Respuesta específica Flashcards
Estructura y generación de diversidad de los receptores TCR y BCR
Células link entre sistema inmune innato y adaptativo
¿Por qué?
Célula dendrítica
Son presentadoras de antígeno
Forman parte de la superfamilia de proteínas de inmunoglobulinas (4)
- BCR
- TCR
- MHC
- Moléculas de adhesión
Estructura general de los receptores (BCR y TCR)
__ definen la especificidad de unión a una proteína (ag)
2 hojas β-plegadas unidas por loops (CDR)
Loops
Diferencia entre un anticuerpo y un BCR
- BCR → Ig anclada a membrana de la cx. B (tiene región transmembranal), reconoce ag
- Anticuerpo → Ig producidos y secretados por cx. plasmáticas, soluble
¿Qué pasa cuando BCR se une a un antígeno o interactúa con un CD4?
Se activa cx. B → proliferación → diferenciación a cx. plasmáticas
Estructura general de un anticuerpo
- 2 cadenas pesadas
- 2 cadenas ligeras
- Dominios variables y constantes
- Región Fab → interacciona con ag (manitas)
- Región Fc (conservadora) → fracción efectora cristalizable (patitas), se une a receptores de la cx.
- Región bisagra → da flexibilidad (medio)
Isotipos de Ig de Linfocitos B
(Estructura básica similar)
- μ = IgM
- δ = IgD
- ɣ = IgG
- α = IgA
- ε = IgE
¿En qué difieren los isotipos de los anticuerpos?
En las cadenas pesadas
Estructura del BCR
Características de la cadena ligera
Contiene 1 región variable y 1 constante
Estructura del BCR
2 tipos de cadenas ligeras
- Kappa (κ) → principal (60%)
- Lambda (λ)
Estructura del BCR
Características de la cadena pesada
Contiene 1 región variable y de 3-4 regiones constantes
Estructura del BCR
5 tipos de cadenas pesadas
- IgM (3)
- IgE (3)
- IgG
- IgD
- IgA
Estructura del BCR
Características de las regiones variables de complementabilidad (CDR1-3) (4)
- Unen una β-plegada con otra (LOOP)
Estructura del BCR
¿Cuáles son la regiones + cambiantes del BCR?
Regiones variables de complementabilidad (CDR1-3)
Estructura del BCR
¿Cuál de las regiones variables de complementabilidad (CDR1-3) es la más variable?
CDR3
Estructura del BCR
¿En dónde se encuentran las regiones variables de complementabilidad (CDR1-3)?
En dominios variables → hacen contacto con ag 🦠
Estructura del BCR
Componentes de reconocimiento del complejo receptor
- BCR (receptor-ag)
- CD21 (correceptor-complemento [C3d])
Estructura del BCR
Componentes de transducción de señal del complejo receptor
- Igα e Igβ (pts. transmembrana portadoras de ITAM)
- CD19 y CD81
Vía ITAM
Regiones ITAM tienen residuos de tirosina → se fosforilan
De dónde sale el C3d?
Factor I ✂️ C3b (para 🚫 formación convertasa) → C3c + iC3b + C3d
¿Qué hacen CD19 y CD81?
Transducen la señal en el BCR (están adentro)
Estabilizan
Estructura del TCR
2 cadenas polipeptídicas:
- Cadenas α y β⭐️: forma mayoría de TCR
- Cadenas ɣ y δ: forma minoría de TCR
Estructura del TCR
Diferencias entre Cadenas α y β y Cadenas ɣ y δ
- Cadenas α y β: reconocen MHC y péptidos, muy variable, ampliamente distribuidos
- Cadenas ɣ y δ: ❌ reconocen MHC, reconocen a CD1 y lípidos, ❌ tan variable, 📍epitelios y mucosas
Estructura del TCR
Componente de reconocimiento del complejo receptor
- TCR (receptor-ag)
- CD4 (correceptor-MHC II)
- CD8 (correceptor-MHC I)
- CD28 (coestimulador-CD80-CD86)
MHCs y CD80/CD86 van a estar en las APC
Estructura del TCR
Componente de transducción de señal del complejo receptor
Complejo CD3 → (ɣ, δ, ε, ζ) portadoras de ITAM, forman dímeros (homo/hetero)
¿Cómo se genera la diversidad de los receptores?
Recombinación VDJ → Millones de combinaciones de segmentos génicos → adición de nt P y N (✂️ por exonucleasa)
P = palindrómicos N = no contemplados
Regiones VDJ
- Variable (V) → cada una tiene CDRs
- Diversidad (D) → exlcusiva de cadena pesada
- Joining (J) → une región variable con constante, no variabilidad
¿Quién hace la recombinación VDJ en los componentes de TCR y BCR?
Las cadenas pesadas
Las ligeras solo hacen recombinación DJ
¿En dónde se hace la recombinación VDJ?
Unión de segmentos génicos V, D y J para formar un gen único de c/cadena
- Cadena pesada de BCR
- Cadena β/δ del TCR
¿En dónde se hace la recombinación VJ?
Unión de segmentos génicos V y J para formar un gen único de c/cadena
- Cadenas ligeras de BCR
- Cadena α/ɣ del TCR
¿Qué se necesita para la recombinación VDJ?
