BIOTECNOLOGIAS DA REPRODUÇÃO ANIMAL Flashcards
No contexto das biotecnologias da reprodução animal, que englobam técnicas avançadas como inseminação artificial, transferência de embriões, clonagem e edição genética, avalie os seguintes pontos:
O método de prolongamento da fase luteínica utiliza agentes luteolíticos para induzir a regressão precoce do corpo lúteo.
ERRADO
O método de prolongamento da fase luteínica envolve a administração de progestágenos para manter o corpo lúteo ativo por um período prolongado, não para induzir sua regressão precoce.
“O primeiro método, conhecido como ‘prolongamento da fase luteínica’, envolve a administração de um progestágeno por um período prolongado, geralmente entre 14 e 21 dias.”
Prolongamento da Fase Luteínica
A administração de PROGESTÁGENO por 14-21 dias causa a regressão do corpo lúteo, que retoma sua função após a remoção, promovendo o cio e a ovulação em 2-8 dias. Progestágenos podem ser administrados via oral, pessários, implantes de orelha ou dispositivos intravaginais, dependendo das características do rebanho e recursos disponíveis.
Encurtamento da Fase Luteínica
A administração de agentes LUTEOLÍTICOS, como PGF2α, induz a regressão precoce do CL em 24-72 horas, com cio e ovulação em 2-3 dias. A combinação com progestágeno pode sincronizar o ciclo estral e facilitar a inseminação artificial ou transferência de embriões.
A inserção de Norgestomet e a administração de estradiol são ineficazes para a sincronização do cio em bovinos, não oferecendo controle sobre a reprodução.
ERRADO
Na verdade, a combinação de Norgestomet e estradiol é uma estratégia eficaz para sincronizar o cio em bovinos, permitindo controle reprodutivo e facilitando a inseminação em tempo fixo.
“Progestágeno e Estrógeno: Injeção de 5 mg de valerato de estradiol (estrógeno) e 3 mg de Norgestomet (progestágeno) no primeiro dia. Implante de Norgestomet por 9 dias a partir do dia 1.”
A administração de progestágeno em suínos é realizada por um período curto de 5 a 7 dias para efetivamente sincronizar o cio.
ERRADO
A administração de progestágeno em suínos, especificamente Altrenogest, é realizada por um período de 14 a 18 dias para efetivamente sincronizar o cio, um período mais longo do que o afirmado.
A técnica de vagina artificial é uma prática recente na coleta de sêmen, sendo introduzida apenas nas últimas décadas.
ERRADO
A técnica da vagina artificial é uma prática estabelecida e antiga para a coleta de sêmen, sendo amplamente utilizada por muitas décadas, especialmente em animais como touros, carneiros e cavalos.
Vantagens da Transferência de Embriões (TE) em Relação à Inseminação Artificial (IA):
-> Multiplicação Rápida de Genética Superior:
-> Maior Eficiência Reprodutiva;
-> Transporte e Comércio de Genética;
-> Conservação de Raças e Linhagens;
-> Sincronização e Planejamento Reprodutivo;
SUPEROVULAÇÃO (HORMÔNIOS)
FSH (Hormônio Folículo-Estimulante): Estimula o crescimento e maturação dos folículos ovarianos.
eCG (Gonadotrofina Coriônica Equina): Também conhecido como PMSG (Soro Gonadotrófico de égua Prenhe), este hormônio possui atividade semelhante ao FSH e LH.
hMG (Gonadotrofina Menopáusica Humana): Contém atividades tanto de FSH quanto de LH e é utilizado para promover o crescimento dos folículos.
Protocolo SOV com Observação Natural do Cio:
Objetivo: Indução da superovulação.
FSH: Administrado em doses decrescentes durante a fase folicular.
PGF2α: Administrado TRÊS dias após o início do protocolo para diminuir os níveis de Progesterona (P4), anular o pico de LH e induzir a ovulação.
Início: Administração de gonadotrofinas começa na metade do ciclo estral (8-10 dias após a ovulação).
