Virologie : Partie 8 (antiviraux et vaccins) Flashcards
Quelles sont les méthodes de diagnostic direct des virus ?
- Mise en évidence d’anticorps ayant des propriétés antivirales
- Mise en évidence d’anticorps sans propriétés antivirales
Quelles sont les méthodes de mise en évidence d’Ac ayant des propriétés antivirales ?
- Séroneutralisation
- Inhibition de l’hémagglutination
Que permet la séroneutralisation ?
● Inhiber l’entrée du virus dans la cellule. Si inhibition => AC neutralisant
● Effet cytopathique n’a pas lieu en présence d’AC neutralisants
Comment observer la séroneutralisation ?
Prend du sérum de patient => incubation avec un extrait qui a du virus => Ensemble sur une C => on regarde si l’infection se fait ou non
Quels sont les virus qui permettent d’observer l’inhibition de l’hémagglutination ?
Réservé aux virus capables d’agglutiner naturellement les hématies : grippe et rougeole
Comment observer l’inhibition de l’hémagglutination ?
En bloquant le virus, les Ac empêchent d’agglutiner avec les hématies => Hématies sédimentent dans le puis
Quelles sont les méthodes de mise en évidence d’Ac sans des propriétés antivirales ?
a. Agglutination
b. ELISA
c.TROD
Comment fonctionne le test d’agglutination (virus) ?
Coupler artificiellement un virus à un support particulaire => présence d’Ac dans le sérum traduit par une agglutination visible à l’œil nu => Formation d’un agglutinat
Que permet le test ELISA en diagnostic indirect ?
● Permet également de rechercher des Ac (IgM, IgG)
● Permet de détecter les primo-infections
● Permet de détecter les infections récentes des infections précédentes
Caractéristiques des IgM trouvé par ELISA ?
Non spécifique => témoigne d’une infection présente au moment du prélèvement => infection précoce
Caractéristiques des IgG trouvé par ELISA ?
Spécifique du virus contracté : témoigne d’une infection passée > 7j => produits + tard
Que sont les primo infection ?
Apparitions des Ac entre deux sérums d’un patient =>
Pour tester on demande au patient 2 types de tests :
● Prélèvement à t0 : le patient peut ne pas présenter d’Ac
● Prélèvement 15 ou 21 jours + tard : si le patient est vraiment infecté, il présentera des Ac contre l’infection virale
Principe des TROD ?
=> Test Rapide d’Orientation du Diagnostic
* Détection rapide (10aine min) des IgG et IgM antiviraux sur sang capillaire
Quels sont les différents agents thérapeutiques pour les infections virales ?
- Virucides : inactivent les virus
- Antiviraux : inhibent la réplication virale
- Immunomodulateurs : augmentent la réponse immune
Nature des agents virucides ?
- Détergents : lavage des mains => désorganise phospholipides membrane virus
- Solvants organiques
- Lumière ultra-violette
Action des agent virucides ?
- Provoquent inactivation des virus en dehors de la C hôte => inactivent le virus
- Utilisés pour prévenir transmission de
l’infection virale - Peuvent ê toxiques : endommager la C hôte => utilisation limitée.
Quels sont les patients qui peuvent utiliser les agents immunomodulateurs ?
personnes immunocompétentes
Quel est le rôle des agents immunomodulateurs ?
Augmenter la réponse immune
Comment est augmenter l’action de la réponse immuniataire avec les agents immunomodulateurs ?
- AC étrangers injectés au patient
- Interférons => très importants dans la lutte antivirale
- Augmenter l’activité des C médiatrices de l’immunité cellulaire
Qu’est-il important de connaitre pour utiliser efficacement les agents antiviraux ?
Le cycle de multiplication du virus
Quelles sont les conditions que doivent remplir les Agents antiviraux ?
