagelos.
Fimbrias.
Esporo
Cuál es la composición de la cápsula bacteriana
Polímeros orgánicos sintetizados por la propia bacteria.
Estos polímeros están depositados fuera de la pared, habitualmente formada por polisacáridos.
Pero en ocasiones está formado por polipéptidos: D-glutámico en Bacillus.
Cuáles son las propiedades y función de la cápsula bacteriana
Protección: Frente a la fagocitosis, favorece su multiplicación.
Capacidad antigénica: ayuda a su identificación y preparación de vacunas.
Facilita la identificación: por el aspecto de la colonia y mediante la visualización al microscopio.
Protege a la bacteria de la acción de antibióticos a la hacerse impermeable frente a estos.
Qué es el glucocalix
Sustancias sintetizadas por determinadas bacterias.
Constituida por homo polímeros que facilitan la fijación de las bacterias.
Estafilococo epidermidis, estreptococos del grupo Viridians
Qué son los flagelos
Están formados por un filamento de flagelina.
Responsables de la movilidad.
La flagelina es responsable de la inmunidad específica de tipo antígeno H (AgH)
La movilidad por flagelos es excepcional en los cocos.
Que son las fimbrias
Son visibles al microscopio electrónico y carecen de movilidad.
Funciones: capacidad de adherencia.
Propiedades: antigénicas y conjugación bacteriana.
Que es el esporo
Presente en algunas especies.
Puede estar de forma libre o dentro de la bacteria.
Es una forma de resistencia bacteriana ante determinado estrés para el microorganismo.
Se compone de una parte central o core: Con todos los elementos necesarios para convertirse en la forma vegetativa.
Se compone de una parte externa: que consiste en una especie de péptidoglucano recubierto por capas ricas en queratina como intina y exina.
Cuál es la clasificación desde el punto de vista nutricional de las bacterias
Según la fuente de obtención de energía: Fototrofas, quimiotrofas, paratrofas.
Según la capacidad de síntesis: Autotrofas, heterotrofas, hipotrofas.
Según la relación con el oxígeno: Bacterias aerobias, bacterias anaerobias, bacterias aerobias y anaerobias facultativas, bacterias microaerófilas.
Clasificación de las bacterias según la fuente de obtención de energía
Fototrofas: A partir de la luz solar
Quimiotrofas: A partir de reacciones químicas
Paratrofas: A partir del huésped que parasitan
Clasificación de las bacterias según su capacidad de síntesis
Autotrofas: Tienen elevada cantidad enzimas, aprovecha en el carbono y el nitrógeno obtenidos a partir de compuestos inorgánicos.
Heterotrofas: Tienen menor cantidad o capacidad de síntesis, sólo aprovechan carbono y nitrógeno de compuestos orgánicos.
Hopotrofas: Tienen casi nula dotación de enzimas, viven a expensas de la célula huésped.
Clasificación de las bacterias según su relación con el O2
Bacterias aerobias: se multiplican sólo en presencia de oxígeno, si se colocan en medio de cultivo con poca superficie expuesta al aire, tubo por ej, crecen en la superficie.
Bacterias anaerobias: solamente crecen en ausencia de oxígeno. Si se colocan en un medio de cultivo con poca superficie expuesta al aire crecerían en el fondo del tubo. Suelen estar presentes en abscesos, infecciones del tracto genital femenino, colon y cavidad oral.
Bacterias aerobias y anaerobias facultativas: crecen bien en ambos medios.
Bacterias microaerófilas: Únicamente crecen a bajas tensiones de oxígeno, por ejemplo en el tubo crecerían debajo de la superficie.
Cuáles son las características de la genética bacteriana
El intercambio genético entre células procariotas es generalizado.
Esto conforma una de las principales características de la diversidad genética de las bacterias
Cuáles son los principales mecanismos de intercambio genético entre las células procariotas
Transformación: captación directa de ADN procedente de la bacteria donante (muerta)
Conjugación: bacteria donante construye una porción de ADN al que se denomina plásmido, que se cede a una bacteria receptora por medio de pilis.
Transducción: transferencia de ADN de una célula donante a una receptora por medio de un bacteriófago.
En qué se basa el diagnóstico de las enfermedades infecciosas o diagnóstico microbiológico
Se basa en reconocer un espectro clínico y demostrar la presencia de la gente etiológico en el organismo o la huella inmunológica que puede dejar este en el paciente.
Es decir:
- Dx clínico: que se confirma con el Dx etiologico.
- Dx etiologico: que lo da el laboratorio de microbiología mediante técnicas de diagnostico directas e indirectas.