Crucial: Detecção do estro é essencial para iniciar o protocolo corretamente.
A produção de testosterona é estimulada pelo hormônio luteinizante (LH), que é secretado pela adenohipófise.
CORRETO
O epidídimo é um local crucial para a maturação e armazenamento dos espermatozoides após sua
produção nos túbulos seminíferos
CORRETO
A sincronização do estro é uma prática que só pode ser aplicada em rebanhos bovinos
ERRADO
SINCRONIZAÇÃO DE ESTRO
Tratamentos: Utilizam PGF2α ou progestágenos.
Importância: Essencial para espécies com sazonalidade reprodutiva (caprinos e ovinos).
Benefícios: Otimiza reprodução e manejo do rebanho, explora potencial genético de animais superiores.
A técnica da vagina artificial é a mais usada para a coleta de sêmen em touros, carneiros, porcos, cavalos
e coelhos.
CORRETO
Para determinar a viabilidade espermática, é comum utilizar temperaturas superiores a 40°C durante a
análise ao microscópio, garantindo a observação mais eficaz dos espermatozoides.
ERRADO
- Motilidade, Concentração Espermática e Viabilidade:
A técnica envolve colocar uma gota de sêmen sobre uma lâmina em uma placa aquecida (38-39°C) e observar ao microscópio com aumento de 20x40.
Para evitar choques térmicos que podem danificar os espermatozoides, o sêmen é geralmente descongelado gradualmente à temperatura ambiente para preservar sua viabilidade.
ERRADO
Realiza-se rapidamente num banho de água ou num termo que mantém a temperatura da água entre 35-37 °C.
Para preservar a viabilidade do sêmen, o congelamento é feito a uma temperatura de -80ºC para garantir a segurança e a eficácia a longo prazo do sêmen armazenado.
ERRADO
CRIOPRESERVAÇÃO DE SÊMEN
A temperatura de congelação do sêmen é de -196ºC com nitrogênio líquido, permitindo uma conservação por tempo indeterminado.
Na técnica de aspiração folicular guiada por ultrassonografia (OPU), os folículos são QUALIFICADOS através de um exame ultrassonográfico, e a aspiração é realizada com uma agulha 18g guiada por ultrassom, ajustada para uma pressão de aspiração de aproximadamente 76 mmHg.
CORRETO
A heparina é utilizada no processo de FIV para retardp4ar a capacitação espermática e aumentar o tempo de exposição dos espermatozoides aos oócitos.
ERRADO
A heparina é usada no meio TALP-fert para induzir artificialmente a capacitação espermática essencial na FIV, facilitando a fertilização dos oócitos.
A classificação dos complexos cumulus-oócito (COCs) coletados na aspiração folicular é crucial para determinar a viabilidade dos oócitos, com a classificação variando do grau I ao IV, onde grau I indica oócitos de alta qualidade e grau IV indica oócitos de qualidade inaceitável para procedimentos de PIVE.
CORRETO
Os complexos cumulus-oócito (COCs) são classificados em quatro categorias com base na compactação e transparência das células do cúmulus e ooplasma. Classes I a III são viáveis, classe IV é descartada.
A maturação in vitro (MIV) dos oócitos é realizada em um ambiente controlado que simula as condições
do ambiente folicular, utilizando meio de maturação suplementado com gonadotrofinas (FSH e LH), e os
oócitos são incubados por um período de 22 a 24 horas para alcançar a maturação adequada antes da
fertilização.
CORRETO
Na FIV, o processo de fusão do espermatozoide com o oócito inicia antes da ligação do espermatozoide aos receptores na zona pelúcida.
ERRADO
O espermatozoide se une ao oócito, atravessa as células do cúmulus, fixa-se na zona pelúcida e funde-se com a membrana do oócito, iniciando o desenvolvimento embrionário.
células do CUMULUS!
São um grupo de células que envolvem o oócito, desde o folículo ovariano até após a ovulação
A sexagem de embriões permite determinar o sexo do embrião após a fecundação e antes da implantação através de uma técnica simples e não invasiva que não afeta a viabilidade do embrião.
