PCR - Reagentes Flashcards
PCR - O que fazemos?
Adicionamos os reagentes no tubo.
PCR - Reagentes 5
DNA molde
Tampão
MgCl2
2 Primers
dNTPs
DNA Genômico - Na PCR:
É o DNA molde → com a mutação no genoma que queremos amplificar.
Tampão - Função
Manter pH perfeito.
Cloreto de Magnésio (MgCl2) - Função
Ativar a enzima.
Primers - O que são?
Primer → pedacinho de DNA complementar as extremidades de onde eu quero amplificar.
2 Primers - Função
Utilizamos 2 → porque eu preciso de 1 em cada extremidade.
dNTPs - Sigla
Di-nucleotideos-tri-fosfato
dNTPs - O que são?
São os nucleotídeos (4 → A T G C)
São as letrinhas que nós fornecemos para que seja montada a nova fita de DNA.
dNTPs - Outros Tipos 4
Somente A → dATP
Somente T → dTTP
Somente G → dGTP
Somente C → dCTP
Nucleotídeo - Função
Tijolos para a DNA polimerase montar a nova fita.
Enzima - Qual utilizamos?
Taq polimerase
Enzima Taq polimerase - Origem
Bactéria → Thermus aquaticus → habitat natural são fontes termais / gêiseres → onde sobre a temperaturas maiores que 100ºC.
Enzima Taq polimerase - Característica Principal
Termo Tolerante
Reagentes - O que fazemos com eles?
Colocamos tudo dentro de um tubo → e nomeamos isso tudo de mistura de reação.