Vorlesung 12: Proteasom + Virale Evasion Flashcards
Eine T-Zelle erkennt (Richtige Auswahl treffen):
- Native Antigene
- Die primäre Sequenz eines Peptids
- Körpereigene MHC Moleküle
- Die Kombination aus Peptid und MHC Molekül
Die Kombination aus Peptid und MHC Molekül
Der T-Zell Rezeptor
- Ist immer membranständig
- Kann unterschiedliche Antigene erkennen
- Leitet Signale weiter
- Wird sekretiert
Ist immer membranständig
Die Immunologische Synapse
- Ist essentiell für die Antigenerkennung durch B-Zellen
- Ist eine Verbindung zwischen Immunsystem und Gehirn
- Bildet sich zwischen APC und T-Zelle
- Erkennt nur virale Antigene
Bildet sich zwischen APC und T-Zelle
Was ist das?
- Ein MHC-Klasse I Molekül
- Eine Antigen-präsentierende Zelle
- Ein T-Zell Rezeptor
- Ein MHC-Klasse II Molekül
Ein MHC-Klasse II Molekül (Weil es an den Enden nicht abgeschlossen ist)
MHC-Gene sind wichtig für:
- Transplantatabstoßung
- Anti-Tumor Immunität
- Immunität gegen Viren
- Alle 3
Alle 3
MHC Moleküle sind
- Keines
- Polygen und Polymorph
- Polygen
- Polymorph
Polygen und Polymorph
Wie viele verschiedene MHC Klasse I Allele gibt es?
- 10-50
- 50-500
- 1-9
- 2000-5000
2000-5000
Welche Zellen exprimieren MHC Klasse II Moleküle?
- Antigenpräsentierende Zellen
- Erythrozyten
- T-Zellen
- Leberzellen
Antigenpräsentierende Zellen
Welche Antigene präsentiert MHC I?
- Bakterielle
- Intrazelluläre
- Extrazelluläre
- Alle
Intrazelluläre
MHC Klasse I und II haben:
- Ähnliche Bindungsmotive
- Das gleiche Molekulargewicht
- Das gleiche Expressionsmuster
- 1 und 2 Transmembrandomänen
1 und 2 Transmembrandomänen
Wie ist das 20S Proteasom aufgebaut? (Alpha und Beta Untereinheiten)?
Welcher Teil ist für Proteolyse verantwortlich?
- Alpha
- Beta
- Beta
- Alpha
Beta ist für Proteolyse verantwortlich
Wie ist der Aufbau des 26S Proteasom?
- 19S
- Alpha
- Beta
- Beta
- Alpha
- 19S
Was ist die Aufgabe von 19S des 26S Proteasoms?
Erkennung ubiquitinilyter Proteine
Was bewirkt PA28AlphaBeta? (Proteasom)
Erhöht 20S Aktivität
Was ist c20S?
Was ist i20S?
Wie kommt man von c20S zu i20S? (Molekül)?
Konstitutives Proteasom
Immunproteasom
Interferon Gamma
Wie viele Beta Untereinheiten die proteolytisch aktiv sind hat das Proteasom?
Welche Wirkung hat das Immunproteasom (Nur den Stichpunkt)
3
“Tryptisch”
C20S und i20S bilden Fragmente
-> Welcher Anteil an Fragmenten werden von BEIDEN gebildet (identisch)?
Was ist bei den Fragmenten von i20S besonders zu erwähnen?
25%
Mehr durch TAP transportierbar
Welchen Terminus generiert das Proteasom?
Den C-Terminus
Welches Strukturelement wird von MHC I und MHC II auf ihrer Oberfläche verwendet um Peptide in eine “Furche” zu bringen?
Furche wird durch zwei alpha Helixes gebildet
Wie viel % des Zellvolumens sind Proteine?
10%
Welches HLA Gen ist für Transplantate nicht so wichtig?
Warum?
MHC-C weil es nur schwach exprimiert wird
MHC-A und MHC-B aber wichtig!
Welches Protein kontrolliert nach der Proteinfaltung auf Faltungsfehler?
