Plasmid Herstellung Flashcards
T to A site
Was ist das?
Die T2A Site stammt ursprünglich aus einem Virus, welcher polycistronische RNA transkribiert, d.h. auf einem RNA Strang befinden sich mehrere abzulesende Proteine.
Die T2A Site kodiert für eine Aminosäureabfolge, die in der Lage ist das entstehende noch zusammenhängende Protein an der Stelle der T2A Site zu schneiden.
LTRs
Was ist das?
LTRs = Long Terminal Repeats
Kommt von Viren
F to A site
Was ist das?
Cytosin ist gegen Adenin ausgetauscht
-> Kann sich auf Genexpression auswirken, wenn die Veränderung in der Promotorregion geschehen ist.
IRES
Was ist das?
Internal Ribosomal Entry Site
Kann das Ribosom direkt rekrutieren
Puromycin (Antibiotikum)
Wie wirkt es?
Puromycin bindet anstatt einer Tyrosyl-tRNA an die Eingangsstelle (A-Stelle) des Ribosoms. Ein Teil des Moleküls ähnelt dabei dem 3’-Ende (CCA) der Aminoacyl-tRNAs. Aus diesem Grund wird die sich in der Elongation befindliche Polypeptidkette auf den Pseudoaminosäurearm des Puromycins übertragen und es kommt zu einer verfrühten Termination der Translation.
(Inhibierung des Proteinimportes: Puromycin hemmt den Proteinimport in Mitochondrien, indem es eine intramitochondriale, ATP-abhängige Reaktion behindert.)
Welche zwei Hüllen für hergestellte Viren existieren?
VSV und Galf
Hüllen von Viren können dazu dienen entweder alle Zellen zu befallen, oder nur spezifische. Wie nennt man dies?
Alle Zellen: Amphotroph
Spezifische Zellen: Ecotroph
Wie können zwei Plasmide ohne Verwendung von Restriktionsenzymen verbunden werden? (Name)
Infusion Cloning