- Sinapsis de segmentos → RAG 1/2
- Ruptura ADN → RAG 1/2
- Reparación ADN → Ku70/Ku80, ADN-PK, Artemis
- Unión de ADN → Ku70/Ku80, ADN-PK, ADN ligasa IV, XRCC4
¿Qué pasa con la sección codificante y la sección señal?
Se elimina la señal
¿Por qué cosa están separadas las secuencias de señal de recombinación (RSS)?
Pts que reconocen y sabrán dónde cortar y empalmar
Por espaciadores no conservados de 12/23 pb
Regla 12/23 siempre
Localización de las secuencias de señal de recombinación (RSS)
A los lados de c/segmento génico V, D y J
ADN de TCR y BCR
Secuencias de señal de recombinación (RSS)
Son secuencias ….. y ….. conservadas
- Heptaméricas
- Nonaméricas
Pasos recombinación VDJ (1)
¿Quién reconoce y se une a las RSS en segmentos V, D y J?
RAG 1/2
(se une de manera al azar)
Pasos recombinación VDJ (2)
¿Qué hace RAG 1/2 una vez que está unido al ADN?
✂️ ADN en extremos → sec. codificación y sec. señal
“Escisión de una hebra”
Acción endonucleasa
Pasos recombinación VDJ (3)
¿Qué pasa después de la escisión de una hebra de ADN?
- Sec. codificante → horquillas (extremos de segmentos V, D y J)
- Sec. señal → extremos romos (abiertos)
2 horquillas
Pasos recombinación VDJ (3)
¿Quiénes estabilizan los extremos despues de formar los extremos romos?
Ku70/Ku80
Pasos recombinación VDJ (3)
¿Quiénes unen los extremos romos de la sec. de señal (como “plásmido” círculo)?
ADN ligasa IV + XRCC4
no necesaria = se elimina
Pasos recombinación VDJ (5)
¿Cómo ocurre la escición de la horquilla (de la sec. codificante)?
Ku´s reclutan a ADN-PKcs → fosforila (activa) a Artemis → abre horquillas en extremos de V y J → generan extremos salientes → diversidad
Pasos recombinación VDJ (6)
¿Cómo ocurre la adición de nucleótidos P?
ADN pol → crean nt P en extremo saliente de la sec codificante
P = palindrómicos
Pasos recombinación VDJ (8)
¿Quién se encarga de ✂️ los nt de los extremos del ADN en las uniones V-D y D-J después de que se agregan los nt P?
(SOLO en cadena pesada de BCR o β/δ de TCR)
Exonucleasas
- Se genera + diversidad en cadenas pesadas
Pasos recombinación VDJ (9)
¿Quién agrega a los nt N a las uniones codificadoras de genes de la cadena pesada?
(SOLO en cadena pesada de BCR o β/δ de TCR)
TdT → + variabilidad
Regiones entre D y J codifican para CDR3 → región + variable
Pasos recombinación VDJ (9)
¿Quién agrega a los nt N a las uniones codificadoras de genes de las cadenas pesadas y ligeras (ambas)?
ADN pol μ
nt N = nt no codificados
Pasos recombinación VDJ (10)
¿Quién se encarga de unir los extremos codificadores de segmentos V, D y J?
(SOLO en cadena pesada de BCR o β/δ de TCR)
ADN ligasa IV y XRCC4
(completan recombinación)
A veces ADN pol λ y μ agregan nt aleatorios
Ligadura y reparación
Mecanismos de reordenamiento del ADN (diversidad) de BCR/TCR
Diversidad combinatoria
Recombinación V, D y J (cadenas pesadas) y V y J (cadenas ligeras) se combinan → ⬆️ variedad de receptores (Ac)
Mecanismos de reordenamiento del ADN (diversidad) de BCR/TCR
Recorte de exonucleasa
En uniones V-D-J puede ✂️ nt P para después agregar nt N → ⬆️ variabilidad en las secuencias
Expresión de BCR después de recombinación V(D)J
¿Cuáles son los tipos de Ig que expresan las cx B maduras en su membrana?
IgD e IgM
son los únicos que tienen poli A para expresarse como BCR
Expresión de BCR después de recombinación V(D)J
¿Cuáles son los tipos de Ig que expresan las cx. B inmaduras en su membrana?
IgM
(es 1° porque su región constante está inmediatamente dsp de los segmentos V(D)J recombinados)
V o F
IgD e IgM actúan como receptores de membrana, sin alterar la especificidad para el antígeno
Verdadero
Expresión de BCR después de recombinación V(D)J
¿A través de qué proceso se expresan IgG, IgA e IgE?
Cambio de clase (class switch recombination) CSR
(se secretan como ac solubles)
¿Quién estimula el cambio de isotipo de las cx B?
Señales de citocinas e interacción con cx. T
Entre nt N y nt P ¿Quiénes dan + variabilidad para la codificación de los CDR?
nt N
Región del ag que es reconocida por el ac
Epítope
Región del ac que reconoce al epítope
Paratope
Ig más grandes (tienen 3 regiones constantes)
IgM e IgG
(las demás tienen 2)
