Vettori di clonaggio e Proteine ricombinanti Flashcards
Per quali scopi vengono prodotti RNA e proteine in vitro? Grazie a quali molecole è possibile la produzione in vitro?
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Che cosa significa produrre RNA e proteine in vitro e quali principi devono necessariamente essere rispettati?
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Quale molecola è necessaria affinché ci possa essere una produzione in vitro di RNA e proteine? In che tipo di sistema deve essere inserita e tramite che cosa viene fatto?
176
Che cos’ è un plasmide, dove si trova e quali sono le sue principali caratteristiche e funzioni?
176
Qual’è l’ elemento fondamentale che deve essere presente nella struttura di un plasmide e per quale motivo? Quali possono essere altri due elementi strutturali utili per il plasmide?
176
Quando i plasmidi sono definiti coniugativi?
176
Come viene visualizzata la struttura di un plasmide in laboratorio?
176
Quali due caratteristiche di un plasmide permettono di essere inseriti e amplificati come DNA esogeno in una cellula batterica ospite?
177
Da che cosa è affiancato il gene di interesse nei plasmidi per la produzione di una proteina desiderata nella cellula ospite?
177
Quali sono le fasi che vengono svolte nel modificare la struttura di un plasmide per renderlo in grado di autoreplicarsi e produrre proteine in una cellula ospite?
177
Attraverso quale processo è possibile inserire un gene target in un plasmide e quali sono gli elementi fondamentali che devono essere presenti?
177
Tramite quali due sistemi si otterrà in poco tempo una grande quantità di plasmide in cellule ospiti?
177
A cosa serve nello specifico l’inserimento di un gene per la resistenza ad antibiotico in un plasmide?
177
Data la non spontaneità nell’ inserire un plasmide in una cellula, quali due metodi di trasformazione vengono impiegati per farlo?
178
Cosa si fa una volta ottenuta una quantità sufficiente di plasmidi nelle cellule batteriche?
178
Quali altri vettori vengono utilizzati, per esigenze di ricerca, quando non basta la quantità di plasmidi ottenuti dopo la loro replicazione nelle cellule, e che caratteristiche devono avere?
178
Cosa possiede la cellula batterica per assimilare DNA dall’ esterno nel caso della coniugazione e nel caso della trasformazione?
179
Come si rende una cellula competente alla trasformazione, per inserire un DNA esogeno in una cellula?
179
Cosa bisogna fare dopo aver reso una cellula competente alla trasformazione, per inserire DNA esogeno al suo interno?
180
Cosa bisogna fare dopo aver introdotto DNA esogeno all’ interno di una cellula nel processo di trasformazione con heat shock?
180
Perché il processo di trasformazione delle cellule competenti con il DNA plasmidico risulta essere molto poco efficiente? Cosa viene fatto per risolvere questo problema?
180
Che principio sfruttato i geni per la resistenza agli antibiotici e cosa devono possedere affinché vengano trascritti nel plasmide introdotto nella cellula batterica?
180
Cosa deve possedere il terreno solido in cui è introdotta la popolazione batterica che ha introdotto il plasmide, oltre all’ antibiotico?
181
Quale è il processo in cui si isola una sequenza di DNA di interesse e la si inserisce in un vettore?
182
Da che tipo di acido nucleico e costituito il vettore che serve al clonaggio molecolare e per quale motivo?
182