Gel da Poliacrilamida → para Proteína ​ Flashcards

1
Q

Proteína - Analise

A

Técnica Vertical

Cuba → montada na vertical

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2
Q

Gel para Proteína - Onde é feito?

A

Entre 2 placas → de vidro / acrílico (plástico) → afastadas uma da outra por 1mm

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3
Q

Gel para Proteína - Espessura

A

1mm → folha de pape mole

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4
Q

Gel para Proteína - O que é realizado com ele?

A

Submerso no tampão de agarose.

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5
Q

Cubas - Polos

A

Positivo

Negativo

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6
Q

Amostra - Onde é colocada?

A

Após o preparo → a proteína (amostra) é colocada → nos poços / canaletas.

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7
Q

Poços / Canaletas - Como são feitos?

A

São moldados com o pente.

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8
Q

Amostra - Preparo da Proteína 3

A

Proteína deve ser → desnaturada.

Proteína deve ser → corada.

SDS → deve ser adicionado.

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9
Q

Desnaturação → ?

Corante → ?

A

Desnaturação → βmercaptoetanol

Corante → Azul de Bromofenol (Indicador da Corrida)

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10
Q

SDS - Funções 2

A

Lise Celular

Fornece Carga - para proteína

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11
Q

Corrida - Sentido

A

Do polo negativo → pro polo positivo.

Por isso → a proteína deve ter a carga negativa → para correr em direção à carga positiva.

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12
Q

DNA - Carga

A

Naturalmente → negativa → devido ao fosfato.

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13
Q

Gel - Cor

A

Transparente → deve ser corado

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14
Q

Gel - Corantes → Tipos 2

A

Comassie Blue

Nitrato de Prata

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15
Q

Gel - Corantes → Funções

Comassie Blue → ?

Nitrato de Prata → ?

A

Gel - Corantes → Funções

Comassie Blue → especificidade grande com proteína

Nitrato de Prata → utilizamos quando trabalhamos com proteínas muito pequenas

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16
Q

Gel + Corantes - Descrição do Processo

A

Gel → retirado das placas → e corado todo com o corante → ficando todo azul.

Após isso → descolorir a amostra → adicionando o descolorante → que vai retirar o corante de todo o gel → menos das proteínas → nos permitindo às visualizar.

17
Q

Azul de Bromofenol - Característica

A

Não tem afinidade com a proteína e nem com o gel.

18
Q

Amostra - Eventualmente

A

Desce → pela força da corrente elétrica.