Micologia

Question 1

O que é a micologia?

Answer 1

Estudo dos fungos

Question 2

Quais os mecanismos patogénicos dos fungos

Answer 2

1. Colonização e doença - o fungo está no nosso organismo, isto é, coloniza-nos e depois multiplica-se e causa doença.
2. Micotoxicoses - fungos produtores de toxinas; são as toxinas que, ao ser ingeridas, causam doença.
   Ex: amatoxina (amanita phalloides), alcaloides do centeio (Claviceps purpúrea)
3. Hipersensibilidade

Question 3

As infeções fúngicas são geralmente infeções ________ que vão aparecer em doentes ________.

Answer 3

oportunistas

imunocomprometidos

Question 4

Quais as patologias associadas aos fungos?

Answer 4

HIV/SIDA:
• Pneumonia por Pneumocistis jiroveci
• Meningoencefalite por Cryptococcus neoformans
• Histoplasmose causada pelo Histoplasma
Doença pulmonar:
• DPOC e ASMA - Aspergillus → aspergilose broncopulmonar alérgica e aspergilose pulmonar crónica
• Tuberculose (nas “cavernas tuberculosas”) – Aspergillus
Neoplasias
• Aspergilose invasiva por Aspergillus
• Candidíase invasiva por Candida Albicans

Question 5

Quais as características gerais dos fungos? (4)

Answer 5

• Células eucarióticas, heterotróficas
• Parede celular com quitina
• Membrana celular com ergosterol
• Têm dois tipos de reprodução – sexuada e assexuada; o mais frequente é a reprodução
assexuada.

Question 6

Quais as categorias?

Answer 6

Leveduras, bolores/fungos filamentosos, dimorfos

Question 7

Qual a morfologia das leveduras? (3)

Answer 7

unicelulares
redondos ou ovais
gram +

Question 8

Qual a morfologia dos bolores/fungos filamentosos? (5)

Answer 8

pluricelulares
constituídos por hifas (Nota: hifas é nome que se dá aos filamentos)
ao conjunto de hifas dá-se o nome de micélio
as hifas podem ser septadas ou não septadas/cenocítica
produzem esporos em condições adversas.

Question 9

Qual a morfologia dos dimorfos?

Answer 9

Transitam de uma forma para a outra dependendo das condições de crescimento (variam em função da temperatura, CO2 e outros fatores…); são muito poucos.

• Em meios ricos → forma de levedura – ex: no homem
• Em meios pobres → forma filamentosa – ex: na natureza, em temp. ambiente.

Question 10

Como é que os dimorfos são adquiridos?

Answer 10

No meio ambiente por inalação na sua forma filamentosa; no corpo humano vão alterar para levedura e é nessa forma
que vão depois causar patologia
Filamentoso = infecioso
Levedura = patogénico

Question 11

Qual a reprodução das leveduras?

Answer 11

Assexuada
Gemulação: A célula mãe emite um prolongamento que dará origem à célula filha.
Clamidosporos: são estruturas de resistência, constituídas de reserva nutritiva e membrana bastante espessa, permitindo resistir aos fatores externos, semelhantes aos esporos.

Question 12

O que são pseudo-hifas?

Answer 12

Na gemulação, a nova célula não se separa, dando origem a uma gémula alongada

Question 13

Como se distinguem as hifas das pseudo-hifas?

Answer 13

▪ Nas hifas os lados são paralelos, enquanto que nas pseudo-hifas não.
▪ As pseudo-hifas são estranguladas na zonas dos septos.

Question 14

Qual a reprodução dos bolores?

Answer 14

Esporos sexuados: resultam da fusão de 2 gâmetas.
Esporos assexuados:
• Esporangiosporos (fungo não septado): quando produzidos dentro de uma estrutura sacular
• Conídios (fungo septado): quando livres
Extensão da hifa: reprodução sexuada; fusão de hifas de dois micélios diferentes

Question 15

Qual a particularidade dos esporos?

