Enzimas de Restrição - Mecanismo de Ação

Question 1

​Enzimas - Origem

Answer 1

Vem das bactérias.

Question 2

E.coli - Cepas 2

Answer 2

RY13

DH5alfa

Question 3

Enzimas - Nomenclatura 4

Answer 3

Gênero

Espécies → 2 primeiras letras

Linhagem / Cepa → 1ª letra

Algoritmo Romano → representa a ordem de descoberta

Question 4

Enzima EcoRI - Nomenclatura

E → ?

Co → ?

R → ?

I → ?

Answer 4

Enzima EcoRI - Nomenclatura

E → gênero

Co → espécie

R → linhagem / cepa

I → algorítimo romano

Question 5

​Enzima EcoRI - Quantidade de Bases

Answer 5

5 ’ G A A T T C 3 ’ → 6 bases

3 ’ C T T A A G 5 ’ → 6 bases

Question 6

E. coli - DH5alfa

Answer 6

EcoDI

Question 7

Enzima EcoRI - Função

Answer 7

Quebrar a ligação fosfodiéster.

Corta ambas as fitas de DNA no mesmo ponto.

Question 8

Enzima EcoRI - Descrição da Ação

DNAs → ?

Enzima → ?

Answer 8

Enzima EcoRI - Descrição da Ação

DNAs → de espécies diferentes → são tratados com a mesma enzima.

Enzima → os cliva em sítios específicos → deixando fragmentos expostos que são complementares (cada um em uma fita de DNA) → que podem se ligar.

Question 9

​Enzima EcoRI - Onde corta?

Answer 9

Corta → em regiões específicas → nos deixando com uma extremidade unifilamentar.

Question 10

DNA Ligase - Função

Answer 10

Restaurar ligações fosfodiester (que foram quebradas pela enzima de restrição).

Question 11

DNA Ligase - Descrição da Ação

Answer 11

DNA ligase → une as duas extremidades que se complementam.

Extremidades → se ligam através de uma ponte de hidrogênio (que elas mesmo fazem).

O que precisa de ajuda → fazer a ponte fosfodiester novamente.

Question 12

DNA Ligase - Onde ela atua?

Answer 12

Atua realizando as ligações nas regiões específicas que foram cortadas pela Enzima de Restrição.

Question 13

Apos tudo isso → ?

Answer 13

Apos tudo isso → obtemos o DNA recombinante.

Question 14

Hidroxila livre no carbono X’ → ?

Answer 14

Hidroxila livre no carbono X’ → com o fosfato livre no carbono Y’.