ERRADO
A sexagem de embriões é uma alternativa à sexagem de espermatozoides, mas envolve biópsia, que é demorada, invasiva e pode comprometer a integridade do embrião.
A citometria de fluxo utilizada na sexagem de espermatozoides depende primariamente da diferença de pH entre espermatozoides X e Y, o que facilita a seleção do sexo desejado.
ERRADO
A técnica de sexagem de sêmen usa citometria de fluxo para separar espermatozoides X e Y com base na quantidade de DNA, alcançando cerca de 90% de precisão.
A transferência de DNA mediada por transposons é uma técnica avançada de transgenia que utiliza elementos móveis de DNA para inserir genes em locais específicos do genoma, promovendo uma inserção mais precisa e eficiente do material genético.
A transferência de DNA mediada por transposons utiliza elementos móveis de DNA para inserir genes em locais específicos do genoma, garantindo uma inserção precisa e eficiente.
Entre as diversas técnicas de transgenia, a microinjeção pronuclear se destaca pela sua eficiência na introdução de genes específicos em embriões, envolvendo a injeção direta de DNA estrangeiro no núcleo de um óvulo fertilizado.
CORRETO
Método de transgênese que consiste na injeção direta de DNA estrangeiro no núcleo de um óvulo fertilizado. É eficaz para inserir genes específicos em embriões.
Na técnica de clonagem, o processo de enucleação é crucial e envolve a remoção de todo o material genético do oócito receptor. Isso assegura que o DNA do animal a ser clonado seja o único presente nos indivíduos gerados, eliminando o risco de mistura genética.
CORRETO
Coleta-se um fragmento de tecido (geralmente pele) do animal a ser clonado, que é processado em laboratório para cultivo celular. As células cultivadas são transferidas para oócitos receptores maturados e enucleados (removendo o DNA nuclear do oócito), assegurando que apenas o DNA do animal clonado esteja presente.
O protocolo de superovulação com observação natural do cio utiliza Estrogênio (E2) e Progesterona (P4) em combinação para anular completamente o pico do Hormônio Luteinizante (LH) e evitar qualquer ovulação.
errado
O Protocolo SOV com Observação Natural do Cio (FSH e PGF2α) é um método para indução da superovulação utilizando FSH em doses decrescentes para compensar a redução natural deste hormônio na fase folicular. Três dias após o início, administra-se Prostaglandina F2 alfa (PGF2α) para diminuir a Progesterona (P4), anular o pico de LH e induzir a ovulação. As gonadotrofinas começam a ser administradas na metade do ciclo estral (8-10 dias após a ovulação), o que torna crucial a detecção do estro para iniciar o protocolo
RESUMO: Usa-se (FSH e PGF2α).
Para a coleta de embriões, é necessário esperar até o décimo dia após a inseminação das doadoras para garantir que os embriões estejam adequadamente localizados para recuperação.
ERRADO
A coleta de embriões é feita geralmente entre o 7° e 8°dia após a primeira inseminação, pois os embriões estão no lúmen dos cornos uterinos, facilitando a coleta por lavagem. Alguns especialistas sugerem a coleta a partir do sexto dia após a inseminação.
Durante a coleta de embriões, a Sonda de Foley é inserida no trato reprodutivo da fêmea e guiada até o
primeiro corno uterino, onde os embriões são coletados após a infusão de solução salina tamponada com fosfato (PBS).
CORRETO
Com o animal preparado, a Sonda de Foley é introduzida no trato reprodutivo via palpação transretal. Após passar pela cérvix, é conduzida ao corno uterino para coleta dos embriões. O mandril é removido e o cuff da sonda é inflado com 10 a 20 ml de ar para evitar refluxos.
A viabilidade dos embriões é determinada por uma análise detalhada que observa características como a forma esferoide dos embriões, a uniformidade e a compactação dos blastômeros, e a integridade da zona pelúcida.
