Vetores - Cosmídeos

Question 1

Cosmídeo - O que é?

Answer 1

Híbrido.

Question 2

Cosmídeo - Híbrido → Junção de: 2

Answer 2

Fago lambda

Plasmídeo bacteriano → com sítio cos.

Question 3

Cosmídeos - Uso

Answer 3

Clonagem de inserto de até 48kb.

Question 4

Cosmídeos - Contém 2

Answer 4

Polylinker → MSC

Ori Plasmidial

Question 5

Cosmídeos - Processo de Transformação Genética

Answer 5

O mesmo utilizado pelo fago.

Question 6

Cosmídeos - Processo de Transformação Genética → O mesmo utilizado pelo fago:

Answer 6

Cosmídeos → empacotados em capsídeos de fago lambda → que irão infectar a bactéria → introduzindo o cosmídeo na bactéria.

Question 7

Cosmídeos - Não contém os genes de Fagos

Answer 7

Quando infecta a E. coli → se comporta como um plasmídeo.

Question 8

Cosmídeos - Para seleção das bactérias transformadas:

Answer 8

Através da resistência à antibiótico (gene AMP’).

Question 9

Cosmídeos - Como funcionam?

Answer 9

Como seringas.

Question 10

Cosmídeos - As enzimas de empacotamento:

Answer 10

Reconhecem 2 sítios cos → com distância até 50 kb entre eles.

Question 11

Cosmídeos - O que irá ocorrer?

Answer 11

É injectado no interior da célula hospedeira → vai circularizar → e replicar como um plasmídeo.

Question 12

Cosmídeos - Tratamento

Answer 12

Tratado com enzimas → abrindo o cosmídeo → linearizando-o.

Question 13

Cosmídeos - Enzima DNAlig

Answer 13

Une o cosmideo com o inserto → recircularizando.

Question 14

Cosmídeos - Após DNAlig recircularizar:

Answer 14

Quebrado novamente o cosmideo → com outra enzima → pra preparar para o empacotamento in vitro.

Question 15

Cosmídeos - Após ser quebrado novamente:

Answer 15

Inserido dentro da célula → pelo fago.

Question 16

Cosmídeos - Após a infeção

Answer 16

COS → coesivos → vai recircularizar → e se replicar como um plasmídeo.