Esempio pratico di esercizio

Question 1

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con cellule in coltura, quale è la prima cosa da fare per comprendere se la mutazione è patogenica?

Answer 1

231

Question 2

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con cellule in coltura, quali sono le due modalità per studiare le mutazioni sulle cellule?

Answer 2

231

Question 3

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con cellule in coltura, nel gain of function con un plasmide, quale tipologia di promotori si può utilizzare in base allo scopo?

Answer 3

231

Question 4

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con cellule in coltura, nel gain of function con un plasmide, quali sono le opzioni per introdurre il plasmide nelle cellule?

Answer 4

231

Question 5

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con cellule in coltura, nel gain of function con un plasmide, una volta introdotto nella cellula, che risultato ci si aspetta di vedere?

Answer 5

231

Question 6

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con cellule in coltura, nel gain of function con un plasmide, quali sono le strategie che si usano per verificare l’incorporazione della sequenza nel DNA della cellula?

Answer 6

231

Question 7

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con cellule in coltura, nel gain of function con un plasmide, una volta noto che il target è espresso cosa si deve fare in ultima fase?

Answer 7

232

Question 8

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con cellule in coltura, nella CRISPR-cas9 quali sono le tre componenti necessarie e cosa fanno?

Answer 8

232

Question 9

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con cellule in coltura, nella CRISPR-cas9 cosa bisogna ricercare se si vuole utilizzare Cas9?

Answer 9

232

Question 10

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con cellule in coltura, con CRISPR-cas9, che differenza c’è fra l’ esone modificato e l’ esone wild type?

Answer 10

232

Question 11

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con cellule in coltura, con CRISPR-cas9 cosa bisogna fare per verificare che la mutazione è stata integrata e cosa bisogna fare per verificare se la mutazione è presente in omozigosi o in eterozigosi?

Answer 11

232

Question 12

Esempio pratico: Perché spesso non basta fare un esperimento con cellule in vitro e si ricorre anche ad esperimenti fatti con organismi interi?

Answer 12

232

Question 13

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con organismi interi, quali sono i topi modelli utilizzati?

Answer 13

232

Question 14

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con organismi interi, Cosa bisogna determinare relativamente alla proteina di interesse? Per quale passaggio è importante saperlo?

Answer 14

232/233

Question 15

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento fatto con organismi interi, quali sono i tipi di promotori che si possono utilizzare e in quali situazioni?

Answer 15

233

Question 16

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento di knock out/in fatto con organismi interi, nel caso di pazienti eterozigoti che modello bisogna scegliere qual’ora il gene di interesse sia dominante o recessivo?

Answer 16

233

Question 17

Esempio pratico: Se consideriamo un esperimento di knock out/in fatto con organismi interi, cosa bisogna fare alla fine dell’ esperimento? Che strumenti si possono usare?

Answer 17

233

Question 18

Esempio pratico: Nel confronto tra gain e loss of function, di cosa c’è bisogno innanzitutto per capire se c’ è stato un effettivo cambiamento negli organismi modificati?

Answer 18

233

Question 19

Esempio pratico: Nel confronto tra gain e loss of function, come si fa a discriminare se una mutazione è loss o gain of function?

Answer 19

234

Question 20

Esempio pratico: Nel confronto tra gain e loss of function, è un’informazione utile sapere se vi è una condizione di eterozigosi o omozigosi negli individui malati?

Answer 20

234

Question 21

Esempio pratico: Nel confronto tra gain e loss of function, nelle cellule coltivate in coltura, quali sono i tre modi per fare loss of function? Perché non si può usare un dominante negativo? Cosa verifico alla fine

Answer 21

234/235

Question 22

Esempio pratico: nel loss of function in vivo, che tipo di topo modello bisogna scegliere e che cosa si può fare?

Answer 22

235

Question 23

Esempio pratico: nel loss of function in vivo, se si ha un topo con genotipo X fl/fl (omozigote negli alleli floxati), com’è fenotipicamente e perché?

Answer 23

235

Question 24

Esempio pratico: nel loss of function in vivo, in che modo si può fornire al topo la cre ricombinasi? Nel caso in cui si voglia fare knock out tessuto specifico, cosa bisogna fornire insieme ad essa?

Answer 24

235

Question 25

Esempio pratico: nel loss of function in vivo, se la tessuto specificità riguarda i neuroni, una volta fornite alle cellule i siti LoxP, la Cre, il suo promotore specifico, cosa accade nelle cellule muscolari e cosa invece nei neuroni? In quale delle due cellule quindi non si vedrà l’mRNA della proteina di interesse?

Answer 25

235/236

Question 26

Esempio pratico: se si effettua un esperimento di knock out cosa ci si aspetta sul fenotipo del topo mutante, nel caso in cui la mutazione sia loss of function e nel caso in cui sia gain of function?

Answer 26

236

Question 27

Esempio pratico: nel loss of function in vivo, come posso studiare come la mutazione diventa problematica per le cellule?

Answer 27

236

Question 28

Esempio pratico: nel loss of function in vivo, per capire cosa sia successo alle cellule durante l’ esperimento, quali indagini molecolari si possono fare? Cosa si intende per meccanismo adattativo e meccanismo primario?

Answer 28

236/237

Question 29

Esempio pratico: Come si può vedere dopo un esperimento di loss of function o gain of function, come cambia il profilo trascrizionale delle cellule mutanti?

Answer 29

237