Answer 15

Só produzidos em condições adversas.
Para identificar bolores temos de cultivar em meios pobres para induzir a formação de esporos, pois cada bolor tem um tipo de esporos caraterístico que nos vai permitir fazer a identificação

Question 16

Como é que os bolores são adquiridos?

Answer 16

São adquiridos geralmente no meio ambiente por inalação de esporos; no corpo humano encontram-se na forma filamentosa
Infecioso = esporo
Patogénico = filamentoso

Question 17

Quais os tipos de amostras utilizadas? Quais é que são as amostras específicas para a micologia?

Answer 17

Sangue, LCR, urina, biópsia

Específico = unha, cabelo, escama cutânea (colhe-se à periferia porque é a zona mais ativa)

Question 18

Como é que se colhe a unha para amostra?

Answer 18

1. Fazer limpeza prévia das unhas, escovando com água e sabão.
2. Cortar com tesoura e desprezar a parte descolada da unha
3. Com lâmina de bisturi, raspar as áreas mais profundas e pulverulentas
4. Colocar este material entre lâminas e vedá-las com fita adesiva.

Question 19

Os fungos crescem em anaerobiose ou aerobiose?

Answer 19

Aerobiose (nunca em anaerobiose)

Question 20

Quais os tipos de exame direto?

Answer 20

Fresco, hidróxido de potássio (KOH), tinta da china, método de Burri

Question 21

Como é feito o exame de hidróxido de potássio? Para que amostras?

Answer 21

Usa-se em amostras de grande celularidade (unha, escama, cabelo, biópsia)
Cobre-se a amostra com KOH (hidróxido de potássio) e este vai dissolver a
queratina, obtendo-se assim uma amostra mais fina, facilitando a visualização
das estruturas do fungo.

Question 22

Como é feito o exame de tinta da china? Para que amostras?

Answer 22

Usa-se no LCR, urina ou sangue
Numa lâmina coloca-se 1 gota amostra + 1 gota tinta China, e cobre-se com a lamela
A tinta da china vai corar o LCR (ou outra amostra) de preto, permitindo destacar a cápsula do Cryptococcus.

Question 23

Como é feito o exame do método de Burri?

Answer 23

Basicamente igual à tinta da china mas depois faz-se coloração com roxo de
metileno, que vai corar os Cryptococcus, destacado-os mais.

Question 24

Quais os exames importantes para a meningite?

Answer 24

Cryptococos: tinta da china e método de Burri
Hoje em dia faz-se teste de pesquisa de antigénio, que são mais fiáveis, portanto estas técnicas estão a perder alguma importância.

Question 25

Qual o meio utilizado para o exame cultural?

Answer 25

Meio de Sabouraud
Se amostras tiverem flora saprófita: Gelose Sabouraud Cloranfenicol-Gentamicina (tem antibiótico para inibir a maioria das bactérias gram + ou -)

Question 26

A que temperatura crescem os fungos?

Answer 26

30ºC - Crescem a maioria dos fungos saprófitas e patogénicos

37ºC - Crescem a maioria dos fungos patogénicos; não crescem os fungos saprófitas

Question 27

Quais os géneros das leveduras?

Answer 27

Candida (mais frequente), Cryptococcus, Malassezia, Trichosporon

Question 28

Quais a patologias associadas a candida?

Answer 28

Candidíase oral e esofágica, vaginite, cistite, endocardite, meningite, bacteriémia, doença disseminada

Question 29

Quais a patologias associadas a cryptococcus?

Answer 29

Meningo-encefalite, infeção pulmonar, doença disseminada envolvendo a pele, lesão no osso e articulações

Question 30

Quais a patologias associadas a malassezia?

Answer 30

Doença dermatológica

Question 31

Quais a patologias associadas a trichosporon?

