Eletroforese - Detecção de Bandas de DNA Flashcards
Deteção de Bandas de DNA - O que ocorre?
Terminou a corrida → precisamos ver o DNA.
Deteção de Bandas de DNA - Equipamento
Fofo-documentador → com luz ultravioleta.
Para conseguirmos observar o DNA no gel:
Adição de → Agentes Intercalantes
Agentes Intercalantes - O que ele faz?
Se liga às pontes de hidrogênio (se agarra / cola no DNA).
Agentes Intercalantes - Função
Uma vez na luz UV → Agente Intercalante → brilha
Agentes Intercalantes - Exemplos 3
Laranja de Acridina
Proflavina
Brometo de Etídeo
Brometo de Etídeo - Característica
O mais utilizado → porém altamente cancerígeno.
DNA - Para visualizar as bandas:
Adicionado num transluminador → que fica fechado por segurança.
DNA - Visualização em Si 2
Computador com software → digital
Técnica a olho nu → adicionado num transluminador (paramentado com chumbo.
Bandas Fluorescentes - O que observamos? (Por que ocorrem?)
DNA → que intercalou com o brometo de etídeo.
Gel - “Problema”
Não serve pra nada se não tiver marcador de peso molecular.
Marcador de Peso Molecular - O que é? / Função
DNA comprado → que é conhecido o peso de todas as bandas que se separaram → e adicionado em cada uma das extremidades → permitindo comparar a corrida da amostra de DNA analisada.