En qué se basan las técnicas de diagnóstico directo
Se basan en demostrar la presencia del agente microbiano, sus productos metabólicos o sus compuestos antigénico.
En qué se basa las técnicas de diagnóstico indirecto
En detectar anticuerpos circulantes o una hipersensibilidad retardada, reflejo de una infección pasada o actual por un microorganismo.
Puntos clave a la hora del aislamiento de un microorganismo
Aislar un determinado microorganismo no conlleva a la conclusión de que este sea el productor de la enfermedad.
Siempre hay que descartar, dependiendo de la naturaleza de la muestra la posibilidad de que se trate de una simple colonización, un artefacto o una contaminación de la muestra.
En general la demostración de microrganismos en lugares asépticos como líquido cefalorraquídeo o sangre es más específica que en vías respiratorias altas, piel, frotis vaginal por ejemplo
Requisitos para una buena toma de muestra
Que se efectúe en el sitio exacto de la lesión.
Que nunca se ponga en contacto con un antiséptico.
Que sea lo más precoz posible y preferentemente que se obtengan muestras líquidas.
Tomar previamente a la administración del tratamiento antibiótico empírico.
Requisitos para tomar buena muestra de sangre para hemocultivo
El hemocultivo requiere asepsia absoluta durante la extracción de sangre.
La muestra debe obtenerse antes del inicio del tratamiento antimicrobiano.
Habitualmente se debe extraer dos muestras mediante punción a través de diferentes venas: otra opción es que una de las muestras se extraiga a través del catéter venoso si el paciente tiene uno.
Requisitos para la buena toma de muestra de esputo
Son valorables microbiológicamente aquellas muestras en las que:
Por cada campo microscópico de pequeño aumento se observen menos de 10 células epiteliales y más de 25 leucocitos.
Criterios de Murray.
Como hacemos la demostración de la gente microbiano
Comprende:
Visualización.
Cultivo.
Aislamiento e identificación.
Comprobación de patogenicidad.
Sensibilidad a antimicrobianos
Para demostración de la agente micróbiano, se puede usar la visualización
Examen directo: útil para por Borrelia, plasmodium, espiroquetas, tricomona.
Preparación en fresco: tricomonas y parásitos intestinales.
Campo oscuro: empleada para la detección de Treponema en lesiones sospechosas de sífilis primaria y secundaria.
Raspaduras en KOH y Calcoflúor: detección de hongos.
reacción capsular: crytococcus y neumococo en líquido cefalorraquídeo.
Inmunofluorescencia directa: No solo visualiza microorganismos si no también su identificación con anticuerpos específicos.
Tinciones
De que tinciones disponemos en microbiología para demostrar el agente microbiano
Tinción Gram.
Tinción Ziehl-Neelsen .
Giemsa: Plasmodium, Babesia, toxoplasma, Pneumocystis jirovecii, Leishmania.
Kinyon: cyclospora, crysptosporidium, isospora.
Giménez: Rickettsia, Legionella.
Dietarle: legionella.
PAS y plata metamina de Gömöri: hongos
Características para demostración del agente microbiano en el cultivo
Induce crecimiento y reproducción Invitro de bacterias para observar sus propiedades y conseguir un mejor estudio bioquímico inmunológico.
Entre los más utilizados destaca:
- Enriquecimiento: número de bacterias incrementa inhibiendo la flora asociada que limita su crecimiento.
- Aislamiento: tiene finalidad de permitir el aislamiento de una determinada colonia.
- Diferenciales: se usa para establecer diagnóstico diferencial aprovechando propiedades como la oxidación-reducción de sustratos, producción de gas, etc.
Demostración del agente microbiano de acuerdo al aislamiento e identificación se efectúa mediante
Identificación de una especie microbiana se efectúa mediante: pruebas fisiológicas, bioquímicas o metabólicas distintas para cada género bacteriana.
Para esto se utiliza el tipo de colonia formada, su morfología y propiedades y Una vez aislado el agente se hacen pruebas bioquímicas, inmunológicas entre otras para completar el estudio.
Cómo se hace la comprobación de patogenicidad en la demostración de la agente microbiano
A veces un microorganismo aislado es un saprofito habitual y no posee patogenicidad.
Otras veces puede ir asociado determinadas propiedades bioquímicas o inmunológicas
Que debo saber sobre la sensibilidad a antimicrobianos
Las pruebas de sensibilidad frente a los antimicrobianos ayudan al elección del tratamiento antibiótico adecuado.
La correlación entre le efectividad y la actividad Invitro no siempre es exacta, pero ayudan a la elección del tratamiento antibiótico adecuado.