CORRETO
A análise da viabilidade embrionária considera a forma esferóide, simetria, aparência e tonalidade dos blastômeros, uniformidade da membrana celular, proporcionalidade entre embrião e fragmentos celulares, ausência de fragmentos aderidos à zona pelúcida (ZP) e compactação dos blastômeros. Esta avaliação é crucial para as taxas de concepção nas receptoras.
Durante a implantação transcervical de embriões, a camisinha sanitária é rompida intencionalmente ANTES da inserção do inovulador para facilitar a passagem pela cérvix
ERRADO
A vulva do animal é higienizada antes da inserção do inovulador. DURANTE a passagem pela cérvix, a camisinha sanitária é rompida, permitindo a entrada no útero sem risco de contaminação. O embrião é depositado no terço médio-final do corno uterino ipsilateral ao corpo lúteo.
O descongelamento de embriões Direct Transfer (DT) é realizado em temperaturas que variam de 40°C a
45°C, o que facilita a rápida ativação do embrião após o transporte
ERRADO
Além da implantação cervical, existem métodos para transferência de embriões frescos, Direct Transfer (DT) ou vitrificados. Embriões frescos são mantidos em temperatura ideal com um transportador especial. Embriões DT são descongelados conforme o manual do laboratório, com temperaturas de 26°C a 30°C e tempos de 26 a 30 segundos. Embriões vitrificados têm um descongelamento mais minucioso e lento.
Para embriões classificados como grau I a III, a transferência deve preferencialmente ser realizada por
via transcervical.
CORRETO
Somente embriões classificados como grau I a III devem ser transferidos para receptoras. A transferência, de
preferência deve ser realizada por via transcervical
Durante a transferência transcervical de embriões, é essencial realizar a palpação transretal e a ultrassonografia para avaliar a condição do corpo lúteo na receptora, classificando-o antes de prosseguir com a implantação do embrião.
CORRETO
Na transferência transcervical, a palpação transretal da receptora é feita para identificar em qual ovário está o corpo lúteo. A ultrassonografia é utilizada para avaliar a condição do corpo lúteo, classificando-o como excelente, bom ou ruim.
TÉCNICA DE “SLICING”
maximiza a recuperação de oócitos, especialmente de ovários de fêmeas geneticamente valiosas que faleceram, cortando a camada cortical do ovário em pequenos pedaços para liberar os oócitos.
CLASSIFICAÇÃO DE OÓCITOS
Os complexos cumulus-oócito (COCs)
Grau I: Oócitos com cúmulus compacto e mais de três camadas de células. Ooplasma homogêneo e marrom.
Grau II: Oócitos com menos de três camadas de células do cúmulus. Ooplasma heterogêneo, com manchas escuras.
Grau III: Oócitos com cúmulus expandido. Ooplasma contraído e irregular, degenerado ou fragmentado.
Grau IV: Oócitos desnudos, com citoplasma anormal ou apoptótico.
Os COCs classificados de I a III são considerados viáveis, enquanto os de classe IV são descartados
Exemplo de Protocolo de IATF para Vacas
Dia 0: Um dispositivo de liberação de progesterona é inserido na vaca, e uma injeção de GnRH é administrada.
Dia 7: O dispositivo de progesterona é removido, e uma injeção de PGF2α é dada.
Dia 9: Outra injeção de GnRH é aplicada, e a inseminação é realizada 16 ou 24 horas depois.
IMPORTANTE!!!
Antibióticos como penicilina e estreptomicina são usados para inibir germes no sêmen;
* O glicerol ajuda na conservação e evita danos celulares durante a congelação.
Hormônios - homem
LH, secretado no sistema porta-hipofisário, estimula as células de Leydig, presentes no parênquima testicular, a SECRETAR o hormônio masculino testosterona.
GNRH - Estimula a secreção de FSH e LH;
FSH - Promove a espermatogênese;
TESTOSTERONA: Essencial para espermatogênese, desenvolvimento de características sexuais masculinas e comportamento.
INIBINA - Produzida pelas células de sertori, INIBE a SECREÇAO de FSH.
