TEMA 2.3 CRECIMIENTO BACTERIANO Flashcards
CRECIMIENTO:
- AUMENTO DE TODOS LOS CONSTITUYENTES QUÍMICOS DE LA CÉLULA
- AUMENTO DE TAMAÑO Y DIVISIÓN CELULAR
- AUMENTO DE LA POBLACIÓN
tipos de crescimiento:
a) Crecimiento individual o aumento de tamaño
b) Crecimiento poblacional o incremento del número
de células
Ciclo celular procariótico
Etapas que transcurren desde la formación de una nueva célula y la siguiente división
Tiempo de generación (g)
Tiempo que transcurre entre generación y generación
Mecanismos de división en las bacterias
1-Fisión binaria transversal o bipartición
2-Gemación
3-Ciclos más complejos
Etapas del ciclo celular
- Crecimiento en tamaño y masa
Entrada de nutrientes y metabolismo - Replicación del cromosoma
Masa de iniciación Modelo Thetha Duplicación oriC - Elongación en la región ecuatorial y formación septo
Síntesis de membrana y pared Separación de los dos cromosomas Formación del septo
- Elongación en la región ecuatorial y formación septo
- División
Crecimiento poblacional
Incremento del número de células por unidad de tiempo
Crecimiento exponencial o balanceado
El número de células y todos sus constituyentes químicos se duplican en un mismo periodo de tiempo (tiempo de generación, g constante)
La población se duplica en cada generación
2n
g en esa etapa es constante
Cuando hayan pasado un tiempo T y hayan transcurridos n generaciones habrá Nt bacterias
n° de celulas
Nt = 2n
Si partimos de un número inicial de células igual a No
el nr de generaciones n = n
el tiempo de cultivo T = nx g (la generacion)
el n° total de celulas Nt = 2n xNo
expression exponencial *see page 10
Nt = 2^n x No
Nt: número total del células del cultivo n: número de generaciones
No: número inicial de células
T: tiempo de incubación
g: tiempo de generación
si hacemos el logaritmo
logNt = nlog2+ logNo
logNt-logNo / log 2 =n
logNt-logNo/0.301030 =n
g= T/n
Nt: número total del células del cultivo n: número de generaciones
No: número inicial de células
T: tiempo de incubación
g: tiempo de generación
Sabiendo Nt, No y T podemos calcular n y g
Concepto de tasa o velocidad de crecimiento * check pic
La tasa o velocidad de crecimiento es inversamente proporcional a g
La inclinación de la pendiente es proporcional a μ
quanto mas aumenta la tasa de crescimiento mas diminuye el tiempo de division (g)
3.3. Crecimiento poblacional en cultivos cerrados o discontinuos
El crecimiento exponencial no se da indefinidamente
fase lag o de reajuste
-Adaptación del inóculo -
Apenas existe división celular - no hay reproducucion celular
Aumento del tamaño -
Duración variable:
edad del inóculo-the older the more adaptacion time necessary
composición del medio- composto mas de medio mas podre
medio mas rico mas rapido division
fase exponencial
g constante `
- μ es máxima y constante
Es la etapa elegida para:
-estudios enzimáticos y estructurales
-obtención de metabolitos ex insulina
fase estacionaria
-No hay crecimiento poblacional (división = lisis)
Agotamiento nutrientes, oxígeno
Acumulación metabolitos tóxicos (ácido láctico)
Esporulación
fase de muerte
muerte exponencial
Cultivo continuo
sistema que permite mantener el crecimiento bacteriano en fase exponencial
Hay aporte constante de nutrientes y retirada de desechos
*Procesos industriales *Estudios fisiológicos
Medida del crecimiento poblacional
- Determinación del número de células
- Determinación de masa bacteriana
- Determinación de actividades metabólicas o de componentes celulares
Determinación del número de células
Tipos de células: Viables (cultivables y no cultivables) y no viables
Métodos directos:
- Contador Coulter
Métodos indirectos:
- Recuento en placa
- Membranas de filtración
- Determinación del número más probable (NMP)
metodos directos : contador coulter
-Contadores electrónicos de partículas (Contador Coulter) -Se cuentan células viables y no viables
- barcetrias van de pole positivo al pole negativo
- hay un poro y cada vez que passa bacteria se corta la coriente el electrodo manda un sinal al contador
Métodos indirectos
a) Recuento en placa
-Consiste en enumerar las colonias aparecidas tras sembrar un volumen determinado de cultivo.
-Se cuentan los viables cultivables.
- exige diluciones seriales con una solucion isotonica
b) Recuento sobre filtros de nitrocelulosa de células viables
-Se utilizan filtros de membrana que retienen a las bacterias.
-Adecuado para muestras diluidas. Ej. Agua de manantial.
- Se cuentan los viables cultivables
c) Determinación del número más probable (MPN)
-Estimación de los microorganismos presentes en una muestra en función de la turbidez que originan en medios de cultivo líquidos.
Es un método estadístico
- rojo es positivo y amarillo negativo
–Se siembran 3 diluciones decimales en tres set de tubos con medio de cultivo
–Se estiman las células viables cultivables
3.5.2. Determinación de masa bacteriana
1-Métodos directos:
- Peso húmedo
- Peso seco
2-Métodos indirectos: -
-Medidas ópticas
Medidas ópticas
Espectrofotometría
Se mide la turbidez de un cultivo mediante:
1-Absorbancia o densidad óptica (D.O.)
2-Transmitancia
Mayor absorbancia à Menor luz transmitida à Mayor masa celular (mayor número de células)