En cualquier caso no debería administrarse un antibiótico al que la bacteria demostrado ser resistente in Vitro
Qué tipos de pruebas de sensibilidad frente a los antimicrobianos tenemos
Se llaman también antibiogramas y pueden ser:
1- Metodos cualitativos: Métodos de difusión en agar ofrecen información cualitativa sobre la sensibilidad de un determinado patógeno a los antimicrobianos.
2- Métodos cuantitativos.
Cuáles son los métodos cualitativos de sensibilidad frente a los antimicrobianos
Métodos de difusión en agar, ofrecen información cualitativa sobre la sensibilidad de un determinado patógeno en los antimicrobianos.
Entre estos métodos tenemos:
- Disco placa
- Épsilon Test: E-tést.
Su resultado permite clasificar al aislado como:
- Sensible (S)
- intermedio (I)
- Resistente (R)
Qué son los métodos cuantitativos en las pruebas de sensibilidad frente antimicrobianos
Se usa en infecciones graves como la endocarditis, donde puede ser útil la determinación cuantitativa de la actividad antibiótica a través de métodos de dilución.
Métodos de dilución: sean en medio líquido o en medio sólido.
Éstos métodos van a medir cuatro parámetros.
Cuáles son los cuatro parámetros que miden las pruebas cuantitativas de la actividad antibiótica a través de métodos de dilución en las pruebas de sensibilidad a antimicrobianos.
Concentración mínima inhibitoria: CMI.
Concentración mínima bactericida: CMB
Capacidad bactericida del suero: CBS
Niveles séricos de antimicrobianos
Qué es concentración mínima inhibitoria
Es la menor concentración de antimicrobiano capaz de inhibir la multiplicación de un determinado germen (se experesa en ug/ml o mg/l)
Qué es concentración mínima bactericida
Menor concentración del antibiótico capaz de eliminar el 99% de la muestra bacteriana inoculada.
No siempre coincide con la concentración mínima inhibitoria y, suele presentar valores más elevados que está.
Es capacidad bactericida del suero
Mayor dilución del suero de un paciente que está recibiendo el antibiótico te estado que es capaz de eliminar el inoculó bacteriano
Niveles séricos de antimicrobianos
Particularmente útil en casos de insuficiencia hepática o renal para evitar efectos adversos.
Además garantiza la eficacia del tratamiento cuando existen dudas sobre la biodisponibilidad del antibiótico
El antibiogramas mediante difusión en agar es un método
Es un método cualitativo de una prueba de sensibilidad frente a los antimicrobianos.
Como toda prueba cualitativa de sensibilidad frente a los antimicrobianos ofrece información sobre sensibilidad con un resultado como sensible resistente o intermedio
Antibiogramas mediante difusión en agar, dos métodos
Método del disco-placa: mide el diámetro de los halos de inhibición.
Método E-tést: permite establecer el valor exacto de la CMI en el punto donde la elipse intercepta la tira.
Cuál es el objetivo de las técnicas de diagnóstico directo
Demostrar la presencia del microorganismo de forma rápida y directa.
Sin tener que esperar el tiempo de incubación que requiere el cultivo
Cuál es la forma más comúnmente extendida de las técnicas de diagnóstico directo
La forma más comúnmente extendida: visualización directa mediante tinción de la muestra clínica.
Qué otras son técnicas de Dx directas
Aquellas que pretenden demostrar metabolitos o antígenos bacterianos.
Cómo se puede hacer el diagnóstico directo de legionella pneumophila
Detección en orina del antígeno correspondiente al sero grupo 1 de legionella pneumophila.
Permite establecer el diagnóstico de infección de forma directa y sencilla.
Qué métodos de diagnóstico microbiológico directo tenemos
Microscópicos: visualización del microorganismo.
Químicos: detección de metabolitos microbianos.
Inmunológicos: detección de antígenos microbianos.
Métodos de diagnóstico microbiológico directo microscópicos
Tinciones: tinción Gram, tinción Ziehl-Neelsen, auramina….
Microscopía electrónica.
Fluorescencia: directa, indirecta y anti-C3
Métodos de diagnóstico microbiológico directo químicos
Cromatografía en gas líquido
Métodos de diagnóstico microbiológico directo inmunológicos
Aglutinación en partículas de látex.
Inhibición de la hemaglutinación.
Enzimo inmuno ensayo.
Radioinmunoanálisis (RIA)
Doble inmunodifusión.
En qué casos se utiliza la prueba de aglutinación en partículas de Látex
Para detectar antígenos de:
Haemophilus.
Meningococo.
Neumococo.