- Inhiber de façon spécifique des événements liés aux virus => spécifiques du virus
- Ne doivent pas interférer avec le métabolisme de la C hôte
- AQvoir un spectre d’activité restreint
Quels sont les sites d’action des antiviraux ?
Soit
- attachement à la cellule hôte
- libération du génome viral
- réplication du virus
- assemblage et formation de virion
Principe des Antiviraux ciblant l’attachement du virus à la cellule hôte ?
Saturent les récepteurs cellulaires en introduisant dans l’organisme des molécules analogues à la structure d’attachement du virus
Molécules développées en rapport avec le CD4 pour le VIH ?
- CD4 soluble
- CD4-Ig2 (PRO542)
- AMD3100
- MARAVIROC
Problématiques du CD4 soluble ?
1) Perturbait le fonctionnement du système immunitaire
2) Instable => dégradé très rapidement
Caractéristiques du CD4-Ig2 (PRO542) ?
- CD4 couplé à une IgG
- Version + stable du CD4.
- Tétramère formé d’une IgG + CD4
- Peut réduire la quantité du virus in vivo
Molécules utilisée pour empêcher la fusion avec la membrane par un virus ?
T-20 FUZEON => VIH
Cible du MARAVIROC ?
Se lie au CCR5 => virus ne peut pas s’y lier : bloque l’activation des R aux chimiokines
Action des “anciens” T-20 ?
- Peptides dérivés/analogue de gp41=> séquence de 36 AA de la glycoprotéine gp4
- Bloque l’interaction entre gp41 et prot de la membrane cellulaire durant la fusion
- Réduction de la charge virale de 2 log dans le plasma des patients.
Caractéristiques de la nouvelle génération de T-20 ?
- T-1249 : 39 AA de la gp41
- Utilisé en trithérapie avec d’autres ttt ==> VIH
Quelles sont les stratégies d’empêchement d’attachement du virus avec les antiviraux ?
- Liaison aux récepteurs
- Fusion avec la membrane
Molécules utilisées pour empêcher la libération dans le cytoplasme du génome de l’influenza virus ?
Inhibiteur de la protéine M2 => amantadine et rimantadine
Mécanisme d’action de l’amantadine et la rimantadine ?
Interfère avec prot virale M2 => bloque son activité canal ionique nécessaire aux mécanismes de fusion + désassemblage => pas de relargage du génome du virus
Cibles des antiviraux qui ciblent la réplication virale ?
Inhibition enzymes de la réplication :
- Retroviridae (VIH) : transcriptase inverse
- Herpesviridae : ADN polymérase
Quelles sont les stratégies pour cibler la réplication virale ?
- Analogue des nucléosides
- Molécules agissant directement sur ADN polymérase
- Nucléosides phosphorylés artificiels
- Composés aromatiques
Comment obtient on des analogue des nucléosides ?
Modification de nucléosides naturels : Absence groupement hydroxyde en position 3’ du désoxyribose
Comment fonctionnent les analogue des nucléosides ?
Empêche la liaison à un autre nucléoside => bloque l’insertion d’un autre nucléoside dans la séquence
Vrai ou Faux les analogue des nucléosides ne sont pas actif immédiatement ?
VRAI !
Agissent après avoir été transformés dans la C infectée en composés tri phosphorylés par les enzymes cellulaires
Comment les analogues des nucléosides agissent-ils ?
- Par inhibition compétitive au niveau de la RT ou ADN polymérase => Compétition entre les analogues de nucléosides et les nucléosides
- Lorsque l’enzyme va incorporer un analogue de nucléoside : élongation de la chaîne d’ADN viral en formation = stoppée
- Affinité + grande pour la DNA polymérase virale que pour les ADN polymérases cellulaires
Caractéristiques de l’Idoxuridine ?
- Empêchent les infections par l’herpès
- Analogue des pyrimidines
- Toxique et cancérigène.
- Usage : kératite épithéliale herpétique, virus herpès
Caractéristiques de l’Acyclovir ?
