Sequenciamento Automatizado Flashcards
Sequenciamento Automatizado - Outro Nome
Método Didesoxi
Método Didesóxi - O que é utilizado?
Letras alegres → ddNTPs
Sequenciamento Automatizado - Funções 2
Detecta Mutações em Genes Conhecido
Permite analisar cada uma das bases da sequência de DNA em estudo.
Detecta mutações em genes conhecidos - Como?
Analisando cada uma das bases (nucleotídeos) contidos no fragmento de DNA em estudo.
Permite analisar cada uma das bases da sequência de DNA em estudo:
Da a integridade do nucleotídeo que estamos analisando → mostrando até mesmo uma mutação pontual.
Após a Amplificação Genica:
Gene → é submetido ao sequenciamento → para determinação de mutações.
Sequenciamento - Característica
Eu não faço sequenciamento → sem antes amplificar o gene na PCR.
Sequenciamento Automatizado - Momento de Aplicação da Técnica 2
Extração do DNA → PCR → Eletroforese
Se estiver tudo bem → fazemos → Sequenciamento
Sequenciamento Automatizado - Antes de fazer o sequenciamento: 4
Extração do DNA → Analisada com a eletroforese para determinar se está tudo ok.
Compro primers para limitar somente o trecho que eu quero.
PCR → locais complementares ao primer → são anelados e isolados
Após obtermos o nosso DNA isolado → o analisamos na eletroforese
Sequenciamento Automatizado - Durante o sequenciamento:
Analisamos nucleotídeo por nucleotídeo → para determinar se ocorreu algo → como uma mutação pontual.
Sequenciamento - O que ocorre? 2
Reação de PCR → específica para sequenciamento
Após → levamos amostra para o → Sequenciador
Reação de PCR → específica para sequenciamento - Função
Adição de didesóxis → ddNTPs.
ddNTPs - O que ocorre? / Importância 2
Adicionados na PCR → para realizar o sequenciamento.
Sem a sua adição → não ocorre sequenciamento.