Estro (cio) duração de 8 a 18 horas - Éguas
-> O comportamento sexual pode variar entre espécies. Durante o estro, a fêmea aceita a cópula.
-> Nos ovários, os folículos em desenvolvimento atingem a maturidade e tamanho pré-ovulatório, com concentração máxima de estradiol. Há um feedback positivo entre o estradiol, GnRH e LH, resultando no pico pré-ovulatório de LH que desencadeia a ovulação.
-> Para permitir a passagem do esperma, a cérvix se abre e há aumento na produção de muco cervical fluido e cristalino, além de aumento das contrações no útero e oviduto. Na vagina, o epitélio se espessa e as células da superfície se tornam cornificadas.
hormonio femeas
FSH - Promove o recrutamento e desenvolvimento dos folículos;
LH - Responsável pelo crescimento do folículo dominante e pela ovulação;
ESTRADIOL - Estimula o sistema nervoso, induz o cio e regula outros hormônio;
PROGESTERONA - Mantem a gestação inibe o cio e prepara o útero para a implantação do embião.
O sêmen bruto é avaliado macroscopicamente por características como volume, cor e odor imediatamente após a coleta.
Certo
A avaliação macroscópica do sêmen inclui a verificação de características físicas, como volume e cor, que são indicativos da saúde reprodutiva do doador e da qualidade do sêmen coletado
A motilidade dos espermatozoides é examinada utilizando uma lâmina aquecida à temperatura corporal padrão, entre 38 e 39ºC.
CERTO
A temperatura da lâmina é mantida próxima à temperatura corporal para preservar a viabilidade e motilidade dos espermatozoides durante a avaliação microscópica.
A concentração espermática é determinada usando a câmara de contagem Burker, similar aos métodos usados em hematologia.
CERTO
Este método de contagem é preciso para avaliar a densidade espermática, permitindo cálculos exatos para a diluição do sêmen antes da inseminação ou criopreservação.
A viabilidade espermática é testada utilizando corantes específicos que distinguem espermatozoides vivos de mortos.
CERTO
Este método de coloração permite a avaliação precisa da proporção de espermatozoides vivos, que é crucial para determinar a qualidade do sêmen para inseminação ou criopreservação.
A diluição do sêmen é realizada para aumentar seu volume e inclui a adição de antibióticos e glicerol para proteger os espermatozoides.
CERTO
-> A diluição é essencial para aumentar a quantidade de doses insemináveis de um ejaculado, ao mesmo tempo que protege os espermatozoides durante o armazenamento e o processo de inseminação.
-> Os diluentes utilizados frequentemente incluem gemas de ovo, frutose, leite desnatado reconstituído ou substâncias químicas como o TRIS (hidroximetilaminometano), com a adição de antibióticos e glicerol para melhorar a viabilidade e proteção dos espermatozoides.
A domesticação de animais e a busca por melhorar sua reprodução têm acompanhado o progresso da civilização desde os primeiros tempos.
CERTO
A domesticação e a subsequente manipulação reprodutiva dos animais foram fundamentais para o avanço das sociedades ao longo da história, refletindo a evolução das práticas agrícolas e o desenvolvimento econômico.
Durante o descongelamento de sêmen criopreservado, as palhetas são imersas em água morna a uma temperatura controlada para preservar a viabilidade espermática.
CERTO
Comentário: O método de descongelamento rápido em água morna é essencial para minimizar danos celulares e manter a funcionalidade dos espermatozoides para inseminação bem-sucedida.
A temperatura de congelação do sêmen é de -196ºC com nitrogênio líquido, permitindo uma conservação por tempo indeterminado.
CERTO
O uso de nitrogênio líquido permite o armazenamento de longo prazo dos espermatozoides sem perda significativa de viabilidade, crucial para programas de melhoramento genético.
A temperatura de congelação do sêmen é de -196ºC com nitrogênio líquido, permitindo uma conservação por tempo indeterminado.
Antibióticos como a penicilina e a estreptomicina são adicionados aos diluentes espermáticos para prevenir infecções bacterianas que podem comprometer a qualidade do sêmen.
