PCR-Real Time - Resumo Flashcards
Taq polimerase - O que ela realiza?
Taq → com atividade exonucleásica na extremidade 5’ → remove obstáculos durante a reação.
Sondas Fluorescentes (Taqman Probes) - O que ocorre?
São aneladas / hibridizadas no gene alvo → bem como os primers.
Quando a polimerase está alongando a nova fita do gene-alvo:
Ela encontra a sonda (taqman probe) → e ocorre a atividade exonucleásica sobre a extremidade 5’ da sonda (R separa-se de Q).
R fica distante da extremidade 3’Q(uencher) - Consequência
Q → é o Bloqueio / Silenciador → então R fluoresce → e sua emissão de luz → é captado pelo equipamento.
No gráfico, a luz emitida:
Atinge um limiar superior do background → indicando um resultado quantitativo da amplificação do gene de interesse.