Answer 31

Lesão do cabelo (piedra branca), lesão da pele, doença disseminada

Question 32

Como é que se faz a identificação das leveduras?

Answer 32

1º deteção em exame direto com KOH, tinta da china, e coloração de Gram
2º cultura em Sabouraud (24-72h)
3º identificação definitiva com testes bioquímicos e prova de filamentaçao precoce (Candida albicans)

Question 33

Como é que se faz a prova da filamentação precoce? O que é uma prova positiva?

Answer 33

Colónia de levedura em suspensão em soro bovino fetal
Incubar 3h (máximo) a 37ºC
Colocar 1 gota entre lâmina e lamela e observar ao microscópio 40x
\+ = forma-se filamento sem constrição na base (C. albicans)
- = filamentos com constrição ou não se formam filamentos ou filamentos sem constrição depois de 3h

Question 34

Quais as diferenças entre Candida e Cryptococcus?

Answer 34

Candida = Cheira a fermento de padeiro & não tem cápsula & urease -
Prova de filamentação + = albincans
Cryptococcus = cápsula & urease +

Question 35

Quando é que se faz TSA em Candida?

Answer 35

Candida tem resistências praticamente fixas logo há guidelines já estabelecidos. Faz-se TSA quando:
Infeções graves, infeções que não respondem à terapêutica, candidas raras em que não está definido o antibiótico

Question 36

Qual a Candida associada a surtos hospitalares?

Answer 36

Auris - resistência a todos os antibióticos

Question 37

Qual a divisão da patologia dos bolores?

Answer 37

Hifas septadas = hialohifomicoses (não tem melanina e são hialinas) & feohifomicoses (tem melanina e são pretas)
Hifas não septadas = mucormicoses (zigomicoses)

Question 38

Quais os generos dos hialohifomicoses?

Answer 38

Aspergillus, Fusarium, Scopulariopsis, Phaecilomyces

Question 39

Quais os generos dos feohifomicoses?

Answer 39

Alternaria, ulocladium, sporothrix, exophiala

Question 40

Quais os generos dos mucormicoses?

Answer 40

Mucor, Rhizopus, Rhizomucor, Absidia

Question 41

Qual o exame que não se faz nos bolores?

Answer 41

Provas bioquímicas

Question 42

Como é que se faz a identificação dos bolores?

Answer 42

1º deteção em exame direto com KOH
2º cultura em Sabouraud (rapidez de crescimento & características das colónias)
3º identificação por morfologia microscópica

Question 43

Quais as texturas verificadas nos bolores na cultura de Sabouraud?

Answer 43

Algodonosa = micélio tem abundantes hifas que dão aspeto de algodão
Aveludada = limitado crescimento das hifas ficando com aspeto de veludo
Pulverulenta = aspeto granulado devido à grande produção de conídios
Glabra = superfície lisa ou com aspeto de camurça

Question 44

Quais as técnicas usadas na identificação por morfologia microscópica?

Answer 44

Técnica da fita-cola e geralmente usa-se corante azul de lactofenol para facilitar a visualização

Question 45

Como se identificam os diferentes tipos de aspergillus?

Answer 45

• Pela cor da colónia → macroscopicamente

* Pela cabeça – cabeça aspergilar → microscopicamente

Question 46

Qual a característica específica da Aspergillus nidulans?

Answer 46

Tem o conidióforo (tipo o stem) castanho porque tem melanina

Question 47

Qual a importância de haver outros métodos laboratoriais para diagnóstico de fungos? Quais são?

Answer 47

Métodos convencionais demoram muito tempo, piorando o prognóstico. Isto é especialmente grave nos imunocomprometidos.
Deteção de Ag

Question 48

Quais os Ag associados aos fungos?

Answer 48

Candida - 1,3-Beta-glucano
Pneumocisits jirovecii - 1,3-Beta-glucano
Cryptococcus neoformans – capsular polysaccharide
Aspergillus - galactomannan