Estreptococos beta hemolítico del grupo B.
Cryptococcus.
En qué casos utilizamos la inmunofluorescencia
Chlamydia.
Treponema pallidum.
Legionella.
Bordetella
Técnicas de biología molecular
Permite detectar secuencias de ácidos nucleicos de Microrganismos.
Entre estas están: la reacción en cadena de polimerasa o PCR y las ondas de ácidos nucleicos.
Constituyen la técnica de elección en encefalitis herpética o por ejemplo
Cuáles son las técnicas de diagnóstico indirecto
Demostración de anticuerpos.
Hipersensibilidad de base celular: hipersensibilidad retardada
Que debo saber sobre la demostración de anticuerpos en técnicas de diagnóstico indirecto
El diagnóstico de infección activa o enfermedad se realiza por un aumento de 4 o más veces de los títulos de anticuerpos en una segunda determinación, efectuada 1-3 semanas después de la primera.
El diagnóstico es generalmente retrospectivo en las infecciones agudas. Mientras que en las de curso prolongados establece durante la enfermedad.
Si se tienen cuenta que la IgM es la primera en aparecer y desaparecer, su demostración tiene validez diagnóstica de enfermedades recientes.
El estímulo antigénico para producir anticuerpos puede caer si se administran antibióticos y puede elevarse manera significativa en el caso de una recaída.
Cosas a saber sobre la hipersensibilidad de pase celular en el diagnóstico indirecto microbiológico
Se basa en la hipersensibilidad retardada.
Se puede demostrar en reacciones intradérmicas:
Por ejemplo en tuberculosis: intradermorreacción de Mantoux: es el método diagnóstico utilizado para demostrar infección latente por Mycobacterium tuberculosis.
Intradermorreacción de Montenegro: leishmaniasis.
Cuáles son las nuevas técnicas de diagnóstico microbiológico
MALDI-TOF
Secuenciación de alto rendimiento o de última generación
Estas dos son nuevas técnicas cuya integración en la práctica clínica habitual es progresivamente mayor
Qué es el MALDI -TOF
Es una técnica de espectrometría de masas empleada tradicionalmente en la industria para identificar composiciones de los materiales.
En el campo de la microbiología se puede emplear para identificar microorganismos mediante detección de su composición de proteínas, la llamada huella péptica.
Ofrece la posibilidad de realizar una identificación de microorganismo aislado en el cultivo en menos de dos horas y con un nivel de precisión muy alta.
MALDI: matrix-assited laser desorption/ionization es decir desorción/ionizacion laser asistida por matriz.
TOF: time-of-light.
En qué técnica diagnóstica se detecta la huella péptidica
En la nueva técnica de diagnóstico microbiológico MALDI-TOF
Qué es la secuenciación de alto rendimiento o de última generación
Next Generation sequencing
Son técnicas de secuenciación masiva de las cadenas de ADN que se realizan en paralelo.
Esto ha traducido en una notable reducción del coste económico y del tiempo invertido, son capaces de secuenciar millones de fragmentos de ADN en minutos.
Cuál es el uso de la secuenciación de alto rendimiento o de última generación
Permite detectar microorganismos patógenos en muestras clínicas en las que de manera simultánea haya material genético humano o de otros microorganismos no patógenos.
También se puede usar para conocer con exactitud la composición de la microbiota del tubo digestivo del ser humano y como esta se altera en diferentes enfermedades.
Mencione cocos grampositivos que sean aerobios o facultativos
Estafilococos
Estreptococos.
Enterococos
Indique cocos grampositivos anaerobios
Peptococcus
Peptoesteeptococcus.
Mencione cocos grampositivos aerobios o facultativos
Agrupadas en racimos: estafilococos.
Agrupados en cadenas o parejas: estreptococos
Que microorganismos pertenecen al grupo de cocos gran positivos aerobios facultativos agrupadas en racimos
Microrganismos agrupadas en racimos: estafilococos.
Esto se diferencian de los agrupados en cadenas o parejas que son los estreptococos porque los estafilococos son catalasa positivos.
Los estreptococos son catalasa negativos.
Para diferenciar Las especies de estafilococos utilizamos la coagulasa:
Gérmenes catalán a positivo, coagulasa positivo: estafilococo aureus.
Gérmenes catalasa positivo y coagulasa negativo: vemos el manitol:
Gérmenes catalasa positivo, coagulasa negativo y Manitol positivo: estafilococos saprophyticus.
Gérmenes catalasa positivo, cuagulasa negativo y Manitol negativo: estafilococo epidermidis.