- Analogue des purines → modification pentose
- Anti-herpes (HSV-1, HSV2 et VZV)
- Sélectif des C infectées par le virus => Seules les C infectées par le virus peuvent convertir le pro-médicament en acyclovir actif
Mécanisme d’activation de l’Acyclovir ?
Thymidine kinase phosphoryle l’acyclovir =>
devient acyclovir monophosphate => phosphorylée par des kinases cellulaires
=> di- puis tri-phosphaté => forme tri phosphorylée va ê en compétition avec les nucléosides => incorpore le faux nucléoside => ribose modifié => ne peut pas coller d’autres chaînes de nucléotides à la suite
Avantage de l’Acyclovir ?
Sélectif des C infectées : si la C n’est pas infectée => pro-médicament pas transformé en médicament actif
Quelles sont les molécules utilisée en chimiothérapie anti-VIH ?
Inhibiteurs nucléosidiques de la reverse transcriptase (INRT) comme : AZT
Caractéristiques de l’Azidothymidine (AZT) ?
- Dépourvu de 3’OH => remplacé par radical azide => bloque la reverse transcriptase
- Triphosphorylation pour être actif /!\ VIH utilise uniquement des enzymes cellulaires /!\
- L’AZT = promédicament
- Faible spécificité => cytotoxicité
Principe de fonctionnement des INRT ?
Incorporation de faux nucléosides donc pas de conversion ADN-ARN => stoppe la conversion => VIH ne peut pas s’exprimer
Nom d’une molécule agissant directement sur ADN polymérase ?
Foscarnet (Foscavir®) → sel trisodé de l’acide phosphonoformique
Mécanisme d’action du Foscavir® ?²
Se fixe proche du site actif de l’enzyme ADN polymérase => bloquer son action => changement de conformation => Bloque la réplication de leur ADN
Quelles pathologies/patients pour Foscavir® ?
- Personnes HIV positives + cytomégalovirus
- TTT actif contre VZV et HSV
Caractéristiques des Nucléosides phosphorylés artificiels ?
Subissent que 2 phosphorylations avant d’être actifs sur l’ADN polymérase virale
Noms de Nucléosides phosphorylés artificiels ?
- Cidofovir : actif contre CMV et HBV /!\ peu de spécificités /!\
- Ténofovir : renforce les ttt antirétroviraux pour sujets infectés par HIV avec résistances
Caractéristiques des Composés aromatiques utilisés pour bloquer la réplication virale ?
- Inhibiteurs puissants de la transcriptase inverse
- Inhibiteurs non nucléosidiques de la reverse transcriptase (INNRT)
Mécanisme d’action des INNRT aromatiques ?
Fixent à une poche hydrophobe sur l’enzyme proche du site actif => induisent un changement de conformation de l’enzyme => devient inactive => empêchant la réplication du virus
Quelles sont les stratégies des antiviraux ciblant la maturation libération des virus ?
- Anti-neuraminidase (grippe)
- Anti Protéase (VIH)
Nom de molécules entrant dans la stratégie Anti-neuraminidase ?
Inhibiteurs de la neuraminidase = analogue de l’acide sialique
* zanamivir
* tamiflu
Action de la zanamivir et le tamiflu ?
Reproduire les liaisons qui existent entre la neuraminidase et son substrat avec les molécules anti neuraminidases => Molécules restent bloquées dans le site actif => bloquent
la libération du virus
Action de l’anti protéase (utiliser pour VIH) ?
Protéase aspartique scinde les polyprotéines en composants matures
=> molécules anti protéases vont empêcher aux virus VIH de devenir un virus mature : on synthétise des analogues de ce substrat pour entrer en compétition avec le substrat naturel => empêcher la maturation des VIH
Mécanisme d’action générale des molécules qui inhibes l’intégration des virus ? (VIH)
Prot inhibitrice de l’intégration du génome du virus VIH => Inhibiteurs qui empêchent le phénomène de fusion, d’attachement, des
molécules inhibitrices de la reverse transcriptase, inhibiteurs de l’intégrase, inhibiteurs de la protéase
Différence entre les vaccins et les antiviraux ?
