Virologia Flashcards
Qual a colheita de amostra em virologia que não se faz em bacteriologia?
Zaragatoas
Quais as colheitas de amostras possíveis?
Zaragatoas
Serologia
Fezes em recipientes esterilizados (coprocultura)
Aspiração de secreções
Para que quadros clínicos usamos zaragatoas?
Zona de vesículas da varicela ou herpes - requer pressão para rebentar vesícula
COVID 19 - fazer aspiração da nasofaringe levaria a aerossóis
Para que quadros clínicos usamos serologia?
Miocardite & pericardite
Contudo, a serologia não é o melhor método para o diagnóstico agudo (os anticorpos demoram a surgir) MAS biopsia/colheita de derrame pericárdico é invasivo/não há derrame
Para que quadros clínicos usamos coprocultura?
Diarreias
Para que quadros clínicos usamos aspiração?
Infeções do trato respiratório
É possível diagnosticar uma pneumonia pneumocócica através de uma zaragatoa da nasofaringe? E nas infeções respiratórias virais?
Não porque somos frequentemente portadores de pneumococos
Sim porque não somos portadores e aquando de uma infeção respiratória baixa, os vírus estão presentes em todo o aparelho respiratório
Como é feito o transporte de amostras?
Até 48h
4ºC (refrigerado não congelado)
Normas de segurança (ex. COVID19 coloca-se tubo com secreções dentro de contentor dentro de outro contentor)
Quais os métodos de diagnóstico utilizados?
Exame cultural/isolamento = efeito citopatogénico nas células do laboratório
Pesquisa de Ag
Deteção do genoma
Serologia
Qual o método de diagnóstico não utilizado?
Microscopia eletrónica - só usado na investigação, não no diagnóstico
Qual o método de diagnóstico pouco utilizado? 2 exemplos de utilização para este método
Citologia = pesquisa de efeito citopatogénico do vírus nas células do doente (exame cultural é nas células do laboratório)
Papanicolau -> visualizar coilócitos causados pelo HPV
CMV -> visualizar células muito aumentadas
Em que meio é que os vírus não crescem? Porque?
Gelose sangue porque são parasitas intracelulares obrigatórios. Só crescem em cultura de células
Como é feito o exame cultural?
- Semear a amostra (ex: urina, LCR)
- Se a amostra tiver vírus, os vírus entram nas células e provocam alterações celulares - efeito citopatogénico do vírus.
- Visualização das alterações num microscópio invertido (tem as objetivas por baixo e permite ver o frasco inteiro e o efeito citopatogénico nas células da cultura celular)
- Confirmamos o resultado num microscópio de fluorescência
Efeito citopatogénico = rastreio
Imunofluorescência direta = confirmatório
Quais as vantagens do exame cultural?
Isolamento das estripes
Específico (imunofluorescência)
Quais as desvantagens do exame cultural?
Laborioso
Demorado
Perigoso
Qual a aplicação principal de exames de cultura?
Laboratórios de referência para estudos epidemiológicos
Qual o princípio da pesquisa de Ag?
Deteção de Ag de vírus por métodos imunoenzimáticos, imunocromatográficos, imunofluorescência ou imunoperoxidase.
Atualmente por imunocromatográficos
A pesquisa de Ag é utilizada principalmente para?
Vírus respiratório & gastroenterites
Quais as vantagens da pesquisa de Ag?
Rápido (15-30min)
Económico
Não requer treino por parte do técnico
Boa especificidade
Quais as desvantagens da pesquisa de Ag?
Pouca sensibilidade
Possível ter teste negativo e infeção (relacionado com pouca sensibilidade)
Quais as principais formas utilizadas para a deteção do genoma?
Amplificação de ácidos nucleicos
PCR & RT-PCR
Qual a diferença entre PCR e RT-PCR?
PCR = normal (vírus de DNA) RT-PCR = transcriptase reversa logo usado para vírus de RNA
O que é o multiplex PCR?
Pesquisa na mesma reação vário alvos em simultânea
Qual o tipo de infeção mais mortal? (não necessariamente com maior mortalidade mas que mata mais pessoas por ano)
Infeção respiratória
Como é que se aumenta a sensibilidade nas amostras respiratórias nos adultos?
Colher amostras respiratórias baixas porque as superiores tem menos sensibilidade
Quais as vantagens da deteção do genoma?
Sensibilidade
Especificidade
Deteção simultânea de vários vírus
Deteção de carga viral
Quais as desvantagens da deteção do genoma?
Custo
Risco de contaminação
Quais os métodos mais utilizados na serologia hoje em dia?
ELISA
Quimioluminescência
Qual a utilidade dos métodos serológicos?
- Infeção crónica - HIV, hepatites… é bastante útil!
- “Estado imunitário/infeção antiga” - serve para determinar as IgG: quando temos IgG
significa que a pessoa já teve contacto com o vírus. O facto de ter IgG não significa necessariamente que os anticorpos conferem imunidade vitalícia.
NOTA: agudo não porque Ac demoram a aparecer