Como hacemos el diagnóstico diferencial de los gérmenes agrupados en cadenas o parejas
En general todos los gérmenes agrupados en cadenas o parejas son catalasa negativos, son estreptococos.
Esto lo diferencia de los agrupados en racimos o estafilococos que son catalasa positivos.
Para diferenciar los distintos estreptococos vemos su hemólisis en agar sangre o agar chocolate:
- Hemólisis parcial: alfa hemóliticos.
- Hemólisis completa: beta hemolíticos.
- No hay hemólisis
Diagnóstico diferencial de la hemólisis parcial: alfa hemolítico
Para diferenciar microorganismos en este grupo se utiliza la Optoquina.
Sensibles optiquina: estreptococo neumoniae o neumococo.
Resistente a Optoquina: estreptococos del grupo viridians por ejemplo S. mitis, S. mutans, S. salivarius, S. anginosus, S. gallolyticus antes denominado S. bovis
Como hacemos el diagnóstico diferencial de los microorganismos que son beta hemolíticos. Son aquellos que tienen hemólisis completa
Se hace en la clasificación de Lancefield pero para diferenciar a los microorganismos en este grupo hay que utilizar la Bacitracina
Si es sensible a la bacitracina, PYR(+): S. Pyogenes (grupo A)
Si es resistente a la bacitracina, hiperactiva (+), CAMP (+): S. Agalactiae (grupo B), S. dysgalactiae (grupo C), S. canis (grupo G)
Que es la prueba PYR
La prueba del “PYR” permite la identificación presuntiva de ciertas bacterias en base a la actividad enzimática l-pirrolidonilarilamidasa (PYRasa).
Los microorganismos que contienen esta enzima hidrolizan en forma rápida el sustrato presente en los discos y liberan un grupo pirrólico que reacciona con el reactivo cinamaldehído originándose un compuesto de color rosado-rojizo.
Constituye una prueba altamente sensible y de utilidad como los discos de Bacitracina y la prueba de tolerancia a la sal (REF Enterococos Medio Hipertónico).
También se la utiliza junto con la prueba de leucinoaminopeptidasa y los discos de Vancomicina para la identificación de cocos Gram positivos catalasa negativa no productores de beta hemólisis.
Por último como hacemos el diagnóstico diferencial de los cocos gran positivos agrupados en cadenas o parejas que no presentan hemólisis
Éstos cocos gran positivos aerobios facultativos que no presentan hemólisis son los enterococos.
Tienen bilis-esculina positivo, PYR positivo.
Para el diagnóstico diferencial de que microorganismo se trata en este grupo utilizaremos la ampicilina, a la vancomicina y la teicoplanina.
Si es sensible a la ampicilina y sensible a la vancomicina: enterococo faecalis.
Si es resistente a la ampicilina y sensible a la vancomicina: enterococo faecium.
Si es vancomicina resistente y teicoplanina sensible: enterococo gallinarum, E. Casseliflavus, E. flavens,
Cuáles son los cocos gran negativos aerobios o facultativos
Neisseria .
Moraxella.
Cocos gran negativos anaerobios
Veilonella
Bacilos gran positivos aerobios o facultativos
Corynebacterium.
Listeria monocytogenes.
Bacillus (esporulados)
Erysilethrix rhusiopathie.
Nocardia.
Rhodococcus (cocobacilo)
Cuáles son los bacilos gramnegativos aerobios o facultativos
Enterobacterias.
No enterobacterias
Cuáles son los bacilos gran negativos anaerobios
Bacteroides
Prevotella
Porphyromonas
Fusobacterium
Bacilos gran positivos anaerobios
Clostridium (esporulados)
Propionibacterium.
Actinomyces.
Bifidobacterium.
Dentro de los bacilos gran negativos aerobios facultativos tenemos a las interrogatorios, como las diferenciamos
Si fermentan lactosa: escherichia coli, klebsiella, Enterobacter.
No fermentan lactosa: debemos ver la oxidasa.
Si la oxidasa es negativa: Citrobacter, Serratia, Proteus, Morganella, Providencia, salmonela, shigella y yersinia.
Si no fermentan lactosa y la oxidasa es positiva: son no enterobacterias.
Cuáles son las bacilos gran negativos aerobios facultativos no enterobacterias
No fermentan lactosa, son oxidasa positivos.
Pseudomonas, Aeromonas, Burkhderia, vibrio (bacilos curvo)
Acinetobacter.
Brucella, Bartonella, Francisella, Bordetella.
Capnocytophaga
Haemophilus.
Legionella, Pasteurella.
Helicobacter, Campylobacter.
Kingella, Eikenella.
