Bio mol - Cours 4 Start-up Flashcards
Quelle est la technologie abordée dans l’article?
Capteurs électrochimiques à base d’ADN
Quels sont les avantages des capteurs électrochimiques à base d’ADN ?
- Détection en une seule étape
- Rapide
- Sans réactif
- Versatile
- Multiplexable (plusieurs réactions en parallèle)
- Permet la détection d’acides nucléiques, de protéines et de petits analytes
Qu’est-ce qui limite l’utilisation des capteurs électrochimiques à base d’ADN comme technologie à la base des EBMD?
- Signal non-spécifique significatif dans le sang total
Quelle est l’amélioration technologique proposée par l’équipe d’Alexis Bélisle?
- Mécanisme de transduction du signal qui exploite l’encombrement stérique (échelle nano)
- Test d’hybridation d’encombrement stérique en format électrochimique
- L’encombrement stérique altère l’efficacité d’hybridation entre 2 brins d’ADN
Comment est-créé l’encombrement stérique?
- Les effets stériques surviennent lorsque les atomes sont rapprochés.
- Cela crée un coût énergétique associé en raison du chevauchement des nuages d’électrons, ce qui peut affecter la conformation et la réactivité des molécules
Décrire le principe de génération du signal de la technologie d’Alexis Bélisle
Emploie :
- Brins d’ADN marqués (rédox)
- Électrode d’or qui contient le brin d’ADN de capture (densité de surface très élevée)
Suite à la liaison de brin de capture, le brin d’ADN marqué génère un signal électrochimique en rapprochant le marqueur de la surface de l’électrode
- Lorsque le brin d’ADN marqué lie un analyte, sa capacité de liaison au brin de capture sur l’électrode est diminuée en fonction de l’encombrement stérique causé par l’analyte lié
Combien de bases possèdent leur brins d’ADN?
16 bases (nt)
Comment les brins d’ADN sont-ils immobilisés sur l’électrode d’or?
- À l’aide d’un groupement thiol
Quels paramètres ont été optimisés pour augmenter la sensibilité et le temps réponse du système de détection?
- La densité du brin d’ADN de capture sur l’électrode d’or
- La concentration du brin d’ADN signal (marqué)
En combien de temps l’analyte lie-t-il le brin d’ADN signal?
En moins de 2 secondes habituellement
Quelle est la limite de détection de la technologie (test streptavidine et anticorps anti-Digoxigénine)?
Autour de 10 nM
Vrai ou faux : Les taux d’hybridation entre les 2 brins d’ADN est plus rapide en absence d’analyte
FAUX
Le taux d’hybridation est le même en absence et en présence d’analyte
Quels contrôles clés ont-ils été réalisés pour supporter le mécanisme par encombrement stérique et pour souligner la sélectivité du système de détection?
- Vérification qu’il n’y avait pas de réduction de courant observée lorsque l’analyte liait les brins d’ADN hybridés
- Ils ont confirmer que la réduction du signal en présence de l’analyte est produit via la liaison spécifique de la protéine au brin d’ADN signal
- Le brin d’ADN signal sans la portion de reconnaissance à l’analyte donne le même signal avec et sans la présence de l’analyte
- La réduction du signal n’est pas causée par une interaction non-spéficique de l’analyte à la surface de l’électrode
Vrai ou faux : Le signal électrochimique généré par l’eSHHA est inversement corrélé à la taille de l’analyte
VRAI
Relation semi-logarithmique
Vrai ou faux : Concernant la densité des brins de capture sur l’électrode, plus les brins d’ADN sont collés, plus le signal dégrade rapidement (linéaire)
FAUX
Plus les brins d’ADN sont espacés, plus le signal dégrade rapidement
Vrai ou faux : Plus l’analyte à détecter est de grande taille (Ex anticorps), plus l’encombrement stérique est important et donc plus l’analyte peut être détecté à une densité de brin d’ADN de capture légèrement plus basse
VRAI
Quel est l’avantage principal de la technologie eSHHA?
Elle est suffisamment sélective pour être utilisée avec un sang total
Nommer un avantage considérable de la technologie eSHHA pour l’utilisation avec des anticorps (p/r aux autres technologies du même type)
Il n’y a pas de modification du courant dans les minutes suivant l’application de l’échantillon de sang total
- Pas de signal produit avant que les brins d’ADN s’hybrident
- Possible puisque le marqueur rédox est présent sur de brin d’ADN signal plutôt que sur la surface de l’électrode
Vrai ou faux : La technologie eSHHA peut être adaptée pour la détection simultanée de plusieurs analytes dans des matrices complexes
VRAI
Comment la technologie eSSHA peut-elle permettre la détection de plusieurs analytes en même temps?
En utilisant plusieurs électrodes contenant chacune différentes séquences d’ADN de captures et les brins d’ADN signal correspondants liés à des éléments de reconnaissance spécifique à l’analyte
Quel est le temps requis pour obtenir un résultat dans le sang total avec eSHHA?
< 10 minutes
Vrai ou faux : La réduction de gain de signal est proportionnelle à la taille de la cible de la macromolécule mais inversement proportionnelle à la taille de l’élément de reconnaissance.
VRAI
Nommer un avantage de la technologie eSHHA par rapport aux autres technologies utilisant l’électrochimie
- Génère un signal électrochimique 10x plus élevé
Nommer des avantages de la technologie eSHHA par rapport aux méthodes conventionnelles (ELISA, Western blot, FIA)
- Mesure en une seule étape
- Pas d’étape de lavage et d’incubation
- Pas de réactifs
- Ne requiert pas de personnel spécialisé pour la mesure
- Résultat en seulement quelques minutes
- Technologie portative peu couteuse
Nommer des avantages de la technologie eSHHA par rapport aux dosages immunologiques sur bandelettes
- Résultat quantitatif
- Peut détecter plusieurs analytes en même temps