CERTO
A adição de antibióticos é essencial para garantir a sanidade do sêmen durante o armazenamento e antes da inseminação, protegendo tanto a saúde dos espermatozoides quanto a das fêmeas inseminadas.
A Produção In Vitro de Embriões (PIVE) permite a combinação de genes de fêmeas e machos de alta qualidade genética, diferentemente da inseminação artificial onde apenas um dos indivíduos é geneticamente selecionado.
CERTO
-> A PIVE é destacada por permitir uma seleção genética superior, envolvendo tanto machos quanto fêmeas de alto valor genético, enquanto na inseminação artificial, geralmente apenas o macho é geneticamente selecionado.
-> A PIVE é muitas vezes considerada superior a outras técnicas, como a inseminação artificial (IA), pois permite a combinação de genes de fêmeas e machos altamente melhorados. Na IA, apenas um dos indivíduos é geneticamente selecionado, enquanto na PIVE ambos podem ser de alta qualidade genética.
TÉCNICA DE “SLICING”
Para maximizar a recuperação de oócitos, especialmente de ovários de fêmeas com alto valor genético que faleceram, é utilizada a técnica de “slicing”. Nesta abordagem, a camada cortical do ovário é cortada em pequenos pedaços para liberar os oócitos.
A aspiração folicular guiada por ultrassonografia (OPU) é uma técnica globalmente consagrada para a obtenção de oócitos.
CERTO
A técnica de OPU é reconhecida mundialmente e utiliza ultrassonografia para avaliar e qualificar folículos para aspiração, contribuindo significativamente para o sucesso da PIVE.
ASPIRAÇÃO FOLICULAR GUIADA POR ULTRASSONOGRAFIA (OPU)
É uma técnica que utiliza ultrassonografia e uma agulha guiada para coletar oócitos de doadoras com alto potencial genético. É essencial sincronizar o crescimento folicular e seguir rigorosamente o protocolo, com equipamentos adequados e profissionais treinados. Fatores biológicos e mecânicos podem influenciar a qualidade dos oócitos obtidos.
O meio de maturação dos oócitos na PIVE contém gonadotrofinas que simulam o ambiente folicular antes da ovulação.
CERTO
Durante a maturação in vitro, é essencial utilizar um meio que simule as condições foliculares naturais, incluindo gonadotrofinas como FSH e LH, para promover a maturação adequada dos oócitos.
A fertilização in vitro (FIV) deve ocorrer em um ambiente controlado com temperatura entre 38,5 e 39ºC e uma atmosfera de 5% de CO2.
CERTO
O ambiente controlado para a FIV é crucial para mimetizar as condições naturais de fertilização, garantindo a viabilidade e o sucesso da união dos gametas.
A FIV deve ocorrer a uma temperatura estável entre 38,5 e 39ºC por 18 a 22 horas, com uma atmosfera de 5% de CO2 e 95% de umidade.
Na produção in vitro de embriões, a inseminação artificial é considerada mais eficaz que a PIVE, pois permite um controle mais direto sobre a qualidade dos embriões.
ERRADO
A PIVE é muitas vezes considerada superior a outras técnicas, como a inseminação artificial (IA), pois permite a combinação de genes de fêmeas e machos altamente melhorados.
Função da heparina na inseminação artificial, especialmente no processo de capacitação espermática.
A heparina atua promovendo alterações bioquímicas e estruturais na membrana plasmática dos espermatozoides, facilitando a reação acrossômica, que é crucial para a penetração no oócito.
Além disso, o uso da heparina pode influenciar o tempo de exposição dos espermatozoides aos oócitos, otimizando o momento em que os espermatozoides estão mais capacitados para a fertilização. Isso aumenta as chances de sucesso no procedimento de inseminação artificial
TÉCNICA DE “SLICING”
Para maximizar a recuperação de oócitos, especialmente de ovários de fêmeas com alto valor genético que faleceram, é utilizada a técnica de “slicing”. Nesta abordagem, a camada cortical do ovário é cortada em pequenos pedaços para liberar os oócitos.