HSP
Was sind DRIPs?
Defekte Ribosomal Products
-> Faltungsfehler
Nach welcher Zeit werden Influenza Proteine auf der Oberfläche der Zelle präsentiert?
20 Minuten nach Eintreten der Zelle
Aus wie vielen Teilen besteht TAP?
Welche Eigenschaft hat die TAP Seite ins ER?
Welche Eigenschaft hat die TAP Seite ins Cytosol?
TAP 1 und TAP 2
Ins ER: Hydrophob
Ins Cytosol: ABC Domäne (ATP Binding)
Wofür steht bei TAP das “ABC”?
Welche Stellen des Peptids sind für TAP wichtig um ins ER transportiert zu werden?
ATP Binding
Peptidstellen: 1-3 und 9
Wie kann man Peptidaseaktivität experimentell beobachten?
FRET Assay: Protein + FRET
-> Spaltung Lichtsignal
Wo befinden sich die Peptidasen PSA und BH?
Was ist das “Produkt”?
PSA: Puromycin sensitive Aminopeptidase
BH: Bleomycin Hydrolase
Im Cytosol
Schneiden am N-Terminus -> Sollen CTL Epitop herstellen
Wie heißt die Aminopeptidase im ER?
Durch was wird sie induziert? (Molekül)
Was ist ihre Aufgabe?
ERAP1
Interferon Gamma induziert
MHC Peptid auf die richtige Länge bringen
Wie lang ist das Peptid zu diesen Zeitpunkten:
Nach Proteasom
Cytosolische Aminopeptidase + Protease
Aminopeptidase im ER
Nach Proteasom: 15-10 AS
Nach Cytosol: Ungefähr 10 AS
Nach Aminopeptidase im ER: 10-8 AS
15 AS Peptid
Welche Seite wird geschnitten?
Was kann man über die einzelnen Bereiche des Peptids und ihre Bedeutung (Enzyminteraktionen/TAP) sagen?
-> Beginne am N-Terminus
N-Terminus
Ca. 5 AS Substrat für cytosolische Aminopeptidase + TAP
Ca. 2 AS ER Aminopeptidase
Ca. 8 AS MHC I Epitop
C-Terminus
Proteinabbau
Wie verändert sich die HWZ wenn am C-Terminus weiter AS angefügt werden
Wie verändert sich die HWZ wenn am N-Terminus weiter AS angefügt werden
C-Terminus: HWZ nicht verändert
N-Terminus: HWZ verlängert
Wie ist die HWZ von Proteinen im Zytosol?
Warum ist es so?
Ca. 5 Sekunden
Peptidasen schneiden Peptide
Wie viele Peptidfragmente bildet das Proteasom pro Sekunde?
Wie viele werden davon auf der Oberfläche exprimiert?
2*106
Davon 100-150 auf Oberfläche exprimiert
Virale Immunevasionsmechanismen
Was macht das virale Protein US2?
Blockiert MHC I damit es nicht mehr ins ER kommt
Virale Immunevasionsmechanismen
Was macht das virale Protein US3?
Chaperon -> Verhindert, dass das ferige MHC I auf Zelloberfläche wandert
Virale Immunevasionsmechanismen
Was macht das virale Protein US6?
TAP blockieren
Virale Immunevasionsmechanismen
Was macht das virale Protein US11?
MHC I kann nicht mehr von Cytosol in ER transportiert werden
Virale Immunevasionsmechanismen
Was macht das virale Protein US18?
Warum ist diese Funktion wichtig für das Virus?
Moleküle tun so als ob sie MHC Moleküle wären
Halten MHC auf Oberfläche
Brauche MHC I auf Oberfläche für NK! -> Sonst Zelle getötet
Was passiert bei Crosspresentation/Cross-priming?
Extrazelluläres Peptid auf MHC I präsentiert
Welche Zellen sind zu Crosspresentation fähig?
- B-Zellen
- Makrophagen
- DCs
- LSECs
Was sind LSECs?
Epithelzellen der Leber