- Vaccins = prévention
- Antiviraux = thérapeutique après infection
Principe des vaccins ?
Ag qu’on va administrer à un individu afin de stimuler son système immunitaire
Définition d’un vaccin ?
Préparation antigénique injecté à un patient de façon à provoquer une réaction immunitaire => Aboutit à la production d’AC dirigés contre cet Ag
Quels sont les types de réponse obtenues après la vaccination ?
On va avoir une réponse humorale ET cellulaire
Différence de réaction entre la première injection de vaccin et la seconde ?
1) Réponse immune : faible et lente => surtout des IgM (non spécifiques) produits → petite réponse immunitaire
2) Réponse immunitaire est bcp + importante, => appel aux LB mémoire => production des IgG (spécifiques) => protège potentiellement d’une nouvelle rencontre avec l’Ag
Qu’est-ce qu’un adjuvant ?
Molécules qui permettent de booster la réponse immunitaire aux vaccins
Rôle des adjuvants ?
Augmentent recrutement des CPA pour augmenter réponse en AC et réponse immune
Mode d’action des adjuvants ?
- Effet dépôt : lent relargage de l’Ag au point d’injection
- Induction d’un environnement pro-inflammatoire
- Oriente vers une réponse humorale et/ou cellulaire
Quels sont les adjuvants “célèbres” ?
- Hydroxyde
- Phosphate d’aluminium
Quels sont les différents types de vaccins ?
- Les vaccins vivants atténués
- Les vaccins inactivés
- Les vaccins antigènes vaccinaux purifiés
- Les vaccins ARNm
Que sont les vaccins vivants atténués ?
- Virus dont l’infectivité a été détruite par un agent chimique ou la chaleur
- Sous-unités virales constituées de protéines capables d’induire une réponse immunitaire protectrice
Quels sont les vaccins non réplicatifs disponibles parmi les vaccins inactivés ?
- Grippe
- Hépatites A et B
- Poliomyélite
- Rage
Comment sont faites les injection des vaccins inactivés ou tués ?
Injections se font par voie intramusculaire ou sous cutanée
Que sont les vaccins à virus vivants atténués ?
Composés de virus capables de se multiplier dans l’organisme sans manifestation
pathologique
Mode d’action des vaccins à virus vivants atténués ?
Capables de produire une réponse immune comparable à l’infection naturell
=> Virus atténués produisent une meilleure immunité que les virus tués
==> /!\ Evite chez les personnes immunodéprimées et chez les femmes enceintes
Comment sont obtenus les vaccins à virus vivants atténués ?
- Passages successifs en culture
- Suivi de la sélection des souches non virulentes
- Souches non virulentes = vaccins
Comment sont produits les antigènes vaccinaux purifiés ?
Le vaccin est produit à l’aide de microorganismes :
- Levures
- Cellules de mammifères
- Baculovirus
Production du vaccins du papillomavirus ?
- non cultivé in vitro
- certains HPV sont associés au cancer du col utérin
- Amplification de la protéine L1 via le système baculovirus recombinant : insère le gène de la protéine L1 dans le génome du baculovirus, puis on infecte des cellules d’insecte => permet d’obtenir des particules
Production du vaccin Pfizer et BioNTech ?
- Vaccin ARNm => protéine Spike avec ajout de 2 prolines pour stabiliser la structure de la structure de la protéine S sous forme dimérique
- Eviter ARNm de la protéine Spike modifiée ne soit dégradée, une structure lipidique est ajoutée : Les nanoparticules à base de lipides => protéger des dégradations enzymatiques et facilitent la fusion avec la membrane cytoplasmique
Production du vaccin Moderna ?
Semblable au vaccin Pfizer, mais diffère au niveau de la composition
